国家自然科学基金(30970699)
- 作品数:6 被引量:25H指数:3
- 相关作者:赵德伟王本杰黄诗博刘春晖谢辉更多>>
- 相关机构:大连大学附属中山医院德阳市人民医院四川省人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 不同应力对坏死股骨头自身修复过程中血管内皮生长因子表达的影响被引量:1
- 2012年
- 目的 探讨不同应力刺激下犬股骨头缺血性坏死后自身修复过程中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达变化及意义.方法 健康比格犬24只,通过液氮冷冻法制成犬股骨头坏死,并对坏死股骨头施以不同的应力,根据承受应力环境不同分为低高及中应力组(B、C、D组).对照组(A组)股骨头不做处理.分别于术后4、8周处死实验犬,取股骨头标本,行HE染色观察组织病理学改变,免疫组化染色及定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测VEGF蛋白及mRNA的表达变化.结果 HE染色提示:D组关节软骨、骨小梁的结构和形态较B、C组改善;免疫组化提示:D组股骨头内VEGF蛋白面积积光度在术后第4、8周显著高于其他各组;RT-PCR检测最示:D组股骨头VEGF mRNA的表达率在术后第4、8周高于其他各组,第8周高于第4周(均P<0.05).结论适当的应力刺激能有效促进犬股骨头骨组织中VEGF蛋白及mRNA的表达,进而有助于促进血管的新生和软骨下骨的重建,可能有利于坏死股骨头的修复.
- 刘春晖赵德伟王本杰
- 关键词:股骨头坏死局部缺血物理刺激内皮生长因子
- 犬关节软骨细胞的体外分离与培养被引量:3
- 2012年
- 背景:自1967年Manning等提出的通过胰蛋白酶和细菌胶原酶联合消化法分离软骨细胞以来,软骨细胞的体外分离培养研究较多,但目前尚无统一标准。目的:研究犬关节软骨细胞在体外分离以及培养的条件,寻求体外扩增软骨细胞较简便、可行、高效的实验方法。方法:取3周龄幼犬关节软骨组织,应用胰酶、胶原酶制定8种消化方法获取软骨细胞,对比不同方法所获取细胞数量及细胞成活率,分离细胞进行原代及传代培养,观察各代软骨细胞形态。结果与结论:在体外分离犬关节软骨细胞的各种方法中,单纯应用Ⅱ型胶原酶消化法获得的软骨细胞数最多,细胞成活率最高。软骨细胞可以通过体外培养获得扩增,并且维持良好的细胞形态及表型,但仅限于5代以内。
- 王朝强田丰德谢辉王本杰刘保一赵德伟
- 关键词:软骨细胞细胞培养免疫组化胰酶
- Bio-gide胶原膜体外复合培养犬骨髓间充质干细胞的软骨分化被引量:1
- 2013年
- 背景:应用组织工程方法修复股骨头坏死后的软骨损伤应解决的2个关键因素是种子细胞和支架材料。目的:探讨Bio-gide胶原膜体外与犬骨髓间充质干细胞复合成软骨的可行性。方法:采用全骨髓血离心法结合贴壁筛选法体外分离培养比格犬骨髓间充质干细胞,观察细胞形态学变化,以细胞表面抗原进行鉴定。采用成软骨诱导培养基诱导第3代骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化作为实验组,设置普通培养基培养对照组,MTT比色法测试软骨细胞生长曲线,并行Ⅱ型胶原免疫组织化学和甲苯胺蓝染色等生物学鉴定。将第3代骨髓间充质干细胞与Bio-gide胶原膜体外复合培养行倒置相差显微镜、扫描电镜观察。结果与结论:采用全骨髓血离心法结合贴壁筛选法获得了高纯度高活性的骨髓间充质干细胞,生长状态良好,扩增能力强,并成功诱导分化为软骨细胞。大量骨髓间充质干细胞在Bio-gide胶原膜上贴附增殖并复层生长,细胞与Bio-gide胶原膜逐渐融为一体;在胶原膜的断面可见胞体伸出突起相互连接包绕胶原膜,其间有明显细胞基质分泌。表明犬骨髓间充质干细胞可在Bio-gide胶原膜上生长并向软骨细胞分化。
- 谢辉杨飞赵德伟王本杰崔大平王威黄诗博
- 关键词:骨髓间充质干细胞软骨缺损种子细胞
- 液氮冷冻犬股骨头坏死过程中细胞因子和组织学的动态变化被引量:4
- 2011年
- 目的研究早期犬股骨头缺血坏死(ONFH)发生、发展过程中组织学改变和细胞因子VEGF的动态表达变化,探讨其在股骨头坏死修复中的意义。方法健康比格犬16只,8~12个月龄,体重8~10kg,取其中4只作为正常对照组(A组,共8髋),其余通过液氮冷冻法制成双侧股骨头坏死模型,作为实验组(B组)。分别于术后4、8、12、18周行CT检查后处死,取股骨头标本行HE染色观察骨小梁形态改变,免疫组化及RT-PCR检测VEGF的表达情况。结果 CT扫描发现术后B组股骨头骨密度首先升高,然后逐渐降低,至第18周出现囊性变和钙化灶。HE染色观察实验组术后4、8周可见关节软骨、骨小梁的结构和形态首先出现部分改善,新骨形成,参与修复,之后坏死紊乱吸收。免疫组化示:B组在术后第4周VEGF蛋白呈阳性表达,至第8周表达最高,这两个时期表达强度均高于A组,此后逐渐降低至第18周仅见微弱阳性表达,与A组无明显差异。RT-PCR检测VEGF mRNA的表达情况进一步显示C组在术后第4、8周VEGF mRNA表达率均高于其他各组。通过SPSS13.0分析,有统计学差异(P<0.05)。结论在ONFH发生早期,出现VEGF的高表达,有助于促进坏死股骨头内血管的新生和软骨下骨的增殖,此后骨小梁开始修复重建,这可能有利于坏死股骨头的修复;坏死中后期VEGF表达微弱,骨小梁进一步吸收萎缩、排列紊乱,部分坏死股骨头塌陷,这可能最终导致坏死过程的不可逆性。
- 刘春晖赵德伟李志刚李金凤王本杰
- 关键词:股骨头缺血性坏死血管内皮生长因子
- 切开复位空心钉内固定及其联合带血管蒂骨组织瓣移植术治疗股骨颈骨折的临床研究被引量:12
- 2013年
- 目的比较切开复位空心钉内固定与切开复位空心钉内固定联合带血管蒂骨组织瓣移植术治疗股骨颈骨折的临床效果。方法97例股骨颈骨折采用切开复位3枚空心钉内固定(对照组,45例)或切开复位2枚空心钉内固定联合带血管蒂骨组织瓣移植术(骨瓣治疗组,52例)治疗,综合评估患者术后髋关节功能Harris评分。结果92例获平均7.28(1-20)年随访,其中对照组42例,骨瓣治疗组50例。术后6、12个月及末次随访时骨瓣治疗组平均Harris评分均高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。对照组骨折不愈合发生率9.5%,股骨头缺血性坏死发生率14.3%;骨瓣治疗组股骨头缺血性坏死发生率2.0%,未发生骨折不愈合。与对照组相比,骨瓣治疗组骨折不愈合及股骨头缺血性坏死发生率更低(P〈0.05)。结论采用空心钉内固定联合带血管蒂骨组织瓣治疗股骨颈骨折远期疗效优于单纯空心钉内固定术,且骨折不愈合及骨坏死发生率较低。
- 安宁赵德伟黄诗博王朝强杨帆
- 关键词:股骨颈骨折内固定空心钉
- 速度向量成像技术评价完全性右束支传导阻滞患者左心室收缩期不同步被引量:4
- 2015年
- 目的应用速度向量成像(VVI)技术分析完全性右束支传导阻滞(CRBBB)患者左心室收缩期同步性,为临床评价CRBBB患者左心室心肌力学及功能提供可靠依据。方法选择2011年3月至11月四川省医学科学院·四川省人民医院收治的CRBBB患者31例,另选取同期性别、年龄匹配的健康志愿者26名作为健康对照组。应用VVI技术获得所有受试者左心室收缩期纵向应变达峰时间(Tsl)、径向应变达峰时间(Tsr)、环向应变达峰时间(Tsc)、旋转角度达峰时间(Tra)。计算左心室18节段心内膜下收缩期纵向、径向、环向应变及旋转角度达峰时间的标准差Tsl-SD、Tsr-SD、Tsc-SD、Tra-SD作为左心室心肌纵向、径向、环向及旋转运动不同步指数。采用独立样本t检验比较健康对照组与CRBBB组Tsl-SD、Tsr-SD、Tsc-SD、Tra-SD差异。结果 CRBBB组左心室壁收缩期不同步指数Tsl-SD、Tsr-SD、Tsc-SD、Tra-SD分别为(27.65±6.78)、(32.63±11.82)、(42.81±9.72)、(37.01±7.73)ms,均高于健康对照组的(26.55±6.99)、(26.63±6.70)、(30.53±8.71)、(27.67±7.11)ms,但仅Tsc-SD、Tra-SD差异有统计学意义(t=4.911、4.980,P=0.000),Tsl-SD、Tsr-SD差异均无统计学意义。结论 CRBBB患者左心室周向及旋转运动不同步;VVI技术可反映左心室收缩期不同方向机械运动同步性。
- 李国治尹立雪沈洁龙滨程重庆
- 关键词:速度向量成像完全性右束支传导阻滞心室功能