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海洋来源马杜拉放线菌FIM95-F26产生的芳香聚酮类抗菌活性代谢产物的研究被引量：3: 2015年; 目的从海洋来源的马杜拉放线菌FIM95-F26发酵液中分离抗菌活性代谢产物。方法采用16S r RNA基因同源进化分析对放线菌FIM95-F26进行初步分类鉴定,同时对该菌Ⅱ型聚酮合酶基因进行同源进化分析。利用色谱分离技术获得活性代谢产物并对化合物进行结构鉴定和活性分析。结果与结论 16S r RNA基因序列分析表明菌株FIM95-F26属于马杜拉放线菌,而Ⅱ型聚酮合酶氨基酸序列的同源进化分析表明该菌具有产生芳香聚酮类化合物的潜力,通过色谱技术从其发酵液中分离到1个与IB-00208同质的多环氧杂蒽酮类化合物,活性分析表明该化合物具有较强的抗革兰阳性菌活性,其对短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和藤黄八叠球菌的MIC值分别为0.0312、0.125、0.125和0.25μg/m L,其中对短小芽孢杆菌和藤黄八叠球菌的抑制活性属首次报道。; 江宁宇彭飞方志锴吴云丹陈名洪谢阳王海龙江红连云阳; 关键词：抗菌活性次级代谢产物

黄酮类化合物F01WB1695B对肝细胞脂肪变性的抑制作用及分子机制研究被引量：1: 2014年; 目的：研究黄酮类化合物F01WB1695B对脂肪变性人胚肝细胞L-02中脂质合成的抑制作用及其分子作用机制。方法：通过体外油酸诱导L-02细胞发生脂肪化,建立肝细胞脂肪变性细胞模型,再利用不同剂量的F01WB1695B干预脂肪化L-02细胞24 h后,通过油红O染色观察细胞内脂滴量变化,并通过定量检测细胞内甘油三酯（triglyceride,TG）和总胆固醇（total cholesterol,TC）的含量,确定F01WB1695B干预肝细胞脂肪变性的效果。利用报告基因细胞检测方法评价F01WB1695B对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs）的转录激动作用。利用实时荧光定量PCR方法检测F01WB1695B对脂代谢相关基因硬脂酰辅酶A去饱和酶1（stearoyl-Co A desaturase 1,SCD1）、酰基辅酶A氧化酶1（acyl-Co A oxidase 1,ACOX1）和脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,FASN）mRNA水平的影响。结果：与正常组相比,20 mg/L油酸诱导L-02细胞48h后,油红O染色观察细胞内脂滴量明显增加,模型组TG和TC的含量显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;F01WB1695B在20 mg/L浓度及以下时对脂肪化肝细胞无细胞毒作用,F01WB1695B干预脂肪化L-02细胞24 h后,与模型组相比,在0.2-2 mg/L浓度下细胞内脂滴量明显减少,胞内TG和TC值显著降低（P〈0.05）。瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果显示,F01WB1695B对核受体PPAR有较高的转录激活效应,其EC50值为0.5-2.1 mg/L。实时荧光定量PCR结果显示,F01WB1695B可下调脂肪酸合成相关基因SCD1和FASN mRNA的表达,上调脂肪分解代谢相关基因ACOX1 mRNA的表达。结论：黄酮类化合物F01WB1695B可明显降低脂肪变性肝细胞中TG及TC含量,抑制肝细胞脂肪变性,而该作用机制可能是通过激活PPAR通路,下调SCD1和FASN mRNA的表达,上调ACOX1mRNA的表达,进而降低细胞内甘油三脂水平。; 朱京童郑智慧任晓路新华段宝玲孟雅娟; 关键词：黄酮类非酒精性脂肪肝病过氧化物酶体增殖物激活受体

应用人ABCA1表达上调剂高通量筛选模型筛选新型抗动脉粥样硬化药物先导化合物: <正>背景:心血管疾病在发达国家和大多数发展中国家是危害人类健康的主要杀手,而动脉粥样硬化(Atherosclerosis)是多种严重心血管疾病的病理基础,因此,寻找预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物具有十分重要的现实意义...; 王潇刘畅刘鹏许艳妮司书毅; 文献传递

依维莫司加压毛细管电色谱含量测定方法建立: 2015年; 目的采用反相加压毛细管电色谱法定量测定依维莫司含量.方法使用反相色谱柱,以pH5.5的2mmol/L磷酸缓冲液（Na2HPO4-NaH2PO4）-乙腈（30∶70,V/V）为流动相,检测波长为278nm、分离电压为-16kV、流速为0.08mL/min,柱温49℃,等度洗脱.结果经方法学考察确定最佳条件,在该条件下,依维莫司浓度在0.3～5.0mg/mL范围内线性良好（R2=0.9992,n=6）;检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为3.9和7.8 μg/mL;日间和日内精密度均小于5％;加样回收率均高于98％.结论该方法简单方便、准确、灵敏、可靠,适用于依维莫司的定量分析.; 赵琪刘英周斌胡海峰; 关键词：加压毛细管电色谱抗肿瘤依维莫司

靶向murA反义工程菌的构建被引量：1: 2014年; 目的应用反义RNA沉默技术,构建针对murA基因的超敏工程菌。方法将不同murA基因片段插入带有paired termini结构的反义表达载体pHN678中,获得重组质粒,导入大肠埃希菌宿主诱导表达。通过生长表型考察不同反义片段对murA沉默效果的影响,并用靶向MurA抑制剂磷霉素验证反义工程菌E.coli DH5α/pHNM2的敏感性及靶向性。结果反义片段murA1和murA2具有较好的沉默效果,E.coli DH5α/pHNM2对MurA抑制剂磷霉素具有靶标特异性和敏感性。结论成功获得靶向murA反义工程菌E.coli DH5α/pHNM2,并有望进一步应用于MurA特异性抑制剂高通量筛选模型的构建。; 李素秋殷瑜戈梅陈代杰钱秀萍; 关键词：反义RNA技术

异硫氰酸荧光素标记万古霉素的制备及其与细菌相互作用的荧光检测被引量：1: 2014年; 以异硫氰酸荧光素(FITC)标记万古霉素(Vanco)制备了FITC-Vanco(FV),FV经高效液相制备色谱纯化后,进行了质谱结构鉴定。分别通过荧光分光光度计和流式细胞仪(FCM)测定不同浓度FV培养基中培养细菌细胞的荧光强度。结果显示,所制备的荧光探针对5种细菌有特异性结合,用荧光强度可表征细胞结合抗生素的数量,对细菌耐药机制研究和细菌对万古霉素作用敏感性的测试有应用价值。; 徐蓉阮林高戈梅张怡轩; 关键词：万古霉素荧光探针细菌检测

马黛茶多酚加压毛细管电色谱法的定量分析被引量：3: 2015年; 建立同时测定马黛茶多酚中4种有效成分——新绿原酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C的加压毛细管电色谱方法。以乙腈、甲醇和磷酸（p H 2.5,2 mmol/L）为流动相,流速0.07 m L/min,分离电压-10 k V,检测波长325 nm。测定和比较了3种马黛茶产品中4种成分的含量,4种成分分别在0.072~1.2、0.048~0.8、0.072~1.2、0.17~2.8 mg/m L内线性关系良好（r2〉0.999）,精密度分别为1.10%、2.12%、2.98%和2.32%,重复性RSD分别为1.10%、2.12%、2.98%、2.20%,平均回收率分别为98.86%、99.03%、99.48%和99.21%。该方法灵敏、准确,可以用于马黛茶中绿原酸类活性物质分析。与HPLC比较,实验中所用有机试剂、样品用量均远低于普通HPLC检测用量,对于马黛茶多酚的质量控制及其大批量检测具有较大的可行性。; 赵琪臧晓韵胡海峰; 关键词：多酚

BMP2表达上调剂E40071体外抗骨质疏松活性研究: 骨形态发生蛋白Ⅱ(Bone morphogenetic protein 2, BMP2)在骨发育与重建中具有重要作用,本研究利用前期已构建的BMP2表达上调剂高通量筛选模型对20000个化合物进行了筛选,得到阳性化合物E...; 韩小婉宫世强李雪虹贺晓波姜威司书毅; 关键词：骨质疏松成骨分化; 文献传递

产非达霉素药用植物内生放线菌N12W0304的分类鉴定被引量：1: 2018年; 目的对一株分离自药用植物仙鹤草中的产非达霉素菌株N12W0304进行分类研究。方法通过形态特征、培养特征观察、生理生化特征、胞壁分析及16S r DNA序列分析等多相分类研究对菌株进行鉴定。结果菌株N12W0304属于游动放线菌属(Actinoplanes sp.)菌株。结论本报道是首次从仙鹤草中分离到游动放线菌属非达霉素产生菌。; 丁彦博穆云龙霍培元单越琦徐岩路新华张雪霞; 关键词：仙鹤草内生放线菌

L-岩藻糖的生产菌种选育及发酵工艺优化被引量：5: 2015年; 以肠杆菌属(Enterobacter sp.)SIPI-10为出发菌株,经紫外与亚硝基胍(NTG)诱变,筛得1株L-岩藻糖高产突变株SIPI-N79,产量为1 276 mg/L。通过优化发酵培养基组成,得到优化配方(g/L):甘油30.0,胰蛋白胨LP0042 5.0,CaCO3 5.0,L-岩藻糖的摇瓶发酵产量为1 582 mg/L。进一步在5 L发酵罐中进行分批补料培养,当补加150 g葡萄糖时,L-岩藻糖的产量达到4 553 mg/L,较摇瓶发酵水平提高显著。; 黄宜兰王岩陈少欣; 关键词：L-岩藻糖肠杆菌属菌种选育发酵

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国家科技重大专项(2012ZX09301002-003)

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