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中国博士后科学基金(20080440577)
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1
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周良辅
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马德选
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2009
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DHA介导GPR40转染PC12细胞内的钙离子动员
2009年
目的构建GPR40基因质粒转染PC12细胞,用DHA干预后测定细胞内Ca^2+浓度的变化,从而探讨DHA通过GPR40信号途径介导Ca^2+上调的作用机制。方法将PC12细胞分成4组,分别为未转染组,空载体转染组,GPR40基因-pCruz载体转染组及GPR40基因-pCruz载体转染+阻制剂Xestospongin C组;构建大鼠GPR40质粒并转染PC12细胞。采用RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白质水平观察GPR40的表达。DHA(10μmol/L)干预后,测定细胞内Ca^2+浓度。结果DHA干预后,未转染组和空转染组PC12细胞内Ca^2+浓度没有受到明显影响;GPR40基因-pCruz载体转染组细胞内的Ca^2+浓度明显增加,且这种作用不受细胞外Ca^2+浓度的影响:添加阻滞剂组Ca^2+浓度变化也不明显。结论DHA能动员GPR40基因转染的PC12细胞内Ca^2+浓度且这种作用完全能被IP3受体特异性阻止剂Xestospongin C所阻断,提示DHA可能通过GPR40信号途径动员细胞内Ca^2+浓度并因此改善神经功能。
马德选
山岛哲盛
毛颖
朱剑虹
周良辅
关键词:
DHA
G蛋白耦联受体
GPR40
PC12细胞
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