国家自然科学基金(30370607)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
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- 相关机构：兰州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省新药临床前研究重点实验室开放基金更多>>
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- siRNA逆转白血病K562/ADM细胞对抗癌药物耐受性的研究被引量：5
- 2008年
- 目的:研究小干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)对多药耐药细胞K562/ADM耐药性的逆转效应。方法:以K562/ADM细胞为靶细胞,针对mdr1基因mRNA不同靶点设计合成4对siRNA分子,脂质体介导转染K562/ADM细胞,RT-PCR和实时荧光定量PCR检测mdr1基因mRNA的表达水平,流式细胞术(FCM)测定P-糖蛋白(P-gp)表达;MTT比色法检测K562/ADM细胞对多柔比星(ADM)、柔红霉素(DNR)和依托泊苷(Vp-16)的敏感性。结果:选择mdr1mRNA的4个靶点设计合成的siRNA中,针对333靶点的siRNA(simdr1/333)对mdr1基因的表达具有较好的沉默效果,RT-PCR和实时定量PCR检测,mdr1 mRNA表达分别降低69%和63%;FCM检测P-gp的表达强度(MFI)降低约50%。si-mdr1/333可提高K562/ADM细胞对ADM、DNR和Vp-16的敏感性,耐药逆转倍数分别为3.45、1.70和2.91倍。结论:siRNA能特异性地阻抑白血病多药耐药细胞K562/ADM细胞mdr1基因的表达,逆转其对抗癌药物的耐受性。
- 祁萍安娴高丽萍魏虎来
- 关键词：小分子干扰基因基因沉默白血病
- 靶向siRNA沉默mdr1基因表达及对白血病耐药细胞系K562/ADM的耐药逆转作用被引量：5
- 2007年
- 目的研究小干扰 RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞系 K562/ADM 细胞 mdr1基因表达的沉默作用和凋亡抑制的逆转效应。方法 K562/ADM 为靶细胞,设汁、筛选和合成2对针对mdr1基因 mRNA 的 siRNA(mdr1 siRNA-1和 mdr1 siRNA-2),用脂质体介导转染 K562/ADM 细胞;实时荧光定量 PCR(real-tMe PCR)法检测 mdr1 mRNA 的表达;流式细胞术测定 P-糖蛋白(P-gp)水平和caspase-3活性;细胞形态学和 FITC 标记的膜联蛋白 V/碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染色法检测细胞的凋亡。结果筛选出的 mdr1 siRNA-1和 mdr1 siRNA-2显著抑制 K562/ADM 细胞 mdr1的表达,mdr1 mRNA 的表达分别降低91.2%和82.0%,P-gp 水平下降74.1%和84.4%;增强 caspase-3活性,活化 caspase-3增加约40%;K562/ADM 耐药细胞对阿霉素诱导凋亡的敏感性增强,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率提高约60%。结论 siRNA 通过沉默 mdr1/P-gp 表达而逆转 K562/ADM 多药耐药细胞的凋亡抑制现象。
- 魏虎来高丽萍景涛赵怀顺易娟孙静韩俭
- 关键词：RNA干扰
- siRNA抑制K562/ADM细胞mdr1基因表达并逆转其耐药性被引量：7
- 2007年
- 背景与目的白血病耐药性是白血病治疗中的难点,RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点,可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子(siRNA)对白血病多药耐药K562/ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法设计、筛选和合成针对mdr1基因的siRNAs(si-mdr1-1,si-mdr1-2),脂质体介导转染K562/ADM细胞;RT-PCR法检测mdr1mRNA的转录;流式细胞术测定P-糖蛋白(P-gp)表达水平;MTT法检测K562/ADM细胞对多柔比星(阿霉素,ADM)的敏感性。结果si-mdr1-1、si-mdr1-2转染24h和48h,si-mdr1-1的抑制率分别为55.5%和22.5%,而si-mdr1-2则分别为16.0%和57.6%。si-mdr1-1和si-mdr1-2作用72h时,P-gp的表达强度分别下降74%和85%。si-mdr1-1和si-mdr1-2均可提高K562/ADM细胞对多柔比星的敏感性、逆转其耐药性,逆转倍数分别为2.52倍和1.96倍。结论siRNA可特异性地沉默mdr1基因的表达,逆转P-gp介导的白血病细胞耐药性。
- 高丽萍魏虎来景涛吴勇杰陈静孙静易娟赵怀顺
- 关键词：SIRNAMDR1基因耐药性
- RNAi技术在肿瘤研究中的应用
- 2005年
- 外源性或内源性双链RNA(Double-stranded RNA,dsRNA)在细胞导致与其同源的mRNA分子发生特异性降解,从而干扰相应基因的表达,这种现象被称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).
- 陈静魏虎来
- 关键词：RNAI技术肿瘤研究调节基因表达RNA分子内源性外源性
