江苏省“青蓝工程”中青年学术带头人培养对象资助项目(2006)
- 作品数:30 被引量:129H指数:7
- 相关作者:刘宗平刘学忠袁燕张英顾建红更多>>
- 相关机构:扬州大学河南科技大学西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:江苏省“青蓝工程”中青年学术带头人培养对象资助项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- 母鼠妊娠期铅镉联合暴露对新生鼠体内微量元素含量的影响及NAC的保护效应被引量:2
- 2010年
- 为了研究母鼠妊娠期铅镉联合暴露对新生鼠体内微量元素Cu、Fe、Zn、Mn和Se及N-乙酰半胱氨酸(N-Ace-tylcysteine,NAC)的保护作用,35只怀孕SD母鼠被随机分为7组,即A组为对照组(饮用蒸馏水)、B组为铅组(300 mg/L)、C组为铅+NAC组(300 mg/L+20 mmol/L)、D组为镉组(10 mg/L)、E组为镉+NAC组(10 mg/L+20 mmol/L)、F组为铅+镉组(300 mg/L+10 mg/L)、G组为铅+镉+NAC组(300 mg/L+10 mg/L+20 mmol/L)。采用饮水染毒,染毒时间为21 d,分娩后应用电感耦合等离子体质谱仪(Inductively coupled plasma mass spec-troscopy,ICP-MS)检测新生鼠体内微量元素Cu、Fe、Zn、Mn和Se含量。结果表明,与对照组比较,各染毒组新生鼠体内微量元素Cu、Fe、Zn、Mn和Se含量均显著低于对照组(P<0.05),D组较B组降低明显,F组降低最为显著,铅镉联合表现协同毒性效应,镉在铅镉联合毒性损伤中发挥主要作用;与各染毒组比较,NAC保护组新生鼠体内微量元素Cu、Fe、Zn、Mn和Se含量均有不同程度升高,部分组间有显著差异(P<0.05),说明NAC对铅、镉致新生鼠体内微量元素平衡紊乱具有一定的保护作用。
- 路浩达剑森梅莉张英刘宗平
- 关键词:妊娠期微量元素
- 镉对体外培养大鼠大脑皮质神经元钙稳态的影响
- 【目的】研究镉对体外培养大鼠大脑皮质神经元钙稳态的影响。【方法】选用原代培养大鼠大脑皮质神经元为模型,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体经免疫组织化学染色技术鉴定神经元。用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸...
- 袁燕孙娅江辰阳刘学忠顾建红卞建春刘宗平
- 关键词:镉大脑皮质神经元钙稳态
- 文献传递
- SD大鼠近端肾小管上皮细胞的原代培养及鉴定被引量:7
- 2008年
- 采用机械研磨、筛网过滤和酶消化相结合的方法获取肾小管节段进行原代培养,以免疫组织化学法和细胞化学染色法鉴定培养细胞。结果表明,肾小管上皮细胞围绕肾小管节段呈岛屿状向四周逐渐生长并于第4~7天处于对数生长期,培养细胞角蛋白ck18表达阳性,碱性磷酸酶染色阳性,证实培养细胞为近端肾小管上皮细胞,且纯度较高。
- 王林卓丽玲顾建红路浩王富民刘宗平
- 关键词:肾小管上皮细胞细胞培养细胞化学染色
- 磷对成骨细胞超微结构及其GJIC和Ⅰ型胶原含量的影响
- 2011年
- 在体外培养成骨细胞(OB)的基础上,添加0、1、2、4mmol/L磷,作用2d后,采用电子显微镜观察OB的超微结构,采用划痕标记染料示踪技术观察细胞间隙连接通讯(GJIC);作用2、5、8d后,用BCA法蛋白定量试剂盒、Goat Anti-rat Collagen TypeⅠ试剂盒分别检测OB内总蛋白及Ⅰ型胶原的含量,并用DⅠ型胶原/D总蛋白表示Ⅰ型胶原的含量。结果显示,作用2d,4mmol/L磷组OB内线粒体减少、肿胀。4mmol/L磷组GJIC的荧光扩散距离减弱,1、2mmol/L磷组基本不变;就Ⅰ型胶原含量而言,除1mmol/L磷组在作用2d抑制其分泌外(P<0.05),在磷作用2、5、8d均促进其分泌(P<0.05)。结果表明,添加1、2、4mmol/L磷能促进OB的分泌Ⅰ型胶原;4mmol/L磷能抑制OB的代谢活性,且能抑制OB间通讯。
- 卓丽玲刘宗平
- 关键词:成骨细胞磷超微结构细胞间隙连接通讯
- 钙离子超载在镉致大鼠肝细胞凋亡中的作用被引量:2
- 2011年
- 拟探讨Ca2+超载在镉诱导大鼠肝细胞凋亡中的作用。采用两步灌流法获得大鼠肝细胞,经过24 h培养,用醋酸镉、醋酸镉与Bapta-AM共同处理肝细胞。用MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态和凋亡,流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度、ROS生成和ΔΨm变化。结果表明,随着镉剂量的增加和作用时间的延长,细胞变形,坏死细胞和凋亡细胞增多,镉可极显著提高细胞内Ca2+浓度和ROS生成量(P<0.01),极显著降低线粒体膜电位(P<0.01),Bapta-AM可显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低镉的毒性。研究结果提示Ca2+超载在镉致肝细胞凋亡中发挥重要作用。
- 汪纪仓孙娅宋瑞龙卞建春刘宗平
- 关键词:镉肝细胞CA2+细胞凋亡
- 镉对大鼠原代肝细胞的毒性损伤被引量:10
- 2010年
- 用两步灌流法获得大鼠肝细胞,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol/L的醋酸镉24 h。测定了细胞活力、培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性及细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明,细胞相对存活率显著下降(P<0.01),LDH、AST和ALT的释放量增加,5μmol/L和10μmol/L剂量组与对照组相比差异均显著(P<0.01),细胞内GSH-PX活性降低,各剂量染毒组与对照组相比,差异均极显著(P<0.01);细胞内GSH含量升高,5μmol/L和10μmol/L剂量组与对照组差异均显著(P<0.05),细胞内MDA含量升高,10μmol/L剂量组与对照组相比差异显著(P<0.05)。表明镉可致肝细胞损伤,并且氧化应激起了重要作用。
- 汪纪仓张英裔传卉邹辉刘宗平
- 关键词:镉大鼠肝细胞氧化应激
- 镉致大鼠肝细胞凋亡及N-乙酰半胱氨酸的保护作用被引量:7
- 2010年
- 用两步灌流法获得大鼠肝细胞,应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法、Hoechst33258荧光染色法和流式细胞仪检测醋酸镉对肝细胞存活率和凋亡率的影响,以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护效应。结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol/L的醋酸镉后,细胞相对存活率显著下降(P<0.01),凋亡率显著升高(P<0.05),且具有剂量-效应关系;2mmol/L的NAC可使细胞相对存活率明显提高(P<0.01),凋亡率下降。结果提示,一定浓度醋酸镉可引起肝细胞凋亡,NAC具有一定的保护作用。
- 汪纪仓裔传卉邹辉卓丽玲刘宗平
- 关键词:镉大鼠肝细胞细胞凋亡N-乙酰半胱氨酸
- 镉对体外培养大鼠大脑皮质神经元钙稳态的影响被引量:5
- 2013年
- 选用原代培养大鼠大脑皮质神经元为模型,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体经免疫组织化学染色技术鉴定神经元。用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒大鼠大脑皮质神经元12h,利用流式细胞仪检测细胞内[Ca2+]i,ATPase酶试剂盒测定Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性的变化,荧光定量PCR法测定钙调蛋白(CaM)mRNA转录水平。结果表明,免疫组化染色证实培养细胞呈现NSE阳性染色,证明是神经元。与对照组相比,各镉染毒组细胞内[Ca2+]i显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),20μmol/L组CaM mRNA转录水平极显著降低(P<0.01)。说明镉可能通过影响CaM的转录水平与维持钙稳态相关的酶(Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase)活性,干扰神经元细胞内钙稳态,进而造成神经元细胞损伤。
- 袁燕江辰阳孙娅刘学忠顾建红卞建春刘宗平
- 关键词:镉大脑皮质神经元钙稳态
- 铅镉联合暴露对大鼠肾脏功能损伤的研究被引量:8
- 2008年
- 目的探讨铅、镉对大鼠肾脏功能损伤的联合毒性作用。方法对大鼠进行铅(300 mgPb/L)、镉(50 mgCd/L)单独和联合(300 mgPb/L+50 mgCd/L)饮水染毒8周,检测尿液中碱性磷酸酶(UALP)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)、γ-谷氨酰基转移酶(UGGT)活力和总蛋白(UTP)、α1-微球蛋白(Uα1-MG)、微量白蛋白(UmAlb)含量的动态变化。结果单独染毒除2周时Pb、Cd组Uα1-MG含量与Pb组UALP活力外,其余所测指标均从染毒2周开始明显高于对照组(P<0.05;P<0.01),且升高幅度与染毒时间呈正相关;联合染毒组从2周开始,所测指标均明显高于对照组(P<0.01)。在整个试验过程中,联合染毒组尿酶活力和尿蛋白含量均高于单独染毒组。结论Pb、Cd联合暴露对大鼠肾脏功能的损伤呈协同毒性效应。
- 王林陈大伟曹瑾刘宗平
- 关键词:镉尿酶尿蛋白肾脏
- 铅镉联合染毒对大鼠大脑皮质神经细胞的氧化损伤及NAC的保护效应被引量:17
- 2008年
- 为研究铅、镉联合对新生大鼠大脑皮质神经细胞的脂质过氧化损伤及N-乙酰半胱氨酸(N-ace-tylcysteine,NAC)的保护效应,以体外培养的新生大鼠原代大脑皮质神经细胞为试验对象,分17个组进行了不同铅、镉浓度的染毒和保护试验,染毒时间为12h。经超声波粉碎细胞后,测定神经细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乙酰胆碱酯酶(TChE)活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明,与对照组比较,铅、镉单独染毒组GSH-Px、SOD和TChE活性随染毒剂量的增加呈逐渐下降趋势(P<0.05),而CAT活性及MDA含量则呈升高趋势(P<0.05),两者之间具有明显的剂量-效应关系;铅、镉联合染毒对神经细胞GSH-Px、SOD、TChE、CAT活性和MDA含量的改变均较相应的铅、镉单独染毒更为明显,部分组间有显著差异(P<0.05);NAC保护组的MDA含量显著低于相应的染毒组(P<0.05),SOD、GSH-Px、TChE和CAT活性不同程度地高于相应的染毒组,但部分组间差异不显著(P>0.05)。铅、镉联合对新生大鼠大脑皮质神经细胞的氧化损伤表现协同毒性效应,NAC可以提高神经细胞的抗氧化能力,对铅、镉及其联合暴露所致的脂质过氧化损伤有一定的保护作用,但保护作用不明显。
- 卞建春路浩梅莉达剑森张英刘宗平
- 关键词:N-乙酰半胱氨酸脂质过氧化