国家科技重大专项(2009ZX08012-004B)
- 作品数:3 被引量:20H指数:2
- 相关作者:应义斌吴坚茹柿平李冬阳季峰更多>>
- 相关机构:浙江大学浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程理学农业科学更多>>
- 基于自动磁珠转运的转基因蛋白Cry1Ab检测被引量:2
- 2011年
- 基于自动磁珠转运,建立了转基因蛋白Cry1Ab免疫检测的新方法。利用水热法制备了粒径约400 nm的纳米磁球,并进行电镜表征,通过溶胶法对磁球表面进行氨基修饰,采用戊二醛偶联对磁珠实现抗体包被,在核酸提取仪中进行酶联免疫反应,采用分光光度法进行检测。本方法对转基因蛋白Cry1Ab的检出限低于1μg/L,与商品化酶联免疫试剂盒相当。本方法节约人力、严格控制时间,同时,所需设备成本较低,有望取代传统的手动检测技术。
- 李冬阳樊凯吴坚应义斌
- 关键词:转基因作物磁分离免疫检测
- 分光光度法快速检测细菌被引量:12
- 2010年
- 采用分光光度法来检测完整细胞内H2O2酶的活性,以实现细菌的快速检测。由于细菌(本研究以E.coli DH5α为模型)内含有H2O2酶,当往菌液中加入H2O2时,H2O2会在胞内H2O2酶的作用下分解,其分解过程遵循一级动力学反应。通过测量该反应中H2O2在240nm处吸光度的变化,可以得出该一级反应的速率常数,从而获悉菌液的浓度。结果表明:大肠杆菌单位细胞浓度酶活为4.2×10-13L/(s·cell),其速率常数与浓度在5.7×106~5.7×107cfu/mL范围内呈现良好的线性关系,检出限为5.7×106cfu/mL。本方法是一种检测细菌总数的快速方法,测试时间为5~10min。
- 李冬阳茹柿平吴坚应义斌
- 关键词:细菌检测过氧化氢酶酶活性分光光度法生物传感器
- 基于离子液体修饰碳纳米管电极的碱性磷酸酶电化学检测被引量:6
- 2012年
- 利用自制的离子液体修饰碳纳米管电极(CNTs-ILE),在对CNTs-ILE的特性及对碱性磷酸酶(AP)酶促反应的底物磷酸对硝基苯酯(PNPP)和产物对硝基苯酚(PNP)进行电化学研究的基础上,采用安培法对酶促反应进程实现了持续动态的检测。实验表明,CNTs-ILE的循环伏安特性优于传统玻碳电极,且它在检测PNP时呈现出良好的抗钝化特性。当AP浓度范围在1.0~100 U/L时,电流大小与AP的浓度呈良好的线性关系。本方法可快速检测AP浓度,检测时间在20 min内。CNTs-ILE具有良好的抗钝化、操作简单及制作成本低等特点,在碱性磷酸酶的检测领域中有望得到进一步发展。在传统ELISA基础上,利用CNTs-ILE对具体样本最终的AP酶促反应产物进行电化学检测,通过峰值电流大小确定抗原浓度,为检测以AP为标记酶的抗原和抗体提供了理论依据。
- 茹柿平吴坚应义斌季峰
- 关键词:离子液体碱性磷酸酶对硝基苯酚盐酸克伦特罗