国家自然科学基金(81220108011) 作品数:31 被引量:138 H指数:7 相关作者: 宦怡 任静 文娣娣 潘奇 侯炜寰 更多>> 相关机构: 第四军医大学西京医院 空军军医大学 西安交通大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
EpCAM特异性适配体对胰腺癌细胞的靶向识别及促凋亡研究 2018年 目的:验证EpCAM分子特异性适配体对胰腺癌细胞的亲和性及对细胞凋亡的影响。方法:通过文献查询EpCAM分子特异性适配体,以流式细胞术验证适配体与胰腺癌PANC-1细胞的特异性亲和力;通过细胞免疫组化验证适配体与细胞结合的位点;通过流式细胞术检测适配体对细胞的凋亡影响。结果:选择文献报道的EpCAM分子特异性适配体EP166,在不破坏主要二级结构情况下做截断处理形成EP166s。通过流式细胞术验证发现EP166s与原适配体EP166均可以特异性识别胰腺癌PANC-1细胞,而与阴性对照的HEK293T细胞无特异性亲和力。细胞免疫荧光显示EP166s主要结合在细胞膜表面。凋亡检测结果发现EP166s在与PANC-1孵育12 h、24 h后均可促进细胞凋亡,且主要是细胞的早期凋亡,其所占百分比分别为12.2±0.20,27.13±0.36,而随机文库对照组的早期凋亡百分比分别为5.21±0.63,4.91±0.72;均值的配对T检验发现EP166s在孵育12 h和24 h后其早期凋亡所占百分数与随机文库组均有统计学差异,而且EP166s与细胞孵育12 h与24 h对凋亡的影响也有统计学差异,P≤0.01。结论:修饰后的适配体EP166s可以特异性识别胰腺癌PANC-1细胞,且结合位点位于细胞膜上;该适配体有促进PANC-1细胞凋亡的作用。 黄旭方 文娣娣 仲津漫 任静 宦怡关键词:适配体 EPCAM 胰腺癌 凋亡 功能磁共振成像在胰腺癌中的应用价值 被引量:2 2014年 胰腺癌是一种起源于胰腺外分泌组织的肿瘤,多为导管腺癌;早期隐匿、侵袭性强、易转移、生存率低为其主要特点,这些特点也为早期诊断和治疗带来了挑战。近年来随着功能MR成像技术的发展,为人们进一步认识、了解胰腺癌提供了基础,尤其是MR扩散加权成像、动态增强扫描及波谱等技术的应用明显提高了病灶检出的敏感性,有助于了解胰腺癌的微循环灌注及细胞代谢情况,并能对抗血管治疗的疗效进行监测。 李娜 任静 宦怡关键词:功能磁共振成像 胰腺癌 磁共振成像 磁共振扩散成像 磁共振波谱 增强CT和^(18)F-FDG PET/CT在胃癌术前分期评估中的临床价值比较 被引量:8 2016年 目的:对比评估增强计算机断层扫描(contrast enhancement computed tomography,CECT)和^(18)F-FDG正电子发射计算机断层扫描(positron emission tomography/computed tomography,PET/CT)在胃癌术前分期中的临床应用价值。方法:回顾性分析经病理证实的胃癌患者的术前CECT(27例)及^(18)F-FDG PET/CT(39例)图像,于两种影像学手段下,双盲法判定每位患者胃癌的TNM分期,然后分别计算每种影像学方法在胃癌术前分期中的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性。两种影像学方法的差异比较采用Pearson卡方检验。结果:CECT和^(18)F-FDG PET/CT诊断胃癌T分期的敏感性、阳性预测值和准确性分别是100.00%、72.73%、59.26%和100.00%、90.91%、76.92%;CECT和^(18)F-FDG PET/CT诊断胃癌N分期的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别是75.00%、71.43%、88.24%、50.00%、74.07%和42.86%、92.00%、75.00%、74.19%、35.90%。结论:CECT和^(18)F-FDG PET/CT均可用于胃癌术前分期的预估,尤其在N分期方面,CECT的敏感性和准确性高于^(18)F-FDG PET/CT。 赵娓娓 王胜军 文娣娣 汪静 印弘 宦怡 全志永关键词:胃癌 肿瘤分期 计算机断层扫描 正电子发射计算机断层扫描 DCE-MRI在胰腺神经内分泌肿瘤术前分级中的应用 被引量:7 2017年 目的:初步探讨动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)在胰腺神经内分泌瘤(pNETs)术前分级中的应用价值。方法:搜集2014年5月~2016年4月经手术病理证实的pNETs患者20例(25个病灶),其中G1期病灶14个,G2期10个,G3期1个,将G1期病灶归为G1pNETs组,G2期病灶归为G2pNETs组,由于G3期病灶仅1例暂未做入组分析。所有患者禁食禁水4h后行DCE-MRI扫描。数据被传输到Research-DCEMRI Tool诊断分析工作站,测定各定量灌注参数-转运常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、细胞外血管外间隙百分比(Ve)及血浆容量百分比(Vp)。采用独立样本t检验分析不同级别pNETs定量灌注参数的差异,P<0.05表示差异有统计学意义。绘制定量参数的受试者工作特征曲线(ROC曲线),计算其在pNETs分级中的诊断效能。结果:不同分级pNETs的Ktrans值和Kep值分别比较,差异均有统计学意义(P=0.014和P=0.025);不同分级pNETs的Ve值和Vp值分别比较,均无统计学差异(P=0.786和P=0.522)。Ktrans、Kep值的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.782和0.771,Ktrans取界值为0.714时其敏感度、特异度分别为70.00%、85.71%,Kep取界值为1.721时其敏感度、特异度分别为60.00%、92.86%。结论:DCE-MRI的Ktrans、Kep值可初步用于定量、无创评估pNETs分级,尤其Ktrans值在分级诊断中效能较高。 赵娓娓 任静 印弘 宦怡关键词:胰腺 神经内分泌瘤 肿瘤分级 IVIM-DWI在胰腺癌和神经内分泌肿瘤诊断和鉴别中的应用价值 被引量:11 2017年 目的:探讨IVIM-DWI诊断和鉴别胰腺癌和胰腺神经内分泌肿瘤的最佳量化参数。材料与方法:应用GE Discovery MR750 3.0T磁共振扫描仪对手术证实的22例胰腺癌和17例胰腺神经内分泌肿瘤患者行胰腺多b值DWI。应用IVIM双指数模型测量胰腺癌和胰腺神经内分泌肿瘤与非瘤区胰腺组织的表观扩散系数(ADC)、纯扩散系数(D)、假扩散系数(D~*)和灌注分数(f),并应用单因素方差分析进行统计学分析。结果:胰腺癌的ADC和f低于非癌区胰腺组织(0.803×10^(-3)mm^2/s vs0.974×10^(-3)mm^2/s:54.527%vs 64.486%),D高于非癌区胰腺组织(0.659×10^(-3)mm^2/s vs 0.535×10^(-3)mm^2/s),鉴别胰腺癌和非癌区胰腺组织时D诊断效能最高。胰腺神经内分泌肿瘤的ADC、D和f均高于非瘤区胰腺组织(0.933×10^(-3)mm^2/s vs 0.753×10^(-3)mm^2/s;0.549×10^(-3)mm^2/s vs 0.429×10^(-3)mm^2/s:67.275%vs 59.655%).鉴别胰腺神经内分泌肿瘤和非瘤区胰腺组织时ADC诊断效能最高。胰腺癌的ADC、D~*和f低于胰腺神经内分泌肿瘤(0.803×10^(-3)mm^2/s vs 0.933×10^(-3)mm^2/s;4.852×10^(-3)mm^2/s vs 11.301×10^(-3)mm^2/s;54.527%vs 67.275%),鉴别胰腺癌和神经内分泌肿瘤是D~*诊断效能最高。胰腺癌的D~*明显低于G2~3期胰腺神经内分泌肿瘤(4 852×10^(-3)mm^2/s vs 11.937×10^(-3)mm^2/s)。结论:IVIM-DWI相关参数(ADC、D~*、D、f)可以有效鉴别胰腺癌和胰腺神经内分泌肿瘤与非瘤区胰腺组织.IVIM-DWI是无创性诊断和鉴别胰腺癌和胰腺神经内分泌肿瘤的理想方法之一。 马婉玲 赵娓娓 宦怡 魏梦绮 任静 杨勇 张劲松 潘奇 张广文 董军强关键词:胰腺肿瘤 神经内分泌 弥散 动态增强磁共振成像定量评估健康志愿者胰腺灌注的可行性 被引量:5 2017年 目的探讨动态增强磁共振成像(DCE-MRI)量化评估胰腺灌注的可行性。方法将68名健康志愿者分为青年组、中年组和老年组。对所有志愿者均行DCE-MRI,将数据传至Research-DCEMRI Tool诊断分析工作站,计算胰腺灌注的定量参数:容积转运常数(Ktrans)、间质-血浆速率常数(Kep)、间质容积(Ve)和血浆容积(Vp)。采用两独立样本t检验和单因素方差分析评估不同性别、年龄组和胰腺部位的灌注参数。结果不同性别志愿者Ktrans、Kep、Ve和Vp差异均无统计学意义(P均>0.05);老年组Ve高于青年组和中年组(P=0.036、0.001);胰头区Vp高于胰体部和胰尾部(P=0.011、0.023)。结论 DCE-MRI可无创、较稳定、定量评估胰腺灌注情况。胰腺DCE-MRI定量灌注参数不随性别差异而不同,但随年龄和胰腺部位的不同而有差异。 赵娓娓 任静 印弘 宦怡关键词:胰腺 灌注成像 磁共振成像 对比剂 DCE-MRI定量参数预测胰腺癌组织生物学特征的初步研究 被引量:10 2021年 目的:探讨DCE-MRI药代动力学参数术前无创性评估胰腺癌组织生物学状况的可行性。方法:21例经病理证实的胰腺癌患者术前均行胰腺DCE-MRI扫描,测量病灶的药代动力学参数K_(trans)、K_(ep)、V_(e)和V_(p)。采用独立样本t检验比较不同临床及病理状况时各项定量参数的差异。采用ROC曲线评估各项定量参数对胰腺癌不同组织生物学状况的诊断效能。结果:胰头区肿瘤的V_(p)高于体尾部(P=0.014);最大径>3 cm和Ⅱ~Ⅲ期胰腺癌的K_(trans)、K_(ep)分别高于最大径≤3 cm(P=0.036、0.026)及Ⅰ期胰腺癌(P=0.005、0.037);低分化胰腺癌的K_(trans)、K_(ep)和V_(p)均高于中~高分化胰腺癌(P=0.007、0.003和0.036),而V_(e)低于中~高分化胰腺癌(P<0.001);伴血管侵犯胰腺癌的K_(trans)、K_(ep)和V_(p)均高于不伴血管侵犯者(P=0.007、0.015和0.003);伴淋巴转移胰腺癌的K_(trans)、K_(ep)和V_(e)均高于不伴淋巴转移者(P=0.012、0.028和0.049)。K_(trans)和K_(ep)鉴别Ⅱ~Ⅲ期与Ⅰ期胰腺癌的AUC分别为0.931和0.812;K_(trans)、K_(ep)、V_(e)和V_(p)鉴别低分化与中~高分化胰腺癌的AUC分别为0.829、0.843、0.926和0.750;K_(trans)、K_(ep)和V_(p)评估胰腺癌有无血管侵犯的AUC分别为0.817、0.832和0.875;K_(trans)、K_(ep)和V_(e)评估胰腺癌有无淋巴转移的AUC分别为0.796、0.801和0.755。结论:胰腺癌DCE-MRI药代动力学参数能在术前无创性评估胰腺癌的组织生物学状况,有助于精准诊断及治疗。 赵娓娓 宦怡 郑敏文 任静 韩志巍关键词:胰腺癌 动态对比增强 药代动力学参数 DCE-MRI药代动力学参数评估患癌胰腺不同区域功能状态的价值研究 2020年 目的:比较胰腺癌(pancreatic cancer,pCa)患者癌灶区、近端胰腺区、远端炎性区及正常胰腺的动态对比增强磁共振成像(dynamic contrast-enhanced MRI,DCE-MRI)药代动力学参数K^(trans)和k(ep),无创量化患癌胰腺不同区域微血管功能状态,评估pCa近端胰腺组织是否为相对正常的胰腺组织。方法:收集病理及临床证实的pCa患者29例腿机选取正常志愿者30例。所有受试者行胰腺DCE-MRI扫描并计算每个观测区的K^(trans)和k(ep)。根据患癌胰腺不同区域状态的差异将其分为pCa组、癌灶近端胰腺组、癌灶远端炎症组,30例正常志愿者胰腺为正常对照组。采用One-way ANOVA分别比较不同组别间K^(trans)s、k(ep)的差异。结果源腺癌、近端胰腺区、远端炎症区及正常胰腺的K^(trans)和k(ep)分别是0.114±0.023、0.066±0.009、0.323±0.026、0.061±0.005和0.341±0.077、0.105±0.017、0.772±0.068、0.107±0.005。pCa的K^(trans)和k(ep)高于近端胰腺区和正常胰腺,而低于远端炎症区,远端炎症区的K^(trans)和k(ep)高于pCa、近端胰腺区和正常胰腺,以上P均<0.001;而近端胰腺和正常胰腺的K^(trans)和k(ep)均无统计学差异(P=0.298、0.893)。结论患癌胰腺不同区域微血管功能状态有明显差异同时提示pCa近端≥1 cm的区域为相对正常的胰腺区,以上可为pCa精准治疗、手术切缘选择提供参考。 赵娓娓 宦怡 郑敏文 张劲松 田健 全志永关键词:胰腺癌 药代动力学参数 SELEX技术在胰腺癌分子诊断及靶向治疗中应用的研究进展 2015年 胰腺癌由于起病隐匿,早期诊断率较低,临床治疗效果差,是目前预后最差的恶性肿瘤之一。目前,临床上尚缺乏有效的非创伤早期筛查胰腺癌的手段,因而胰腺癌的早期诊断和治疗显得尤为重要。近年来,指数富集配基的系统进化(SELEX)技术以其在其他疾病中所表现的应用价值为疾病的诊治提供了一个新的途径。对于缺乏有效确诊手段,发病隐匿且病死率高的胰腺癌而言,SELEX技术基于胰腺癌发病的分子机制,可以筛选出特异结合于胰腺癌分子靶标的适配体,对筛选所得适配体进一步化学修饰,可以实现分子水平成像及靶向治疗,进而达到胰腺癌早期诊治的目的,具有重要的临床意义。本文就SELEX技术在胰腺癌分子诊断及靶向治疗中的应用研究进展进行了综述。 张振华 文娣娣 任静 杨勇 黄旭方 宦怡关键词:胰腺癌 分子诊断 靶向治疗 人tBID蛋白的表达纯化及其偶联的新型分子探针对前列腺癌细胞的促凋亡作用研究 2016年 目的:以PQE-30为原核表达载体,构建PQE30-tBID重组表达载体,表达和纯化目的蛋白tBID,并利用金磁纳米微粒将tBID蛋白与人HER2抗体偶联成分子探针Anti HER2-Gold Mag-tBID,以探究其对前列腺癌细胞的促凋亡作用。方法:根据tBID的基因序列设计特异性的上下游引物,利用普通PCR扩增目的基因tBID,构建重组表达载体PQE30-tBID,将其转化到BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot鉴定分析,验证目的蛋白tBID的表达,并对其进行纯化。利用金磁纳米微粒与蛋白质之间的静电相互作用以及疏水相互作用,将人HER2抗体与tBID蛋白偶联在其表面,构建分子探针Anti HER2-Gold Mag-tBID。流式细胞术检测该分子探针与前列腺癌PC-3细胞的特异性亲附结合能力,通过Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒分析分子探针对PC-3细胞的促凋亡作用。结果:普通PCR扩增后得到了411 bp的DNA片段,经双酶切鉴定以及菌液测序,表明重组表达载体PQE30-tBID构建成功。促凋亡蛋白tBID成功地在大肠杆菌中表达,蛋白相对分子量约15 KD,经过纯化,得到了纯度较高的tBID蛋白。经过与金磁纳米微粒的偶联,成功构建出一种新型的分子探针Anti HER2-Gold Mag-tBID。该分子探针可与PC-3细胞特异性结合,且经Annexin V-FITC染色分析可见PC-3细胞发生明显凋亡,凋亡率达62.9%,与未处理组(3.79%)和对照组(4.33%)相比,具有显著的统计学差异。结论:PQE30-tBID重组表达载体能在大肠杆菌中高效表达,且成功得到了纯度较高的人促凋亡蛋白tBID。经金磁纳米微粒偶联,该蛋白能够与人HER2抗体重组成新型的分子探针,且能特异性地靶向前列腺癌PC-3细胞并显著促进其凋亡。 仲津漫 王芳 黄旭方 宦怡 任静关键词:TBID 原核表达 人表皮生长因子受体2 前列腺癌