广东省自然科学基金(010294)
- 作品数：5 被引量：50H指数：4
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- 昆虫抗菌肽和抗真菌肽的结构与功能的关系及分子设计
- 对GenBank 和EMBL 数据库中登录的昆虫抗微生物肽（antimicrobial peptide,AMP）,即昆虫抗菌肽（antibacterial peptide）和抗真菌肽（antifungal peptide...
- 肖业臣温硕洋黄亚东杨婉莹曹阳
- 关键词：昆虫抗菌肽抗真菌肽分子设计
- 文献传递
- 果蝇的天然免疫
- 果蝇已成为研究昆虫和人类天然免疫的重要模式生物,它主要是通过体液免疫和细胞免疫来抵抗各种病原微生物的侵染。研究表明,果蝇的免疫基因表达主要受两种信号转导途径的调控,即Toll/dif 途径和Imd/relish 途径。本...
- 段云温硕洋邓小娟杨婉莹叶明强曹阳
- 关键词：果蝇先天免疫信号转导途径
- 文献传递
- 黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究被引量：2
- 2007年
- 【目的】Drosomycin(Drs)是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外,在黑腹果蝇基因组中,还存在另外6条Drs同系物的基因序列,对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构。为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异,研究其分子结构与功能的关系,需要对这些同系物基因进行克隆表达,获得有生物学活性的纯化样品。【方法】本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因,并克隆至pET-3C载体上,转化到宿主菌E.coli Origami(DE3)中进行诱导表达,表达产物经阳离子CM SepharoseTM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后,进行抑菌活性检测。【结果】经纯化的7个Drs同系物的短肽样品,除Drs-lI外,其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用。【结论】表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的。
- 杨婉莹温硕洋邓小娟叶明强夏庆友曹阳黄亚东
- 关键词：黑腹果蝇抗真菌肽同系物蛋白纯化
- 昆虫抗真菌肽Thanatin基因的合成及原核表达被引量：7
- 2002年
- 斑腹刺益蝽 (Podisusmaculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的 6种昆虫抗真菌肽之一 ,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性 ,由 2 1个氨基酸残基组成 ,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用。根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因的氨基酸序列 ,推导出cDNA序列 ,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略 ,获得大量完整的Thanatin基因片段 ,通过T A克隆法克隆至pGEM TEasy载体 ,进行测序 ,结果证实合成的Thanatin基因与预期设计的完全一致。然后将其亚克隆至表达载体pET 2 1d中。经IPTG诱导表达后 ,采用RNA DNA点杂交和RT PCR检测具Thanatin基因插段的RNA转录表达活性 ,初步结果显示该融合表达产物对烟曲霉菌 (Aspergillusfumigatus)和绿色木霉菌 (Trichodermariricle)
- 黄亚东王艳温硕洋曾锦绣曹阳李校坤钟仰进
- 关键词：昆虫抗真菌肽基因表达抑杀作用
- 昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达被引量：12
- 2003年
- 为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。
- 黄亚东曾锦绣温硕洋王艳李校坤钟仰进曹阳
- 关键词：昆虫抗真菌肽基因合成基因克隆融合基因病原真菌抑菌作用
- 昆虫抗菌肽和抗真菌肽结构与功能的关系及分子设计被引量：22
- 2004年
- 在对GenBank和EMBL数据库中登录的昆虫抗微生物肽 (antimicrobialpeptide,AMP) ,即昆虫抗菌肽 (antibacterialpeptide)和抗真菌肽 (antifungalpeptide ,AFP)进行归类整理的基础上 ,对天蚕素族 (cecropins)抗菌肽结构与功能的关系及人工改造的分子设计策略 ,特别是对目前新发现的一些昆虫抗真菌肽的已知结构与功能关系的研究进展、存在问题等进行了简要介绍和分析 ,为从事昆虫抗微生物肽的理论研究和发展新型抗生素药物提供了必要的信息。
- 肖业臣温硕洋黄亚东杨婉莹曹阳
- 关键词：昆虫抗菌肽抗真菌肽分子设计
- 果蝇的天然免疫被引量：12
- 2004年
- 果蝇已成为研究昆虫和人类天然免疫的重要模式生物,它主要是通过体液免疫和细胞免疫来抵抗各种病原微生物的侵染。研究表明,果蝇的免疫基因表达主要受两种信号转导途径的调控,即Toll/dif途径和Imd/relish途径。本文主要就果蝇的天然免疫特征和免疫中的信号转导途径进行了综述。
- 段云温硕洋邓小娟杨婉莹叶明强曹阳
- 关键词：果蝇先天免疫信号转导途径
