温州市科技计划项目(Y20100284)
- 作品数：8 被引量：20H指数：2
- 相关作者：王明山金艳慧杨丽红谢海啸郑芳秀更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院温州医科大学更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Gln100Leu和His348Gln双重杂合突变导致的凝血因子Ⅶ缺陷症被引量：2
- 2012年
- 目的:对1例凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷症患者进行FⅦ基因分析,探讨其发病的分子机制。方法:检测血浆中凝血酶原时间(PT)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦ:C)及其他凝血指标以明确诊断;用DNA直接测序法对患者FⅦ基因的全部外显子及其侧翼和3’,5’非翻译区进行分析,寻找基因突变,反向测序证实所发现的突变;选择100例健康体检者作对照。结果:患者的PT和FⅦ:C明显异常,分别为33.7s和2%;患者FⅦ基因5号外显子存在g.8355A>T杂合突变,导致p.Gln100Leu;8号外显子存在g.11482T>G杂合突变,导致p.His 348Gln。结论:患者FⅦ基因中发现了g.8355A>T(p.Gln 100Leu)和g.11482T>G(p.His 348Gln)两种杂合突变,其中p.Gln 100Leu是一种鲜有报道的新突变类型。
- 王明山郑芳秀金艳慧朱丽青杨丽红
- 关键词：基因突变聚合酶链反应
- 一个纯合突变Tyr510Asp导致的遗传性凝血酶原缺陷症家系表型与基因分析
- 2012年
- 凝血酶原（凝血因子Ⅱ，FⅡ）是肝脏合成的维生素K依赖性丝氨酸蛋白酶，在凝血过程的第二阶段转变为凝血酶。遗传性凝血酶原缺陷症是由位于人类染色体11p11-q12的FⅡ基因突变引起的一种罕见常染色体隐性遗传性疾病，发病率约为1／200万，临床表现为程度不同的出血症状，其出血倾向的严重性与血浆FⅡ活性（FⅡ：C）水平相关。
- 金艳慧王明山郑芳秀谢耀盛谢海啸杨丽红朱丽青
- 关键词：基因分析常染色体隐性遗传性疾病维生素K依赖性表型家系纯合
- 遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者表型与基因型分析
- 2011年
- 目的:对1例遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷症患者进行表型与基因型分析,探讨其致病机制。方法:检测患者血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT),并对其FⅦ促凝活性(FⅦ:C)、FⅦ抗原(FⅦ:Ag)等进行表型诊断;采用DNA直接测序法对患者FⅦ基因的全部外显子及侧翼、启动子区进行分析,寻找基因突变,反向测序证实所发现的突变。结果:患者的PT、FⅦ:C和FⅦ:Ag明显异常,分别为26.5s、6.0%和2.1%。患者FⅦ基因外显子1a存在27delCT杂合突变,引起读码框移位,导致终止密码子提前出现,产生截短蛋白。结论:27delCT突变是影响该患者表型的主要因素。
- 徐鹏飞金艳慧郑芳秀王明山
- 关键词：临床表型基因分析突变
- 近亲婚配家系中凝血因子Ⅶ与Ⅹ联合缺陷症的表型分析和突变鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的对1个近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅶ（coagulation factorⅦ，FⅦ）与因子X（factorX，FX）联合缺陷症家系进行基因突变检测，探讨其分子发病机制。方法检测先证者及其家系共6名成员的凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplas tintime，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）、血浆FⅦ活性（FⅦ activity，FⅦ：C）、FX活性（FX activity，FX：C）及FⅦ抗原（FⅦantigen，FⅦ：Ag）、FX抗原（FXantigen，FX：Ag）；用DNA直接测序法分析先证者F7、F10基因的全部外显子、侧翼、5′和3′非翻译区及家系成员相应的突变位点区域，用反向测序证实所发生的突变。结果先证者PT（76．4s）和APTT（60．2s）明显延长，FⅦ：C（4％）、FⅦ：Ag（6％）和FX：C（6％）、FX：Ag（33％）明显降低；先证者外祖母、父亲、母亲和女儿的PT（分别为16．4s、15．8s、16．9s、16．5s）和APTT（分别为44．0s、42．1s、41．1s、43．5s）稍延长，FⅦ：C（分别为34％、39％、31％、40％）、FX：C（分别为50％、58％、47％、42％）和FX：Ag（分别为51％、54％、58％、47％）稍降低，其FⅦ：Ag及弟弟的凝血表型指标均在正常参考范围。测序结果显示先证者F7基因第8外显子发生了g．11267C〉T纯合突变，导致Arg277Cys，F10基因第8外显子存在g．28139G〉T纯合突变，导致Val384Phe；先证者外祖母、父亲、母亲和女儿均存在F7基因第8外显子g．11267C〉T和F10基因第8外显子g．28139G〉T杂合突变；先证者弟弟F7与F10基因为正常野生型。结论该遗传性凝血因子Ⅶ与X联合缺陷症家系先证者的F7和F／0基因分别存在g．11267C〉T（Arg277Cys）、g．28139G〉T（Val384Phe）纯合突变，且遗传自近亲结婚的父母。F7基因g．11267C〉T（Arg277Cys）和F10基因g．28139G？〉T（Val384Phe）与该遗传性凝血因子Ⅶ与X联合缺陷
- 金艳慧王明山王莹宇杨小丽杨丽红谢耀盛谢海啸朱丽青余方友
- 关键词：近亲结婚
- FIO基因Va1298Met纯合突变导致的重型遗传性凝血因子X缺陷症家系分析被引量：1
- 2016年
- 目的对1个姑表近亲婚配的遗传性凝血因子X（coagulation factor X，FX）缺陷症家系进行基因突变检测，探讨F10基因突变与表型的关系。方法应用ELISA法检测先证者及家系成员的FX抗原（FX antigen，FX：Ag），一期凝固法检测其凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）、血浆FX活性（FX activity，FX：C）等指标以明确诊断；用DNA测序法分析先证者F10基因的全部外显子及侧翼序列、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域；用CLC Genomics Workbench 7．5软件分析基因突变位点的物种保守性和蛋白质二级结构改变。结果先证者PT、APTT、FX：C和FX：Ag均明显异常，分别为67．2s、102．9s、1％、8％；先证者父亲、母亲和弟弟PT稍延长，分别为14．5s、14．4s和14．4s，其FX：C（54％、48％和56％）和FX：Ag（52％、54％和54％）均较正常对照水平降低；其他家系成员的凝血表型指标均在正常范围。先证者F／0基因第8外显子的g．27881G〉A纯合突变导致p．Va1298Met，其父亲、母亲和弟弟均为g．27881G〉A杂合子，先证者的g．27881G〉A纯合突变分别遗传自近亲婚配的父母，先证者妹妹F10基因为正常野生型。蛋白质生物学特性分析发现，p．Va1298Met导致FX蛋白二级结构发生改变。结论该遗传性FX缺陷症家系先证者的F10基因存在g．27881G〉A（p．Va1298Met）纯合错义突变，且与该家系FX水平降低有关。
- 金艳慧郝秀萍程晓丽杨丽红陈怡谢海啸王莹宇王明山
- 关键词：近亲结婚基因突变
- 纯合突变Tyr510Asp导致的遗传性凝血酶原缺陷症
- 2012年
- 目的对1个姑表近亲结婚的遗传性凝血酶原缺陷症家系进行凝血因子Ⅱ(FⅡ)基因突变检测,探讨其分子发病机制。方法检测PT、APTT及FⅡ促凝活性(FⅡ:C)、FⅡ抗原(FⅡ:Ag)等进行表型诊断;用DNA直接测序法分析先证者FⅡ基因的14个外显子及侧翼、5’和3’非翻译区序列,发现突变位点用反向测序以证实:针对先证者的突变位点,对其家系成员进行相应基因突变检测,同时在健康人群中筛查以排除多态性。结果先证者PT、APTT、FⅡ:C明显异常,分别为34.3 s、112.9 8、3%;父亲、母亲、舅舅的PT、APTT稍延长,FⅡ:C分别为52%、.55%、54%;姨妈及家系成员的其他凝血指标和FⅡ:Ag均在正常范围内。先证者FⅡ基因13号外显子的g.26329T>G纯合突变导致Tyr510Asp,其父亲、母亲、舅舅均存在g.26329T>G杂合突变,姨妈为正常野生型。结论 FⅡ基因Tyr510Asp错义突变是导致先证者遗传性凝血酶原缺陷症的分子机制;Tyr510Asp突变是国际上鲜见报道的新突变。
- 金艳慧王明山郑芳秀谢耀盛谢海啸杨丽红朱丽青
- 关键词：基因突变血液凝固障碍
- 一种导致遗传性低纤维蛋白原血症的FGG基因新突变被引量：1
- 2015年
- 目的 对一个遗传性低纤维蛋白原血症家系进行突变分析,探讨其分子发病机制.方法 用STA-R全自动血凝分析仪检测先证者及其家系成员（共3代8人）的凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）、凝血酶时间（thrombin time,TT）、纤溶酶原活性（plasminogen activity,PLG：A）、D-二聚体（D-Dimer,D-D）和纤维蛋白降解产物（fibrin degradation products,FDP）;用Clauss法与免疫比浊法分别测定血浆纤维蛋白原的活性（fibrinogen activity,Fg∶C）和抗原（fibrinogen antigen,Fg∶Ag）水平;用PCR法扩增纤维蛋白原的FGA、FGB和FGG基因的所有外显子和侧翼序列.对PCR产物纯化后测序,发现突变后进行反向测序进行验证.采用Swiss 软件对突变进行模型分析.结果 先证者PT正常,APTT、TT轻度延长,Fg∶C和Fg∶Ag明显降低.先证者的父亲、姐姐、儿子、外甥女的Fg∶C均有不同程度降低.其母亲各项指标均在正常参考范围.基因分析发现先证者FGG基因第7外显子5864位A＞C杂合突变,导致纤维蛋白原D结构域的232位赖氨酸突变为苏氨酸（Lys232Thr）;其父亲、姐姐、儿子、外甥女均为Lys232Thr杂合子,母亲为野生型.蛋白质模型分析显示Lys232Thr突变并未破坏氨基酸之间天然的氢键联系,但改变了相互静电作用力,并使该位点氨基酸侧链变短,从而增加了蛋白质的不稳定性.结论 该遗传性低纤维蛋白原血症患者FGG基因Lys232Thr错义突变与其血浆纤维蛋白原活性和抗原水平降低有关.
- 王莹宇丁红香郝秀萍朱丽青杨丽红金艳慧王明山
- 关键词：聚合酶链反应基因突变模型分析
- 九例遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者的分子发病机制与临床特性被引量：14
- 2012年
- 目的探讨9个遗传性凝血因子Ⅶ（coagulation factorⅦ，FⅦ）缺陷症家系的基因突变类型与临床特征。方法检测凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间及FⅦ活性和抗原等指标以明确诊断；用PCR法扩增先证者F7基因的全部外显子及侧翼序列、5’和3’非翻译区。PCR产物纯化后直接测序，寻找基因突变，用反向测序证实所发生的突变。结果9个家系中的先证者凝血酶原时间均延长，FⅦ活性在2．0％～6．0％之间，7例先证者的FⅦ抗原显著减低。共发现8种F7基因突变，其中g．8355A〉T（Gln100Leu）、g．11243T〉C（Ser269Pro）和g.1520_11521insT3种突变为首次发现；6种突变发生在催化区；缺失突变和插入突变各1种，其余均为错义突变；所有的基因突变均来自先证者的父亲和（或）母亲，发现5个家系存在近亲婚配。g．27—28delCT、Cys329Gly、Arg304Trp和His348Gln突变在无亲缘关系的家系中重复出现。不同基因突变类型的临床表型有较大差异：2例His348Gln及1例Arg304Trp纯合突变可表现为轻型和无症状，2例g．27—28delCT纯合、杂合突变分别表现为中型、无症状，4例双杂合突变分别表现为1例（Ser269Pro和Cys329Gly）无症状、2例（Arg304Trp和Cys329Gly与Arg277Cys和g．1152011521insT）轻型、1例（Glnl00Leu和His348Gln）中型。结论中国汉族人群中存在导致F7基因缺陷的突变热点。遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者的临床表型与FⅦ活性、F7基因突变类型无明显的相关性。
- 金艳慧王明山郑芳秀谢耀盛谢海啸徐鹏飞
- 关键词：突变热点临床表型
