上海市科学技术委员会资助项目(08391910900)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：张弛包建强杨捷琳褚庆华楮庆华更多>>
- 相关机构：上海海洋大学上海德诺产品检测有限公司上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市教育委员会重点学科基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 食源性沙门氏菌磁性纳米粒子RT-PCR检测方法的研究
- 2009年
- 建立适合食源性沙门氏菌的RT-PCR检测体系。根据沙门氏菌的转录起始因子rpoD设计引物Salmrpod2/5,以rpoD基因的mRNA为检测对象,在样品制备时采用新型的磁性纳米粒子分离mRNA技术,建立快速检测食品中沙门氏菌的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法。结果表明,Salmrpod2/5引物能有效地将沙门氏菌与其他亲缘关系较近的肠杆菌科细菌区分开来。样品中沙门氏菌添加实验表明,该方法对沙门氏菌的检测下限为10CFU/25ml,检测时间少于18h。该方法具有灵敏、特异、快速的特点,适宜于在食品卫生行业中进行推广及应用。
- 张弛楮庆华孟瑾杨捷琳顾鸣韩奕奕沈鹤柏赵渝郭鲁申李敏支援包建强
- 关键词：沙门氏菌磁性纳米粒子
- RNA逆转录荧光定量PCR检测食源性沙门菌被引量：6
- 2011年
- 目的:针对活的沙门菌,建立快速检测的方法。方法:以沙门菌OmpC基因RNA为检测对象,针对其设计荧光定量PCR引物和探针,摸索合适的反应体系和反应条件,同时以沙门菌及其亲缘关系较近的对照菌株进行特异性实验,以PCR产物克隆质粒和沙门菌纯培养物梯度稀释进行灵敏度实验,最终建立食源性沙门菌快速检测逆转录实时荧光PCR方法。结果:所设计的S-F/S-R引物和S-Probe探针能有效地将沙门菌与其他亲缘关系较近的肠杆菌科细菌如金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、志贺菌等区分开来。该方法对沙门菌纯培养物梯度稀释后的检测下限为<10 CFU/25 ml。同时,将建立的RNA逆转录荧光定量PCR检测方法与DNA荧光定量检测方法进行比较,DNA荧光定量PCR灵敏度仅为103 CFU/ml,远低于逆转录荧光定量PCR,且逆转录荧光定量PCR针对RNA进行检测,与活的沙门菌相关联,准确度更高。结论:建立沙门菌逆转录荧光定量PCR检测技术,具有特异、灵敏、快捷的特点,适用于食品中沙门菌的快速检测。
- 张弛褚庆华杨捷琳孟瑾韩奕奕包建强
- 关键词：沙门菌RNA
