安徽省教委科研基金(98JL062)
- 作品数：5 被引量：19H指数：4
- 相关作者：汪学龙蒋作君沈继龙沈际佳唐小牛更多>>
- 相关机构：安徽医科大学皖南医学院更多>>
- 发文基金：安徽省教委科研基金安徽省自然科学基金安徽省卫生厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 日本血吸虫信号转导分子14-3-3蛋白epsilon亚型基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2002年
- 目的 克隆日本血吸虫 14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型的编码基因 ,以研究其在血吸虫信号传导及其在免疫预防的作用。方法 以日本血吸虫成虫总 RNA为模板逆转录合成 c DNA链 ,设计合成引物 ,用 PCR法扩增14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型基因编码序列 ,将其克隆入 p GEM- T载体 ,并用双酶切和以质粒为模板的 PCR进行鉴定。结果 RT- PCR扩增出一条约 75 3bp大小的特异性条带 ,重组质粒的双酶切和以质粒为模板的 PCR均获得了一条与 RT- PCR扩增出大小相同条带 ,序列测定结果表明其具有 75 3bp的开放阅读框 ,并具蛋白激酶、酪氨酸激酶磷酸化位点。结论 成功构建了日本血吸虫 14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型重组 p GEM- T克隆载体 ,为进一步的研究提供了条件。
- 汪学龙沈继龙蒋作君
- 关键词：信号转导分子日本血吸虫基因克隆
- 日本血吸虫31/32KDa蛋白质基因扩增及克隆被引量：4
- 2000年
- 目的 克隆日本血吸虫 31/ 32 KDa蛋白质的编码基因 ,用于血吸虫病免疫诊断和预防。方法 以日本血吸虫成虫 RNA为模板逆转录合成 c DNA链 ,参照 S.m 31/ 32编码序列设计合成引物 ,用 PCR法扩增 31/ 32 KDa蛋白质基因编码序列 ,将其克隆入 p GEM- T载体 ,并用双酶切和以质粒为模板的 PCR进行鉴定。结果 RT- PCR扩增出一条约 12 70 bp大小的特异性条带 ,重组质粒的双酶切和以质粒为模板的 PCR均获得了一条与 RT- PCR扩增出的条带大小相同。结论 日本血吸虫 31/ 32 KDa蛋白质重组 p GEM- T克隆载体的成功构建 ,为进一步研究提供条件。
- 王维汪学龙沈际佳蒋作君汤中圣
- 关键词：日本血吸虫基因克隆
- 日本血吸虫卵壳蛋白编码基因的扩增和克隆被引量：5
- 2002年
- 目的 克隆日本血吸虫卵壳蛋白基因 ,以研究其在诊断和作为候选疫苗分子的作用。方法 设计合成引物 ,以日本血吸虫雌性成虫cDNA第一链为模板 ,用PCR法扩增日本血吸虫卵壳蛋白 (SchistosomajaponicumeggshellproteinSjEP)基因编码序列 ,并克隆入pGEM T质粒载体。结果 PCR法扩增出大小为 62 4bp的单一条带 ,将其克隆入载体获重组质粒 pGEM T SjEP ,经双酶切和以质粒为模板进行PCR扩增 ,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。结论 日本血吸虫卵壳蛋白的编码基因重组质粒的成功构建 ,为进一步研究提供了条件。
- 唐小牛汪学龙沈继龙陈文魁
- 关键词：日本血吸虫基因扩增分子克隆编码基因
- 日本血吸虫32kDa蛋白质基因在真核表达载体中的亚克隆被引量：4
- 2001年
- 设计和合成特定寡核苷酸引物 ,TRIZOL提取日本血吸虫成虫RNA ,RT—PCR法扩增日本血吸虫 32kDa蛋白质 (Sj32 )基因编码序列 ,将扩增产物连接pGEM—T克隆载体 ,再亚克隆到真核表达载体 pBKCMV中。结果 :RT—PCR法特异性扩增出Sj32编码基因片段 ,其大小约为1 2 70bp ,经双酶切、PCR鉴定表明所构建的质粒pGEM—Sj32和pBK—Sj32中含有目的基因。pBK—Sj32重组质粒的成功构建 ,为进一步表达Sj32及其在血吸虫病免疫诊断、免疫预防中的作用研究提供了条件。
- 汪学龙蒋作君沈际佳姚涌
- 关键词：日本血吸虫基因克隆真核表达载体
- 日本血吸虫(大陆株)14-3-3epsilon同型信号转导蛋白诱导小鼠保护性免疫的研究被引量：2
- 2002年
- 目的 探索日本血吸虫新的疫苗候选分子对小鼠的保护性免疫效果。方法 利用已构建的真核表达质粒 p BK-Sj14 -3 -3在大肠杆菌 BL2 1内表达的日本血吸虫 (大陆株 ) 14 -3 -3 epsilon同型融合蛋白质 ,免疫 6周龄 BAL B/c雌性小鼠 ,免疫 3次 ,每次间隔 2周 ,第 3次免疫后 2周感染尾蚴。42 d后剖杀小鼠 ,计算其减虫率和肝减卵率。结果 各免疫组与对照组相比 ,均获得了部分抗血吸虫保护性免疫力 ,第 1、2、3各免疫组的减虫率分别为 3 2 .7% (P<0 .0 5 )、3 0 .7% (P<0 .0 5 )、2 7.5 %(P<0 .0 5 ) ;其肝减卵率分别是 48.5 % (P<0 .0 5 )、43 .1% (P<0 .0 5 )、2 8.2 % (P<0 .0 5 )。结论 首次证明日本血吸虫 14 -3 -3 epsilon同型重组融合蛋白可诱导小鼠抗血吸虫感染的部分保护性免疫力。
- 唐小牛汪学龙沈继龙
- 关键词：日本血吸虫小鼠SJ14-3-3保护性免疫
