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排序方式：

靶向Smad4基因shRNA质粒表达载体的构建及筛选: 2010年; 目的:构建编码Smad4 mRNA的shRNA真核表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法:根据GenBank提供的人Smad4基因的mRNA序列构建2个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,并通过基因测序进行鉴定。经鉴定后转染体外培养人成纤维细胞,western-blot检测Smad4蛋白水平抑制表达效果。结果:构建质粒表达载体测序结果显示,插入片段测序结果与合成的shRNA序列一致;靶向Smad4基因shRNA质粒表达载体对所转染的人成纤维细胞中Smad4蛋白水平表达均有抑制作用,其中shRNA1最为明显。结论:成功构建了靶向Smad4基因shRNA质粒表达载体,其中抑制Smad4基因表达效果最为明显的是shRNA1,为进一步研究Smad4基因的RNA干扰奠定了基础。; 张彩平龙石银田英何云武崔慧辉王思远; 关键词：RNA干扰 SMAD4基因基因克隆

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湖南省教育厅科研基金(09C832)