安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2010A177)
- 作品数：9 被引量：60H指数：3
- 相关作者：邓松华潘卫曹洁陈秋莉汪伟民更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第二军医大学蚌埠市第三人民医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 牛乳铁蛋白抗菌肽抗肺癌细胞增殖及其作用机制研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨牛乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)抗人肺癌细胞功能及其作用机制。方法体外培养人肺腺癌A549细胞株,实验分为:阴性对照组、LfcinB处理组和阳性对照组。采用MTT法检测LfcinB对人肺腺癌A549细胞增殖的影响,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率。结果与阴性对照组比较,不同浓度的LfcinB均对A549细胞增殖有抑制作用,其中以10-2g/L浓度LfcinB的抑制率最高(P<0.01)。与阴性对照组比较,不同浓度的LfcinB作用于A549细胞24、48、72 h后,G0/G1期细胞略有减少,S期细胞逐渐增多,G2/M期细胞略有减少,且在72 h结果最为显著(P<0.01)。Lf-cinB在10-6～10-2g/L浓度范围内作用48、72 h均可诱导A549细胞凋亡,随着药物浓度增高,诱导凋亡作用加重,有明显的剂量效应关系。结论 LfcinB能显著抑制人肺腺癌A549细胞增殖,使细胞阻滞于S期,并诱导细胞凋亡。
- 石皖荣邓松华秦宜德徐文竹
- 关键词：A549细胞细胞增殖
- 产前筛查中位数和体重修正结果的临床意义被引量：5
- 2011年
- 目的探索合肥妇幼保健院产前筛查实验室中位数修正和体重修正结果。方法在合肥市妇幼保健院参加产前筛查且孕周为14~20＋6周的孕妇。选择甲胎蛋白、游离人绒毛膜促性腺激素作为血清标志物,采用时间分辨技术,统计中位数和体重中位数并分析结果。结果 2T-Risk软件计算阳性率为2.76%,换用中位数后筛查阳性率为5.03%,体重修正后筛查阳性率为5.47%,经验证,修正后确诊标本均能检出。结论建议每个实验室建立中位数和体重方程,提高筛查效率。
- 许晓红邓松华
- 关键词：唐氏综合征遗传筛查体重
- 构建SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库
- 2010年
- 目的构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础。方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C、D、E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通过引物引入XbaⅠ酶切位点和保护碱基,3'端引入3个氨基酸大小的随机连接肽核苷酸序列,各结构域核苷酸片段经XbaⅠ酶消化,在T4连接酶作用下随机相互连接并克隆于噬菌体展示载体pCANT-AB5S,克隆产物转化E.coliDH5α,提取原代库质粒转化E.coliTG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为1.87×107cfu,滴度为1.3×1014TU/ml,文库的片段插入率近100%,其中插入多个结构域的阳性克隆占21.7%,序列分析显示各结构域之间的连接和随机连接肽序列具有随机性。结论成功地构建了SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库,该文库在库容量、多样性和随机性方面满足体外分子进化研究的要求。
- 黄德圣潘卫曹洁庞强唐萍廖文婷李存枚陈秋莉邓松华
- 基孔肯雅病毒包膜蛋白E2的全基因合成及原核表达被引量：3
- 2012年
- 目的通过对全长基孔肯雅病毒包膜蛋白E2(CHIKV-E2,1～404 aa)及其跨膜疏水区(351～378 aa)缺失突变体E2(1～350 aa)进行原核表达,分析跨膜疏水区对E2蛋白在大肠杆菌中表达的影响。方法利用ExPasy预测软件对E2蛋白跨膜疏水区进行预测分析,根据GenBank数据库中CHIKV-E2氨基酸序列获得其对应的基因序列。结合重叠延伸PCR(OE-PCR)原理设计用于全基因合成的核酸引物对CHIKV-E2全长基因(404 aa)进行体外合成,构建全长E2蛋白及其缺失突变体原核表达质粒,将序列正确的两种重组质粒分别转至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测重组质粒的表达情况。结果 OE-PCR法成功合成了大小为1 212 bp的编码CHIKV-E2(1～404 aa)蛋白的全长基因,构建了全长E2蛋白及其缺失突变体重组表达质粒pET21b-E2(1～404)和pET21b-E2(1～350),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE结果显示缺失突变体pET21b-E2(1～350)融合蛋白表达量较pET21b-E2(1～404)有明显提高。结论 E2蛋白跨膜疏水区(351～378 aa)对该蛋白的原核表达具有重要影响,缺失该疏水区的突变体在大肠杆菌中表达量比全长E2蛋白表达量明显提高。
- 章萍萍潘卫曹洁陈秋莉王锦红张华群葛宜兵祁培培刘超邓松华
- 关键词：缺失突变体原核表达
- 小鼠白介素17基因的克隆、表达及其活性鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的通过基因工程技术获得有活性的重组小鼠白介素17(rmIL-17)蛋白,为研究IL-17的生物学作用及其作用机制提供基础。方法用RT-PCR技术得到小鼠IL-17编码基因,将其克隆入原核表达载体pET32a,转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过亲和层析得到纯化的rmIL-17蛋白,免疫家兔,制备多抗,Westernblot和酶联免疫吸附实验鉴定该蛋白免疫原性;用该蛋白进行体外细胞刺激实验、体内中性粒细胞招募实验鉴定蛋白的生物学活性。结果成功构建了重组质粒pET32a-mIL17并在大肠杆菌中表达。过柱得到纯化的rmIL-17蛋白,Westernblot和酶联免疫吸附实验证实其具有良好的免疫原性;体外细胞刺激实验显示该蛋白可刺激小鼠3T3成纤维细胞产生白介素6(IL-6)且具有量效关系;体内细胞招募实验显示纯化的rmIL-17蛋白具有招募中性粒细胞的作用。结论小鼠IL-17基因在体外成功表达,且表达的重组蛋白具有明显的生物学活性。
- 王金萍王萍吴昊刘淼张玉侠陈伟沈际佳邓松华
- 关键词：白细胞介素17基因表达
- 静脉转位在撕脱性断指再植术中的应用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨静脉血管转位在撕脱性断指再植中的应用及临床疗效。方法对近端静脉血管缺如的11例断指采用健指背侧静脉血管转位完成血液回流。结果 11例再植手指全部成活,患指恢复了良好外观、功能、感觉。根据中华医学会手外科学会断指再植功能评定试用标准,优9例,良2例。结论应用健指背侧静脉血管转位完成患指血液回流是治疗手指离断伤特别是患指近端静脉撕脱缺如的理想方法。
- 马传亮彭俊才陈贻玲邓松华
- 关键词：再植术显微外科手术
- 荧光定量PCR法和巢式PCR法检测新生儿脐血人巨细胞病毒DNA的比较被引量：6
- 2011年
- 目的比较荧光定量PCR法和巢式PCR法在检测新生儿人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染中的灵敏度,为HC-MV先天性感染的快速特异性检测提供实验依据。方法随机收集36例脐血标本,分离单核细胞,提取总DNA,进行巢式PCR和荧光定量PCR检测。结果巢式PCR法检测HCMV糖蛋白(gB)DNA的阳性率为22.2%(7/36),荧光定量PCR法检测HCMV DNA的阳性率为30.6%(11/36),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。两种检测方法的一致率为88.9%。结论荧光定量PCR法检测脐血HCMVDNA的灵敏性高于巢式PCR法,更适用于临床新生儿HC-MV先天性感染的检测。
- 金艳王明丽赵俊甘霖刘辉邓松华
- 关键词：脐血
- 合肥地区唐氏综合征筛查中位数方程的研究被引量：3
- 2014年
- 目的以数据分析软件拟合合肥地区孕中期母血清标志物中位数方程,并评价新方程的效果。方法取合肥地区33 638例孕妇的产前筛查数据,以SPSS 17.0拟合新中位数方程,比较新中位数与2T-Risk软件内嵌中位数,计算风险结果,比较筛查效率。结果新中位数方程与内嵌中位数有差异,更换中位数后,筛查效率提高。结论用数据分析软件拟合本实验室中位数方程可以提高筛查效率,此中位数方程对合肥地区产前筛查有指导意义。
- 许晓红刘辉黄大雁李子贤邓松华
- 关键词：产前筛查甲胎蛋白中位数
- 还原型谷胱甘肽联合腺苷蛋氨酸治疗化疗药物性肝损害的临床疗效被引量：37
- 2014年
- 回顾性分析还原型谷胱甘肽(GSH)联合腺苷蛋氨酸治疗化疗药物引起肝损害的临床疗效。83例化疗患者随机分为联合组(n=43)和对照组(n=40),在预防性保肝药物应用基础上,对照组予GSH 180 mg静滴1次/d,联合组在对照组基础上加用腺苷蛋氨酸1.0 g静滴1次/d。两组疗程12 d。联合组较对照组疗效更佳,联合组总有效率95.35%,明显高于对照组80.00%(P<0.05)。联合腺苷蛋氨酸治疗化疗药物性肝损害临床疗效肯定,优于单用。
- 时兆燕汪伟民邓松华
- 关键词：还原型谷胱甘肽腺苷蛋氨酸化疗药物性肝损害恶性肿瘤
