江苏省自然科学基金(BK2009518)
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 相关作者：许正宏窦文芳张旦旦史劲松陆震鸣更多>>
- 相关机构：江南大学南通大学教育部更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省科技支撑计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 红景天苷类似物合成及抗二苯基苦基苯肼自由基活性研究被引量：2
- 2010年
- 目的:合成红景天苷类似物,并初步分析评价对2,2-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)的清除能力。方法:以O-乙酰基溴代葡萄糖、O-乙酰基溴代半乳糖为供体,以苯甲醇、苯乙醇取代物为糖配体合成红景天苷类似物。采用微孔板定量法分析测定其对DPPH的清除能力。结果:合成了9个目标化合物,确定其在清除DPPH·反应达到50%时的IC50(μgDPPH·/ml)。结论:所合成类似物皆具有一定的清除DPPH·的能力,尤其是化合物1-(4-羟基苯基)甲基-β-D-葡萄糖苷和1-(4-羟基苯基)甲基-β-D-半乳糖苷,其IC50分别为4.57μg/ml,5.15μg/ml,优于阳性对照维生素C(IC50:12.32μg/ml),显示有很好抗氧化能力。
- 李美兰郭益冰孟颖杨宇民
- 关键词：红景天苷类似物
- 提高重组表达体系相对活性促进外源蛋白表达:人干扰素毕赤酵母表达体系研究被引量：1
- 2011年
- 以毕赤酵母KM71/IH的hIFNβ-HAS表达体系为研究对象,较为系统地研究了不同因素引起的细胞相对活性变化与毕赤酵母外源蛋白表达的相关性。结果表明:(1)细胞相对活性变化与外源蛋白的表达成正相关;(2)处在对数生长中后期的细胞相对活性最高,更适合用于外源蛋白的表达;(3)诱导阶段的环境因素直接影响诱导期细胞相对活性,合适的甲醇浓度、诱导pH及温度是维持细胞高活性,促进外源蛋白高表达的关键。对于hIFNβ-HAS表达体系最佳诱导条件为:以培养21～24h的细胞为诱导种子,初始甲醇浓度为2%(V/V),pH6.0,25℃,细胞活性维持在98%以上,hIFNβ-HSA表达量高达45.6mg/L,较优化前提高了62.3%。
- 窦文芳张旦旦许泓瑜金坚许正宏史劲松陆震鸣
- 关键词：毕赤酵母
- 中温α-淀粉酶高产菌株的选育及其粗酶性质被引量：4
- 2011年
- 以从自然界中筛选的野生芽孢杆菌XLG-1为出发菌株,通过紫外线诱变及紫外线-氯化锂复合诱变筛选出高产中温α-淀粉酶的优异菌株XLG-51,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。初步研究了其所产的α-淀粉酶的酶学性质:通过SDS-starch-PAGE电泳与酶谱分析得该酶分子质量为60 ku左右,最适作用温度为60℃,最适作用pH范围为5.0～6.5,且在最适条件下具有较强的稳定性。以该菌株为生产菌进行5 L罐发酵实验,产酶达5298 U/mL。
- 李文秀张旦旦窦文芳许泓瑜许正宏史劲松陆震鸣
- 关键词：枯草芽孢杆菌Α-淀粉酶诱变
- 融合蛋白GGH在小鼠体内的药效学评价被引量：1
- 2011年
- 目的探讨融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA(GGH)对实验性β细胞轻度损伤的小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)和胰岛功能的影响。方法对小鼠进行造模,血糖仪测定FBG,胰腺组织切片行HE染色,建立β细胞轻度损伤模型小鼠。实验分为正常对照组(normal control group,NC)、模型对照组(model group,DM)、GLP-1对照组、HSA对照组、Exendin-4(Ex-4)阳性对照组、GGH低(2 mg.kg-1)、中(6mg.kg-1)、高(18 mg.kg-1)剂量组(GGH 2、GGH 6、GGH18)治疗。记录14 d内的饮食、饮水、尿量、体重及FBG变化,放射免疫分析法测定空腹血清胰岛素水平(fasting seruminsulin,FINS),免疫组化方法观察胰岛β细胞增殖。结果 C57BL/6♂小鼠单剂量腹腔注射STZ 120 mg.kg-1 14 d后可成功制备稳定敏感的β细胞轻度损伤模型;治疗14 d,GGH中、高剂量组与DM组、GLP-1组、HSA组比较饮食、饮水、尿量减少(P均<0.05),FBG降低(P均<0.01),FINS升高(P均<0.05),胰岛细胞增殖增加(P均<0.05),GGH高剂量组的FBG、FINS与NC组、Ex-4组比较差异均无显著性(P均>0.05),胰岛细胞增殖与Ex-4组比较差异无显著性(P>0.05)。结论融合蛋白GGH通过促进β细胞的增殖和胰岛素的分泌而降低模型小鼠的高血糖,改善"三多一少"症状,其中GGH高剂量组的降糖药效与GLP-1受体激动剂Ex-4接近。
- 范翰李现丽窦文芳杜斌邱丽颖金坚许正宏
- 关键词：小鼠Β细胞损伤GLP-1融合蛋白降糖
- 融合蛋白(GLP-1_(A2G))_2-HSA的分离纯化及其活性评价被引量：4
- 2010年
- 建立简便、快速、高效的重组人血清白蛋白与胰高血糖素样肽-1(GLP-1)突变串联体融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA(GGH)的分离纯化方法。重组毕赤酵母菌株发酵产生的融合蛋白GGH的上清液通过超滤、染料配体亲和层析、凝胶过滤层析、离子交换层析获得高纯度的样品,终回收率为33.1%,12%SDS-PAGE和HPLC检测纯度达到98%。体内活性测定结果表明,融合蛋白GGH在小鼠皮下给药8 h后仍能发挥显著的降血糖作用。结果表明建立的分离纯化方法较好的保留了融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的生物活性。
- 李现丽窦文芳张晓梅许泓瑜邱丽颖金坚许正宏
- 关键词：胰高血糖素样肽-1融合蛋白活性测定
- 京尼平固定NGF壳聚糖膜的制备及缓释NGF作用探讨
- 2010年
- 目的:探讨京尼平固定神经生长因子(NGF)壳聚糖膜(GCN膜)缓释NGF的方法和作用。方法:实验组(GCN膜)采用纯天然生物交联剂京尼平将NGF固定在壳聚糖上,采用壳聚糖固定NGF以后的膜与未分化的PC12细胞共培养法观察细胞生长状态。另设阴性对照组(GC膜)不加NGF,阳性对照组(低血清F12K完全培养基中加入50ng/mlNGF)。结果:GCN膜组的PC12细胞在膜中释放出的NGF作用下突起生长明显,与阴性对照组有显著差异。结论:京尼平固定NGF壳聚糖膜可以有效缓释出具有生物活性的NGF,为临床上损伤神经的修复提供新的可能。
- 赵微加魏丽何江虹杨宇民
- 关键词：壳聚糖京尼平神经生长因子缓释PC12细胞
- 基于蛋白酶活性控制的重组人β干扰素毕赤酵母表达体系优化
- 2012年
- 以毕赤酵母人β干扰素表达体系为研究对象,考察与蛋白酶活性相关的营养和环境因素对外源蛋白hIFN-HAS表达/降解的影响。结果表明,pH、谷氨酸和EDTA是显著影响hIFN-HAS表达的3个因素。通过响应面分析得到hIFNβ-HAS表达的最优条件为pH 5.5、谷氨酸0.18%、EDTA 12 mmol/L,目的蛋白表达量为24.46 mg/L。发酵终产物的电泳结果表明:条件优化后,hIFNβ-HSA降解带明显变淡,说明营养和环境因素的优化一定程度上抑制了蛋白酶的活性,由此增加了目的蛋白的积累。
- 张旦旦窦文芳许正宏史劲松
- 关键词：毕赤酵母Β干扰素融合蛋白蛋白酶酶活性
