北京市自然科学基金(5043026)
- 作品数：17 被引量：140H指数：8
- 相关作者：王进忠张民照孙淑玲王升启贾慧更多>>
- 相关机构：北京农学院军事医学科学院河北农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 北京地区8种斑螟Wolbachia的感染检测及其wsp基因序列分析被引量：1
- 2009年
- 采用PCR扩增法,对北京地区8种斑螟亚科昆虫:圆斑栉角斑螟、红云翅斑螟、曲小锯齿斑螟、叉斑螟、亮雕斑螟、富泽云斑螟、微红梢斑螟和牙梢斑螟进行了Wolbachia的wsp基因分子检测;结果发现,在富泽云斑螟、微红梢斑螟和牙梢斑螟体内存在Wolbachia感染,所得的wsp基因序列分别为590,600和613 bp。对序列进行系统发育分析,结果发现富泽云斑螟体内感染的Wolbachia属于B大组的Btab2组类群,而微红梢斑螟和牙梢斑螟体内感染的Wolbachia属于A大组。
- 张涛王进忠杜艳丽孙淑玲于潇翡孟琳琳张志勇
- 关键词：斑螟亚科WOLBACHIAWSP基因系统发育分析
- 引进种质西瓜中黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测被引量：19
- 2007年
- 从日本引进的西瓜种子隔离种植后,采用生物学、双抗体夹心酶联方法及反转录PCR(RT-PCR)技术对其幼苗样品进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的检测,结果表明:生物学试验接种的黄瓜健康植株全部发病;双抗体夹心酶联试验结果均为阳性;RT-PCR反应后进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,结果出现预期的715 bp特异性扩增产物。3种方法均表明此次从日本引进的西瓜种质已经受到黄瓜绿斑驳花叶病毒的侵染,须做销毁处理。试验结果表明,采用3种方法中的2种对样品进行检测,即可以根据检测结果确诊被检对象是否带有CGMMV病毒。
- 赵世恒李明福张永江王进忠李桂芬孙淑玲张涛
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒生物学检测
- 百合鳞茎腐烂病病原菌分离鉴定被引量：10
- 2005年
- 鳞茎腐烂病是百合贮藏期的重要病害,笔者从北京地区发生的百合典型鳞茎腐烂组织中分离到3种病原真菌,经过对病原菌形态特征和培养性状的观察以及致病性测定等方面的研究,结果表明Penicilliumcyclopium和Rhizopusstolonifer是引起百合贮藏期鳞茎发生腐烂的主要致病菌。
- 尚巧霞周丽丽刘素花赵祥云魏艳敏王进忠
- 关键词：腐烂病百合鳞茎致病性测定病原菌形态培养性状
- RT-PCR快速检测3种烟草病毒技术被引量：6
- 2007年
- 为了快速提取植物叶片的总RNA,并对烟草病毒进行检测,对提取及检测方法进行了研究。结果表明:以黄瓜叶片、白肋烟叶片为试材,用TRIzol试剂盒在1 h内提取到纯度高、完整性好的总RNA。设计烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的特异性引物,RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出313,326,392 bp的目的片断,而健康叶片中无此扩增带。构建这3种病毒重组质粒,对核苷酸序列与GeneBank中报道的进行比较,同源性分别为99.36%,97.55%,98.21%。用这种方法快速、可靠,为烟草病毒的检测提供科学依据。
- 谷瑞华王进忠文思远王升启张爱环魏艳敏
- 关键词：烟草花叶病毒黄瓜花叶病毒马铃薯X病毒RT-PCR
- 百合病毒的DNA芯片检测技术研究被引量：20
- 2005年
- 根据已知的黄瓜花叶病毒,百合无症病毒、百合斑驳病毒基因核苷酸序列,设计引物和探针,制备寡核苷酸芯片。用Cy3标记核苷酸引物,不对称RT-PCR扩增产物与芯片上的寡核苷酸探针杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。研究制备的基因芯片能够检测侵染百合的3种重要病毒核酸的特异性荧光信号,该项技术具有特异、灵敏、快速的优点。
- 王进忠贾慧文思远王升启张民照赵祥云董金皋
- 关键词：黄瓜花叶病毒百合无症病毒百合斑驳病毒基因芯片
- 基因芯片技术检测黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒被引量：19
- 2011年
- 黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒是世界性分布的重要植物病毒,对农业生产危害较大。农作物感病多为复合侵染,症状表现较为复杂,急需建立快速、准确、能够一次检测多种病毒的检测方法。本研究根据3种病毒的外壳蛋白基因序列,设计引物和探针,制备基因芯片;用Cy3标记下游引物,RT-PCR扩增产物与芯片杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。结果表明,该芯片可以从病毒侵染样本中检测到特异性识别信号,检测灵敏度比RT-PCR高10～100倍,该技术能对植物病毒做出快速、准确的检测。
- 贾慧王艳辉王进忠王升启董金皋
- 关键词：黄瓜花叶病毒烟草花叶病毒马铃薯Y病毒基因芯片
- 蛇床子素对小菜蛾幼虫的胃毒作用及对虫体内两种酶活性的影响被引量：4
- 2010年
- 采用生物测定和酶活力测定方法,研究了蛇床子素对敏感品系小菜蛾Plutella xylostellaL.的胃毒作用及其对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明:蛇床子素对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2 mg/mL的蛇床子素处理萝卜苗叶片后饲喂小菜蛾幼虫12 h校正死亡率为37%,72 h时后小菜蛾幼虫的校正死亡率为93%。处理24 h时,LC50为1 521.25 mg/mL,处理48 h时,LC50为865.93 mg/mL。处理72 h时,LC50为515.5 mg/mL。不同浓度蛇床子素和不同时间处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力均产生了消长变化。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理16 h时,小菜蛾体内的GSTs活力最高为209.15 U.mg-1prot.min-1。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理4 h时,小菜蛾体内的AchE酶活力最高,为0.648 1 U.mg-1prot.min-1。各处理在24 h时,小菜蛾体内的GSTs活力和AchE酶活力均有明显的降低。说明蛇床子素对小菜蛾幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力重要的影响。
- 孟琳琳王进忠张志勇孙淑玲张民照张鹏飞丁宝力蒲媛媛
- 关键词：蛇床子素小菜蛾毒力测定谷胱甘肽-S-转移酶乙酰胆碱酯酶
- 北京延庆山区不同生境板栗园节肢动物群落结构动态
- 采用系统调查方法，对北京延庆山区不同生境下板栗园的节肢动物群落进行了调查和分析，结果表明，在除草单作板栗园中的植食性类群物种数显著小于板栗树与大豆间作园与自然生草单作板栗园；而捕食性类群、寄生性类群和其他类群的相对丰盛度...
- 王丽王进忠张志勇王合陶万强孙淑玲张民照张涛张爱环
- 关键词：板栗虫害节肢动物种群动态生态调控技术
- 一种快速提取烟草病毒的方法
- 2006年
- 为寻找高效快速提取植物总RNA的检测方法,以白肋烟叶片为材料,用Trizol试剂盒提取总RNA。依据黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的外壳蛋白保守序列设计特异性引物,进行RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出326bp、392bp的目的片断,而对照叶片中无此扩增带。将PCR产物连接pGEM-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,得到了含有目的片断的重组子。序列分析表明,与Gene Bank中报道的这两种病毒核苷酸序列进行比较,同源性均达到96%以上。从而证明Trizol试剂盒可以在1 h内提取到纯度高、含量高、完整性好的总RNA,快速、简便、可靠。
- 谷瑞华王进忠文思远王升启张爱环孙淑玲赵世恒
- 关键词：黄瓜花叶病毒马铃薯X病毒RT-PCR
- 百合病毒检测技术研究进展被引量：13
- 2004年
- 笔者对百合病毒的检测技术作了综合评述,主要有植株直接观测法、指示植物接种鉴定法、电镜技术、血清学检测和分子生物学检测技术等,综合应用各项技术使检测更加灵敏、可靠。目前,常用的检测以血清学技术的ELISA为主、分子生物学技术的RT PCR为主。基因芯片检测技术是近几年发展起来高效的检测手段并在植物病毒检测上有广泛的应用前景。
- 贾慧王进忠陈忠斌王升启董金皋赵祥云张民照
- 关键词：百合病毒血清学检测分子生物学检测基因芯片
