您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(31171431)

作品数:3 被引量:14H指数:2
相关作者:白杨周家喜苏培高洁刘鑫更多>>
相关机构:北京协和医学院长江大学河北北方学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇造血
  • 2篇人胚
  • 2篇人胚胎
  • 2篇人胚胎干细胞
  • 2篇胚胎
  • 2篇胚胎干细胞
  • 2篇干细胞
  • 1篇造血分化
  • 1篇造血祖细胞
  • 1篇人类胚胎
  • 1篇人类胚胎干细...
  • 1篇嗜中性粒细胞
  • 1篇中性粒细胞
  • 1篇祖细胞
  • 1篇细胞
  • 1篇粒细胞
  • 1篇基因
  • 1篇基因敲除
  • 1篇分化
  • 1篇S2基因

机构

  • 2篇北京协和医学...
  • 1篇河北北方学院
  • 1篇长江大学
  • 1篇南开大学

作者

  • 2篇杨亦青
  • 2篇刘鑫
  • 2篇高洁
  • 2篇苏培
  • 2篇周家喜
  • 2篇白杨
  • 1篇卢利莎
  • 1篇熊涛
  • 1篇庞素蕾
  • 1篇朱正茂
  • 1篇许元富
  • 1篇田莎
  • 1篇王洪涛
  • 1篇刘翠翠
  • 1篇王钰
  • 1篇张磊升
  • 1篇吴清清

传媒

  • 1篇Scienc...
  • 1篇中国科学:生...
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2015
  • 2篇2013
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系被引量:11
2015年
CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进行修复,从而实现基因的敲除、敲入等。MEIS2属于一类高度保守的同源盒转录因子MEIS家族,研究发现,MEIS2广泛参与胚胎的早期发育及肿瘤的发生发展,但其发挥作用的机制目前还不是很清楚。该研究针对MEIS2基因作用的功能域,设计两个靶向MEIS2基因Exon3和Exon8的sg RNA,通过SURVEYOR分析及Western blot检测,确认了所设计sg RNA的有效性。进一步通过细胞分选及Western blot检测筛选出稳定敲除MEIS2基因的HEK293T细胞株。最后,通过序列测定确认MEIS2发生了移码突变。综上所述,该研究利用CRISPR/Cas9技术成功建立了完全敲除MEIS2的HEK293T细胞株,为研究MEIS2的功能和作用机制提供了有效工具。
卢利莎白杨刘鑫王洪涛高洁杨亦青苏培刘翠翠王钰张磊升熊涛周家喜
关键词:基因敲除
一种高效的人胚胎干细胞早期造血分化和功能筛选模型的建立
2013年
人胚胎干细胞具有分化为造血前体细胞及各种功能血细胞的潜能.但是,目前的分化筛选模型定向诱导分化效率很低,分化程序复杂且较难建立,分化的细胞功能存在缺陷,这些严重影响了对人胚胎干细胞造血分化和功能成熟分子机理的了解.所以,迫切需要建立一种简单且方便进行基因操作的高效的造血分化和功能筛选模型,用于揭示分化过程中动态的分子信号和实时调控机理.本研究中,采用分步法在不依赖血清及基质细胞的条件下,建立了一种高效分化产生造血前体细胞的方法,CD34+CD31+造血前体细胞的比例可达到25%.产生的造血前体细胞可以进一步诱导分化为红系、粒系及粒-巨噬系集落.此外,携带针对T基因干扰shRNA的慢病毒可高效感染人胚胎干细胞,实现高效干扰,调控造血分化效率.本研究建立了一种高效分化产生造血前体细胞的方法,同时表明此模型可以有效与shRNA文库结合,筛选调控人胚胎干细胞造血分化的关键基因,为揭示人胚胎干细胞造血分化机理,以及设计更加完善的分化体系高效获得功能成熟的血细胞用于药物筛选及细胞治疗打下了基础.
庞素蕾吴清清田莎苏培白杨高洁杨亦青刘鑫朱正茂许元富周家喜
关键词:人胚胎干细胞造血分化
Establishment of a highly efficient hematopoietic differentiation model from human embryonic stem cells for functional screening被引量:3
2013年
Human embryonic stem cells (hESCs) have been successfully differentiated into hematopoietic progenitor cells with colony formation capacity and further into various kinds of blood cells including erythrocytes, megakaryocytes, neutrophils, nature killer cells and T lymphocytes . Nevertheless, the differentiation efficiency is extremely low. The differentiation usually involves complex steps such as embryonic body formation or co-culture with stromal cells, causing inconsistencies and difficulties in dissection of its molecular mechanisms [8,9]. Therefore, it is essential to establish a well-defined hematopoietic differentiation model that is independent of serum and stromal cells and much easier to manipulate genes for functional screening, thus the underlying molecular mechanism of hematopoietic differen- tiation of hESCs could be dissected more easily.
PANG SuLeiWU QingQingTIAN ShaSU PeiBAI YangGAO JieYANG YiQingLIU XinZHU ZhengMaoXU YuanFuZHOU JiaXi
关键词:人胚胎干细胞造血祖细胞人类胚胎干细胞嗜中性粒细胞
共1页<1>
聚类工具0