国家自然科学基金(81271054)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：李华斌韦屹张涵左可军陈曦更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院深圳市第二人民医院上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
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- 血红素氧合酶1在鼻息肉组织中的表达及糖皮质激素的调节作用被引量：9
- 2016年
- 目的 检测抗氧化应激反应的血红素氧合酶1（Heme oxygenase-1,HO-1）在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）患者鼻息肉组织中的表达及可能的调节机制.方法 收集25例CRSwNP患者的鼻息肉组织,并选取19例鼻中隔偏曲患者的钩突黏膜组织作为对照组.采取实时定量反转录聚合酶链反应（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）、免疫组化及Western blot检测鼻息肉及钩突组织中HO-1的表达.另外选取15例鼻中隔偏曲患者的钩突黏膜组织进行组织培养,检测不同细胞因子和糖皮质激素对鼻黏膜组织中HO-1 mRNA的调节作用.以SPSS 20.0软件进行统计学分析.结果 HO-1 mRNA和蛋白质在鼻息肉组织中表达水平为1.220±0.397、1.409 ±0.701,明显高于对照组的0.464±0.318、0.017 ±0.114,差异有统计学意义（U值分别为22.00、1.00,P值均＜0.05）.免疫组化结果显示HO-1在鼻息肉组织中的黏膜上皮细胞、黏膜下腺体细胞及炎症细胞上均有表达.体外组织刺激试验提示白细胞介素（IL） 17A刺激后HO-1 mRNA表达上调,刺激前为1.000,不同浓度IL-17A刺激后分别为17.264±4.275、19.128±4.605,差异有统计学意义（U=0,P＜0.05）.地塞米松刺激后,HO-1 mRNA明显下调,刺激前为1.000,不同浓度地塞米松刺激后分别为0.370±0.101、0.316 ±0.167,差异有统计学意义（U=0,P＜0.05）.转化生长因子β1（TGF-β1）刺激后,HO-1mRNA表达水平下调,刺激前后分别为0.217±0.322、0.070±0.070,差异有统计学意义（U=0,P＜0.05）.结论 鼻息肉组织中HO-1表达上调,并受糖皮质激素抑制,提示HO-1可能可以作为糖皮质激素干预的一个靶点.
- 王宇余志坚施俊程岚左可军孟国珍文卫平李华斌
- 关键词：血红素加氧酶-1鼻息肉氧化性应激HEMEOXYGENASE
- 天然免疫蛋白PLUNC在鼻息肉中的表达及与鼻息肉临床特征的关联性被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨天然免疫蛋白腭、肺、鼻上皮克隆(PLUNC)在鼻息肉组织中的表达情况,分析PLUNC蛋白浓度与鼻息肉大小(鼻内镜记分)和手术后复发的关联性。方法:采用免疫组织化学和实时定量PCR检测鼻息肉组(28例鼻息肉患者,其中13例为术后复发患者)和对照组(16例钩突黏膜对照)PLUNC的组织染色定位和mRNA的表达情况,同时采用ELISA检测初发和复发鼻息肉组织中PLUNC的蛋白浓度差异,评估PLUNC蛋白浓度与息肉大小、鼻塞、流涕症状记分的相关性。结果:鼻息肉组织中PLUNC主要定位在黏膜上皮和腺体,染色强度记分显著低于对照的钩突组织(P<0.01);PLUNC mRNA表达水平也显著低于对照的钩突组织(P<0.01)。初发和复发鼻息肉组织中PLUNC蛋白OD值分别为0.33±0.11和0.15±0.05,差异有统计学意义(P<0.01)。小型和大型鼻息肉PLUNC蛋白OD值分别为0.32±0.14和0.19±0.07,差异有统计学意义(P<0.05)。鼻息肉组织中PLUNC蛋白浓度与鼻塞和流涕记分存在显著负相关(r=-0.51和r=-0.57,P<0.01)。结论:PLUNC的表达降低提示鼻息肉的发生可能与天然免疫反应的减弱有关,因此,上调天然免疫分子如PLUNC等的表达可作为干预鼻息肉发病的一个新策略。
- 陆奇胜张佳张涵韦屹李华斌
- 关键词：鼻息肉天然免疫鼻塞流涕
- 双链RNA对鼻上皮细胞表达上皮中性粒细胞活化肽78的诱导作用
- 2014年
- 目的观察双链RNA对离体培养的气道上皮细胞表达上皮中性粒细胞活化肽（epithelial neutrophil activating peptide,ENA）78的诱导作用。方法离体培养的鼻息肉上皮细胞（polyp epithelial cells,PECs）和人支气管上皮细胞（human bronchial epithelial cells,HBECs）经过双链RNA模拟物聚肌胞苷酸（Polyinosinic：polycytidylic acid,Poly I：C）刺激0~24h后,通过定量聚合酶链反应（quantitative-polymerase chain reaction,Q-PCR）和酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测ENA78 mRNA和蛋白水平的表达变化;通过Transwell技术检测Poly I：C诱导的ENA78对中性粒细胞的趋化作用。结果 Poly I：C刺激后,PECs和HBECs 2类气道上皮细胞ENA78 mRNA和蛋白的表达显著增高（t=21.7、19.8,P均=0.001）。Poly I：C诱导的HBECs上清对中性粒细胞存在显著的趋化作用（t=20.8,P=0.001）,后者能被加入ENA78抗体显著抑制（t=12.9,P=0.001）。结论双链RNA能诱导气道上皮细胞表达ENA78进而诱导中性粒细胞趋化,抑制ENA78可作为干预由病毒感染导致的鼻息肉组织中性粒细胞聚集的一个关键靶点。
- 张涵陈曦韦屹李华斌
- 关键词：鼻黏膜上皮细胞中性白细胞病毒
- 紧密连接蛋白Occludin在鼻息肉中的表达及调节被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨紧密连接蛋白Occludin在鼻息肉发病中的作用.方法 采用免疫组化和实时荧光定量聚合酶链反应检测鼻息肉组织（n=20）和健康对照组钩突组织（n=15）中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin及ZO-1蛋白及其mRNA的表达.并通过离体细胞培养模型检测白细胞介素（interleukin,IL）6、IL-13、IL-17、γ干扰素（interferon-y,IFN-γ）、转化生长因子β（transforming growth factor-β、TGF-β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）刺激对鼻黏膜上皮细胞表达Occludin mRNA和蛋白的调节作用.以SPSS 16.0软件进行统计学分析.结果 紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin和ZO-1在鼻息肉与对照组钩突组织中均有表达,主要表达部位在鼻黏膜上皮细胞的细胞膜与细胞质.鼻息肉组Claudin-1、Occludin及ZO-1的平均吸光度值分别为0.187±0.076、0.172 ±0.109、0.098±0.035,均较对照组的0.312 ±0.101、0.220±0.069、0.233±0.093明显减少,差异有统计学意义（t值分别为9.345、3.301、13.323,P值均＜0.01）.鼻息肉组织中Occludin mRNA相对表达量为0.000 117 ±0.000 035,低于对照组的0.000464±0.000 134,差异具有统计学意义（Z=-5.0,P＜0.05）,而Claudin-1和ZO-1 mRNA在两组之间表达差异无统计学意义（P值均＞0.05）.IL-13、IL-17和IFN-γ等促炎因子刺激鼻黏膜上皮细胞后,Occludin mRNA相对表达量分别为0.631±0.039、0.581±0.029、0.648±0.040,与未刺激对照组相比,差异有统计学意义（f值分别为16.299、24.669、14.995,P值均＜0.05）.蛋白免疫印迹结果显示上述因子刺激组与未刺激对照组相比Occludin蛋白表达升高,差异有统计学意义（t值分别为9.880、8.442、7.310,P值均＜0.05）.结论 紧密连接蛋白Occludin表达降低可能是鼻息肉发生的原因之一.
- 陈曦郭洁波张涵左可军韦轶史剑波李华斌许庚
- 关键词：鼻息肉连接蛋白类闭锁蛋白细胞因子类实时聚合酶链反应
- 白细胞介素-17A对鼻黏膜上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的刺激作用及分子机制被引量：9
- 2013年
- 目的观察重组人白细胞介素17A(interleukin-1 7 A,I L-1 7 A)刺激离体培养的人鼻黏膜上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNECs)后黏蛋白MUC5AC mRNA的表达变化,并检测相关的信号通路。方法离体培养的HNECs经过IL-17A诱导0～6 h后,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chainreaction,Q-PCR)技术检测MUC5AC mRNA的表达变化;通过Western blot技术检测有无特异性阻断剂作用时p38信号通路的活化情况及相应MUC5AC mRNA的表达情况。结果 IL-17A在1 ng/ml即能诱导HNECs中MUC5AC的mRNA水平上调,并在浓度为100 ng/ml时达到峰值(F=48.60,P<0.01);p38信号通路在IL-17A诱导后开始活化,并在第30分钟达到最大程度,之后信号递减并趋于正常;采用p38特异性阻断剂SB203580抑制p38信号通路后,MUC5AC mRNA的上调得到抑制(F=223.8,P<0.01)。结论 IL-17A能通过p38信号通路诱导HNECs表达MUC5AC mRNA的过程,阻断p38信号通路可能作为干预由IL-17A诱导导致的气道黏液高分泌状态的一个关键靶点。
- 白晶苗北平夏文彤韦屹李华斌熊观霞
- 关键词：鼻黏膜上皮细胞白细胞介素17黏蛋白类信号传导
