南京军区医学科技创新课题(2007)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：邱红方琳朱月蓉苏长青曹祥荣更多>>
- 相关机构：第二军医大学解放军第81医院南京师范大学更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 携带人白细胞介素10和肝细胞生长因子双基因的重组腺病毒载体构建与鉴定被引量：4
- 2010年
- 目的:构建携带人白细胞介素10(hIL-10)和人肝细胞生长因子(hHGF)双基因的重组腺病毒载体。方法:分别以pDC316-hIL10-EGFP和pCDNA3-hHGF重组质粒为模板,PCR扩增获得hIL-10和hHGF基因片段,与pIRES连接成为hIL10-IRES-hHGF,测序正确后酶切,与pDC315连接,获得穿梭质粒pDC315-hIL10-IRES-hHGF,与腺病毒包装系统转染293细胞,包装产生重组腺病毒hIL10-hHGF,PCR鉴定后,扩增病毒,并测定病毒滴度。用重组腺病毒转染BEL-7402和WRL-68细胞,ELISA法检测上清液中hIL-10和hHGF的含量。结果:成功构建了重组腺病毒hIL10-hHGF,扩增纯化后测得重组腺病毒滴度为1×109pfu/ml,转染BEL-7402和WRL-68细胞72 h后,表达hIL-10的量分别为(6 271.7±5.2)pg/ml和(350.6±12.4)pg/ml,表达hHGF的量分别为(20 827.1±345.5)pg/ml和(201.6±10.1)pg/ml。结论:本实验为进一步研究Ad-hIL10-hHGF在动物体内抗肝炎、肝纤维化作用奠定了基础。
- 邱红朱月蓉邢继成江淑芳苏长青曹祥荣方琳
- 关键词：白细胞介素10肝细胞生长因子腺病毒载体
