国家自然科学基金(30370618)
- 作品数：22 被引量：93H指数：7
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- α-平滑肌肌动蛋白在高氧肺损伤中的表达变化及意义被引量：7
- 2012年
- 目的探讨高氧暴露下大鼠肺损伤中肌成纤维细胞表面标志α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化及意义。方法将64只3周龄SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组（置于空气中，吸入氧浓度0．21）和高氧暴露组（置于玻璃氧舱中，95％氧），每组于高氧暴露1、7、14、21d随机处死8只大鼠。苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变，免疫组化法观察α-SMA在肺组织中的表达与分布，蛋白质免疫印迹法（Westernblotting）检测肺组织α-SMA表达。结果HE染色发现，早期高氧肺损伤时肺组织以炎症水肿表现为主，后期则以间质纤维增生为主。免疫组化结果显示，正常对照组α-SMA在细支气管上皮、肺泡表面及肺泡间隔上表达极为微弱；高氧暴露后随时间的延长α-SMA在肺泡表面及肺泡间隔上表达逐渐增强，以21d时最为明显。Western blotting检测发现，与正常对照组相比，高氧暴露1d、7d时肺组织α-SMA表达无明显差异（1．02±0．12比1．00±0．13，1．05±0．14比0．99±0．12，均P〉0．05），高氧暴露14d、21d时α-SMA表达明显增强（1．27±0．21比1．05±0．15，2．26±0．28比1．05±0．14，P〈0．05和P〈0．01）。结论大鼠高氧暴露后随时间延长，α-SMA在肺组织中的表达逐渐升高，肺纤维化逐渐加重，说明肌成纤维细胞在肺组织纤维化重构过程中起重要作用。
- 符跃强刘成军李静胡兰卢仲毅许峰
- 关键词：高氧肺组织Α-平滑肌肌动蛋白肌成纤维细胞
- 氧化应激与肺细胞损伤凋亡信号途径被引量：7
- 2005年
- 氧化应激产生的活性氧 (ROS)与细胞凋亡关系密切 ,氧化应激导致肺泡上皮细胞的损伤和 (或 )凋亡 ,其作用方式可以是直接的 (通过打破细胞内氧化还原状态平衡 ) ,也可以是间接的 (通过激活氧化还原敏感的细胞信号转导通路 )。本文就肺细胞凋亡与氧化应激的关系作一概述 ,旨在为氧化应激相关疾病的抗氧化剂治疗和凋亡信号途径干预治疗提供理论依据。
- 蒋静许峰
- 关键词：氧化应激凋亡肺细胞
- 丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与高氧肺损伤的研究进展被引量：1
- 2006年
- 目的丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是信号由细胞表面传递到细胞内部的重要传递者,近来研究发现在高氧肺损伤中MAPKs既有介导细胞死亡的作用,又有抗感染、抑制凋亡、保护细胞、促进细胞增殖及肺损伤修复作用。本文就这方面的研究进展作一概述。
- 胡兰许峰
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶活性氧肺损伤
- 高氧肺损伤中肺细胞凋亡及JNK信号通路调控机制被引量：7
- 2008年
- 目的:观察高氧暴露下肺组织细胞凋亡和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达的变化,并探讨JNK信号转导通路对高氧诱导的肺细胞凋亡的调控机制.方法:48只3 wk龄Wistar大鼠随机分为空气对照组、高氧暴露3,7,14d组、空气+JNK抑制剂干预组、高氧暴露7 d+JNK抑制剂干预组.光镜下观察肺组织病理学改变,末端标记法(TUNEL)分析肺组织细胞凋亡的变化,免疫组化检测肺组织p-JNK的表达分布,Western Blot检测肺组织p-JNK蛋白质的表达含量.结果:与空气对照组比较,高氧暴露各时间点组肺组织出现典型急、慢性肺损伤的病理学改变,肺组织细胞凋亡指数和p-JNK蛋白表达含量均显著增加(P<0.05),肺组织p-JNK阳性细胞明显增多.JNK抑制剂SP600125在空气和高氧暴露下均能明显阻断JNK的激活(P<0.05),SP600125干预后高氧暴露肺组织细胞凋亡指数显著减少(P<0.05).结论:细胞凋亡是高氧肺损伤的一个重要病理组织学特点.JNK信号转导通路在高氧肺损伤中被激活,可能发挥促细胞凋亡效应.
- 胡兰许峰李静方芳匡凤梧王兴勇卢仲毅
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶细胞凋亡
- p53在氧化应激下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨氧化应激状态下肺泡II型上皮细胞(ATIIcells)凋亡时,activecaspase-3的表达和p53在细胞内分布情况.方法:原代培养大鼠ATII细胞,用500μmol/L过氧化氢(H2O2)处理,建立氧化损伤性细胞模型.经DAPI染色后观察细胞核的形态变化.流式细胞术检测H2O2刺激后细胞凋亡率的变化;蛋白质免疫印迹法检测H2O2刺激后activecaspase-3的表达变化.免疫荧光染色后观察p53的表达和细胞内分布.结果:DAPI染色发现,正常对照组细胞核较大,发出浅蓝色的荧光,而H2O2刺激后,细胞核发生致密浓染,核周出现光晕等改变.与正常对照组比较,随H2O2刺激时间延长,细胞凋亡率显著上升(P<0.05);Western Blot检测发现H2O2刺激后,activecaspase-3蛋白表达增加(P<0.05).激光共聚焦显微镜观察发现正常细胞p53表达微弱,H2O2刺激3h后,p53表达显著增强,主要集中于细胞核.结论:氧化应激能促使activecaspase-3蛋白表达增加及p53细胞核内表达增加,诱导细胞发生凋亡;p53可能通过转录依赖的途径诱导细胞凋亡.
- 符跃强卢仲毅方芳许峰
- 关键词：凋亡氧化应激P53
- 氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞修复存活、凋亡及调控因子Bcl-2／p53的变化被引量：2
- 2008年
- 多种慢性肺疾病包括支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）、肺纤维化等的病因之一是长时间吸人高浓度氧而导致肺氧化应激性损伤，其防治的根本难题是内源性肺泡上皮不能自行恢复，而由成纤维细胞替代形成肺纤维化。抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白p53可参与细胞凋亡调控过程，但在氧化应激性肺损伤中仍少有报道。本文以体外培养的大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ）为研究对象，以不同浓度过氧化氢（H2O2）处理，模拟活性氧（reactive oxygen species，ROS）攻击损伤ATⅡ细胞的体内情况，探讨氧化应激状态下ATⅡ细胞修复存活、凋亡及Bcl-2／p53的变化。
- 蒋静许峰陈娟方芳
- 关键词：蛋白BCL-2细胞凋亡调控蛋白P53细胞修复应激状态
- 肺泡II型上皮细胞细胞外信号调节激酶激活与急性肺损伤
- 2005年
- 肺泡上皮屏障的受损程度与肺损伤轻重和急性肺损伤的预后密切相关,而肺泡II型上皮细胞对维持肺泡上皮的自身稳定有十分重要的作用。细胞外信号调节激酶是参与细胞增殖、分化、死亡等多种生物学行为的重要信号传导调节激酶。急性肺损伤中肺泡II型上皮细胞细胞外信号调节激酶的激活与细胞周期停滞、细胞因子分泌和作用、肺泡上皮的抗损伤修复有一定关系。
- 陈娟许峰卢仲毅
- 关键词：肺泡上皮细胞有丝分裂素激活蛋白激酶类
- 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的培养、鉴定及体外特性初步研究被引量：6
- 2010年
- 目的建立成年大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ细胞)分离、纯化、原代培养和鉴定的技术方法 ,并观察其体外生长特性及SP-A表达情况。方法将0.08%胰蛋白酶消化液从气管注入肺组织,消化分离ATⅡ细胞。将大鼠IgG包被的培养皿免疫吸附纯化后,进行原代培养。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况,透射电镜(TEM)鉴定细胞,改良巴式染色法鉴定并计算细胞纯度,MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测细胞表达SP-A动态变化。结果细胞产量约为2.2×107个/只大鼠。电镜下观察到ATⅡ细胞特征性结构——板层小体;纯度大于90%。体外培养36～72h时细胞生长良好,细胞质内有较多颗粒;96h后细胞呈长索形,细胞内颗粒减少,并出现空泡。ATⅡ细胞表达SP-A在36h左右达高峰,之后表达减弱。结论利用0.08%胰蛋白酶消化分离和大鼠IgG免疫吸附纯化可获得满意的原代ATⅡ细胞。培养36～72h时细胞增殖旺盛,生长良好,SP-A表达丰富,是进行体外实验的良好时期。
- 符跃强蒋静陈娟陈聪方芳卢仲毅许峰
- 关键词：细胞培养板层小体
- 活性氧与肺上皮细胞损伤机制及防治措施
- 2005年
- 肺上皮细胞执行多种重要功能,是肺组织中的重要细胞。高氧作用于肺上皮细胞后能产生大量活性氧,活性氧能激活特定信号传导通路,使细胞发生死亡。高氧刺激细胞后可引起细胞发生胀亡,而用活性氧直接刺激则发生凋亡。虽然凋亡和胀亡共用部分上游信号传导通路,但下游通路不同,胀亡的肺上皮细胞没有半胱氨酸蛋白酶-3的激活。根据被活性氧激活的肺上皮细胞死亡的信号传导通路可采取针对性防治策略,为治疗肺的氧化损伤找到切实可行的方案。
- 符跃强许峰
- 关键词：呼吸窘迫综合征上皮细胞活性氧细胞死亡
- p38丝裂素活化蛋白激酶在幼鼠高氧肺损伤模型中的表达及作用被引量：3
- 2009年
- 目的近年来的研究证实p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)在多种因素诱导的肺损伤中发挥着重要的调控作用,但其在高氧肺损伤中的表达和作用尚不明了。该文通过建立幼鼠高氧肺损伤模型来研究p38MAPK在该模型中的表达及作用。方法90%氧气暴露建立幼年Wistar大鼠高氧肺损伤模型,用免疫组化和蛋白质免疫印迹法观察p38MAPK在肺组织中的分布和表达,用TUNEL法观察肺组织的细胞凋亡指数,并同时观察p38MAPK抑制剂SB203580对肺组织细胞凋亡的影响。结果高氧暴露后肺组织磷酸化p38MAPK蛋白表达明显增强,主要分布于肺泡上皮细胞、气道上皮细胞、血管内皮细胞、浸润炎症细胞。同时肺凋亡指数明显增加。使用SB203580抑制了p38MAPK活性的上升,同时降低了肺凋亡指数。结论高氧诱导的急性肺损伤模型中,磷酸化的p38MAPK表达增加,并表达于肺内多种细胞,可能起促凋亡作用。
- 李静许峰胡兰谭利平符跃强方芳匡凤梧卢仲毅
- 关键词：P38丝裂素活化蛋白激酶高氧症肺损伤幼鼠
