国家自然科学基金(81202167)
- 作品数：9 被引量：14H指数：3
- 相关作者：傅跃先袁心刚魏光辉刘翠苹王晨更多>>
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- 叶酸和α-萘黄酮对TCDD致胎鼠腭裂的拮抗作用研究被引量：1
- 2014年
- 目的进一步探讨叶酸和α-萘黄酮预防胎鼠腭裂发生的作用,并对比两者的效果。方法将孕鼠随机分为7组,每组8只,于受孕第10天(GD10)以四氯二苯二英(TCDD)28μg/kg灌胃;对照组以玉米油0.1 ml灌胃;叶酸组分别以叶酸15、10、5 mg/kg+TCDD 28μg/kg灌胃;α-萘黄酮分别以α-萘黄酮5 mg/kg、50μg/kg+TCDD 28μg/kg灌胃。受孕第17.5天(GD17.5)处死孕鼠,称量孕鼠及胚胎体重,记录活胎鼠数、腭裂数、吸收胎及死胎鼠数;并剪取胎鼠头部,解剖显微镜下观察。结果TCDD 28μg/kg所致胎鼠腭裂发生率为92.86%,对照组未见胎鼠腭裂形成。TCCD+叶酸15、10、5 mg/kg三组致胎鼠腭裂发生率分别为84.00%、73.08%、86.00%。α-萘黄酮5 mg/kg、50μg/kg+TCDD组胎鼠腭裂发生率分别为65.52%、74.00%。各实验组孕鼠体重增加量、活胎鼠体重及每窝平均胎数、每窝活胎数、死胎和吸收胎数与对照组及TCDD组相比,差异均无统计学意义。结论试验剂量的叶酸与α-萘黄酮均有一定的拮抗TCDD诱导胎鼠腭裂发生的作用,以叶酸10 mg/kg、α-萘黄酮5 mg/kg的剂量的拮抗作用较强;两者作用效果无明显差异,且对孕鼠及胎鼠的生长发育无明显影响。
- 何晓梦刘翠苹袁心刚魏光辉傅跃先
- 关键词：叶酸腭裂C57BL
- TCDD诱导C57BL／6J胎鼠腭裂过程中组蛋白H4乙酰化的表达被引量：1
- 2018年
- 目的检测在2，3，7，8-四氯二苯二噁英（2，3，7，8-tetrachlorod-ibenzo-P-dioxin，TCDD）诱导的C57BL／6J小鼠腭裂过程中组蛋白H4乙酰化的表达水平，探讨TCDD诱发腭裂与组蛋白H4乙酰化的相关性。方法48只C57BL／6J近交系孕鼠完全随机分为实验组和对照组，在小鼠妊娠第10．5天（gestationday，GD10．5）时，一次性给予孕鼠分别灌服20μg/kgTCDD（实验组）和等剂量玉米油（对照组），分别在GD13．5、GD14．5、GD15．5剖腹取胎鼠头部标本，作冠状位组织切片，采用免疫组织化学染色观察组蛋白H4乙酰化在腭突中的表达，Western Blotting检测胎鼠腭组织组蛋白H4乙酰化的相对表达量。应用SPSS24．0进行统计分析，统计方法采用单因素方差分析和方差同质性检验，方差齐采用Bonferroni检验，方差不齐者采用校正t检验，P〈0．05表示差异有统计学意义。结果组蛋白H4乙酰化主要表达在腭突上皮细胞中，间质细胞少许表达；在腭发育各个主要时期GD13．5、GD14．5、GD15．5腭突上皮细胞的相对表达量分别是：对照组为0．60±0．25、0．92±0．09和0．90±0．09；TCDD组为1．02±0．28、1．61±0．27和1．28±0．13，2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TCDD诱导的C57BL／6J胎鼠腭裂的发生可能与组蛋白H4乙酰化修饰有关。
- 张丁文袁心刚傅跃先王晨邱林魏光辉
- 关键词：乙酰化腭裂
- 先天性唇腭裂综合序列治疗502例临床护理程序效果观察被引量：3
- 2014年
- 目的:总结采取综合序列治疗502例先天性唇腭裂患者手术前后临床护理经验,旨在进一步提高护理质量。方法:对502例先天性唇腭裂患者行手术整复,并给予手术前后临床护理程序,包括健康宣教、心理护理、术前护理、术后护理、出院指导等。结果:本组患者临床效果均满意,414例患者唇部创口一期愈合,外貌明显改善,11例腭裂术后发生腭瘘或复裂,其余患者创口愈合良好,语音明显改善。结论:规范的手术前后临床护理程序有助于唇腭裂患者整复手术的成功。
- 何立平王选琴何轶袁心刚傅跃先
- 关键词：先天性唇腭裂手术护理
- iTRAQ技术鉴定TCDD与维甲酸致胎鼠腭裂共同表达的差异蛋白质被引量：1
- 2017年
- 目的应用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）技术结合质谱分析筛选2，3，7，8-四氯二苯二噁英（2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）与维甲酸致胎鼠腭裂发生的共同差异表达蛋白质。
方法将36只C57BL/6J孕鼠按照随机数表法分为3组，每组12只。分别以28 μg/kg TCDD、80 mg/kg维甲酸在C57BL/6J孕鼠第10.5个妊娠日（gestational day 10.5，GD10.5）灌胃，建立胎鼠腭裂模型，对照组给予等量玉米油灌胃，于GD17.5观察胎鼠腭部的解剖学及组织学改变；取TCDD组、维甲酸组与对照组GD17.5胎鼠的腭组织，从中提取总蛋白质，采用iTRAQ技术联合二维液相色谱-串联质谱分析和鉴定实验组与对照组的差异表达蛋白质；用Western Blot对Annexin A1、14-3-3 sigma差异蛋白进行表达验证。实验数据应用SPSS17.0软件进行统计分析，腭裂发生率的比较采用卡方检验，3组目的蛋白相对表达量比较采用单因素方差分析，方差齐性分析采用Levene检验，组间比较采用Turkey HSD检验，P〈0.05为差异有统计学意义。
结果①成功建立了胎鼠腭裂模型，TCDD组与维甲酸组腭裂发生率分别为97.1%（68/70）和98.6%（70/71），2组比较差异无统计学意义（χ2＝0.00，P〉0.05），腭裂表型在形态学上相似。②共鉴定出2 996个蛋白质，TCDD组、维甲酸组与对照组比较，分别筛选出差异蛋白75个和90个，2个实验组共同表达的差异蛋白有18个。③Western Blot结果显示，Annexin A1蛋白表达水平对照组为0.52±0.11，TCDD组和维甲酸组分别为0.99±0.34和0.98±0.31，分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）；14-3-3 sigma蛋白表达水平对照组为0.55±0.15，TCDD组和维甲酸组分别为0.86±0.17和0.93±0.13，分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0.05），与iTRAQ检测结果一致。
结论应用iTRAQ技术能够�
- 翟莎娜王晨傅跃先袁心刚张丁文
- 关键词：腭裂维甲酸
- 表观遗传修饰在先天性畸形发生中的调节作用
- 2016年
- 随着自然界环境污染的加重,先天性畸形的发生率逐年增高,据统计,全世界新生儿的先天性畸形发生率达4.5％,我国达6.3％.近年来,随着表观遗传学研究的兴起,表观遗传修饰在先天性畸形中的研究越来越广泛.表观遗传学指的是基因的DNA序列没有发生改变,但基因的表型却发生了可逆的、可遗传的变异,它主要包括：DNA甲基化、组蛋白修饰及microRNA干扰等[1].
- 刘翠苹傅跃先
- 关键词：表观遗传修饰先天性畸形畸形发生率表观遗传学DNA序列
- TCDD诱导胎鼠腭裂的实验研究进展
- 2017年
- 目的:总结归纳2,3,7,8-四氯二苯二英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导胎鼠腭裂的实验研究现状,为深入探讨TCDD致胎鼠腭裂的发生机制提供新的思路。方法:通过中国知网、NCBI等国内外文献库检索"TCDD""腭裂"等关键词,搜集已有文献资料。结果:目前的资料显示,可以通过约20μg/kg剂量的TCDD给予孕第9~14天的小鼠单次灌胃建立稳定的胎鼠腭裂模型。在此基础上发现,TCDD诱导不涉及腭突体积变化,主要通过抑制腭突接触融合而发挥致腭裂效应。对于发育中的腭组织细胞,TCDD能改变一系列调节细胞增殖、分化、凋亡的生长因子及其受体的表达,主要包括表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)、芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)。这些分子的表达变化尚存在争议。腭融合过程中发挥关键作用的腭中缝上皮细胞(medial edge epithelium,MEE),其细胞命运转归尚未阐明。结论:TCDD诱导胎鼠腭裂的体内实验基础相对完善。腭发育调控机制纷繁复杂,注重器官发育的时空动态性对于进一步研究至关重要。腭器官离体培养将是重要的体外实验环节。实验技术和条件的变革对于本领域的研究进展显得愈加迫切。
- 王晨袁心刚傅跃先
- 关键词：胎鼠
- TCDD诱导的胎鼠腭裂发生过程中TGF—β3、Dnmts启动子区CpG岛甲基化状态研究
- 2017年
- 目的研究2，3，7，8-四氯二苯二噁英（2，3，7，8-tetrachlrodibenzo-p—dioxin，TCDD）诱导的胎鼠腭发育过程中转化生长因子β3（transforming growth factor beta3，TGF-β3）、DNA甲基转移酶（DNA methyltransferases，Dnmts）基因启动子区CpG岛甲基化状态与TGF—β1、Dnmts表达量的相关性。方法将18只C57BL／6J孕鼠完全随机分为TCDD组和对照组，每组各9只。TCDD组于妊娠第10．5天（gestation day，GD10．5）给予28μg／kg的TCDD口服，对照组给予等体重体积的玉米油口服。分别于GD13．5、14．5、15．5处死孕鼠，收集2组胎鼠腭突组织。通过试剂盒进行基因组DNA提取、亚硫酸氢盐转化、甲基化特异性PCR，将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，分析2组各时间点腭组织表达的TGF-β3、Dnmts启动子CpG岛甲基化状态。应用IBMSPSS20．0软件进行统计分析，两样本间均数比较均采用独立样本t检验，所有结果作K-S检验均符合正态分布，方差不齐者采用校正t检验，P〈0．05表示差异有统计学意义。结果2组各时间点TGF—β3启动子区CpG岛均处于低甲基化水平，TCDD组和对照组GD13．5、GD14．5、GD15．5甲基化程度分别为（8．6±0．8）％和（8．7±0．8）％、（11．5±1．4）％和（11．7±1．0）％、（12．0±0．7）％和（12．1±0．5）％，相同时间点TCDD组与对照组间差异无统计学意义（P〉0．05）。Dnmt1启动子区CpG岛均处于高甲基化水平，TCDD组和对照组GD13．5、GD14．5、GD15．5甲基化程度分别为（73．9±1．1）％和（72．6±0．8）％、（70．8±1．7）％和（70．7±1．0）％、（69．4±2．2）％和（69．7±0．5）％，相同时间点TCDD组与对照组间差异亦无统计学意义（P〉0．05）。TCDD组Dnmt3a启动子区CpG岛1的甲基化水平在GD13．5和GD15．5高于对照组，分别为（21．9±1．1）％和（8．1±0．6）％（P〈0．01）、（43．4±0．4）％和（32．9±0．7）
- 王晨袁心刚傅跃先翟莎娜
- 关键词：转化生长因子Β3DNA甲基转移酶CPG岛
- 组蛋白H3乙酰化在TCDD致胎鼠腭裂发生中的作用被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨组蛋白H3乙酰化在2,3,7,8-四氯二苯二噁英（2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD）所致的C57 BL/6J胎鼠腭裂畸形发生中的作用及其机制.方法 共36只C57BL/6J孕鼠,将18只随机分为TCDD组和对照组,每组9只,TCDD组于受孕后第10天（gestation day,GD10）以TCDD 28 μg/kg灌胃1次;对照组于GD10以等量玉米油灌胃;分别于GD13.5、GD14.5及GD15.5处死孕鼠,收集胎鼠的上腭组织提取核蛋白,用比色法检测组蛋白乙酰转移化酶（histone acetyltransferases,HATs）活性.另18只孕鼠随机分为TCDD组和对照组（分组及各组只数同前）,分别在上述时间点提取核蛋白,用Western-blot方法检测乙酰化的组蛋白H3（acetylated histone H3,Ac-H3）在上腭的表达情况.结果 各个时间点HATs相对活性在GD13.5,GD14.5、GD15.5所测吸光度A值对照组分别为0.4097±0.0147、0.5223±0.017 1和0.643 5±0.0139,TCDD组分别为0.8650±0.0129,0.719 1±0.0178和0.551 2±0.016 8;TCDD组HATs活性在GD13.5、GD14.5分别高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;而在GD15.5 TCDD组HATs活性低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.各个时间点Ac-H3相对表达量在GD13.5,GD14.5、GD15.5,对照组分别为0.745 0±0.113 5,1.055 9±0.249 4和1.795 5±0.081 9,TCDD组分别为1.4490±0.1460,1.6418±0.0997和1.512 l±0.1502; TCDD组Ac-H3表达在GD13.5、GD14.5分别高于对照组GD13.5、GD14.5,差异均有统计学意义（P＜O.01,P＜0.05）;而在GD15.5,TCDD组Ac-H3表达低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 组蛋白H3酰化参与了TCDD所致的C57BL/6J胎鼠腭裂的发生,可能是TCDD诱导腭裂发生的机制之一.
- 刘翠苹袁心刚傅跃先邱林田晓菲刘燕魏光辉
- 关键词：组蛋白H3腭裂
- 3种药物对饲服TCDD的胎鼠腭突超微结构的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:观察叶酸、白藜芦醇和α-萘黄酮拮抗四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导胎鼠腭裂发生的效应,及对饲服TCDD的胎鼠腭突表面超微结构的影响。方法:妊娠第10天(gestation day 10,GD10)孕鼠随机分组,每组8只。TCDD组以TCDD 28μg/kg灌胃,对照组以玉米油0.1 ml灌胃,叶酸组以叶酸10 mg/kg+TCDD 28μg/kg灌胃、白藜芦醇组以白藜芦醇50 mg/kg+TCDD 28μg/kg灌胃、α-萘黄酮组以α-萘黄酮5 mg/kg+TCDD 28μg/kg灌胃,于GD17.5在解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率。另取15只孕鼠随机分组,每组3只,处理方法同前,分别于GD13.5、14.5、15.5剪取胎鼠头部,扫描电镜观察腭突表面的超微结构。结果:TCDD组胎鼠腭裂发生率为92.86%,对照组未见胎鼠腭裂形成。叶酸组、白藜芦醇组和α-萘黄酮组胎鼠腭裂发生率分别为73.08%、74.51%、65.52%,与TCDD组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。TCDD组腭中嵴上皮细胞表面逐渐破裂、皱缩,伪足结构逐渐减少、消失,最终形成腭裂;对照组、叶酸组、白藜芦醇组和α-萘黄酮组腭中嵴上皮细胞表面光滑整齐、饱满膨胀,表面丝状伪足逐渐增多、延长,一直持续到腭突融合结束。结论:叶酸、白藜芦醇和α-萘黄酮均能恢复小鼠腭中嵴上皮细胞表面的超微结构,从而拮抗TCDD的致腭裂效应。
- 何晓梦刘翠苹袁心刚魏光辉傅跃先
- 关键词：白藜芦醇腭裂扫描电镜
