国家高技术研究发展计划(2003AA205060)
- 作品数：8 被引量：130H指数：5
- 相关作者：韩忠朝梁琳慧王晗吕璐璐刘拥军更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院中国医学科学院中国协和医科大学福建医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状被引量：44
- 2006年
- 目的建立从脐带分离间充质干细胞的方法,并研究其生物学性状。方法脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养,倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线,计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型,免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力,RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。结果经酶消化后,每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示,>80%的细胞处于G0/G1期,S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性,CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素,酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子,不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。结论建立从脐带中分离间充质干细胞的方法,脐带是间充质干细胞的新的来源。
- 吕璐璐刘拥军许贞书王彤张浪辉朱雄鹏梁琳慧王晗陈志哲韩忠朝
- 关键词：间充质干细胞脐带多能干细胞
- 缺氧诱导因子-1与细胞凋亡被引量：22
- 2005年
- 缺氧诱导因子 1(HIF -1)是一种主要由缺氧诱导细胞产生的重要的转录因子。HIF- 1的表达水平与糖酵解、细胞周期阻滞、细胞生存与增殖、血管新生、血管舒缩、红细胞生成、肿瘤生长,转移以及肿瘤多药耐药等许多生命活动密切相关。HIF- 1通过调控凋亡相关基因的转录在促细胞凋亡和抗细胞凋亡中都发挥着重要的作用。
- 王晗韩忠朝
- 关键词：缺氧诱导因子-1细胞凋亡抗细胞凋亡
- 脐带源间充质干细胞促进造血细胞在NOD/SCID小鼠归巢被引量：12
- 2006年
- 目的探讨脐带源间充质干细胞(hUC-MSC)在促进造血细胞归巢,提高造血干细胞植入中的作用。方法RT-PCR检测经体外培养扩增所得hUC-MSC归巢相关分子的表达;将hUC-MSC和CFDA-SE荧光标记的人脐带血单个核细胞(MNC)植入NOD/SCID小鼠建立共移植模型,分离共移植24h后小鼠骨髓有核细胞,用流式细胞仪和荧光倒置显微镜观察脐带血造血细胞在NOD/SCID小鼠骨髓中含量的变化。结果hUC-MSC表达SDF-1及其受体CXCR-4以及相关黏附分子CD11a/ICAM-1、CD49d/VCAM-1;在hUC-MSC共移植情况下,流式细胞仪检测和荧光显微镜下细胞计数均发现人脐带血MNC在小鼠骨髓中的含量与单独脐带血移植相比较有显著提高〔(145±59)/1×105vs(298±72)/1×105;(755±158)/5×105vs(1598±227)/5×105个骨髓有核细胞;n=9,P<0.05)〕。结论hUC-MSC具有表达化学趋化因子及相关黏附分子的特性,有利于实现自身的归巢定位并引导造血干祖细胞的有效归巢与植入;动物模型的建立进一步证实其引导脐带血MNC在NOD/SCID小鼠体内向造血龛———骨髓富集(归巢)的作用。
- 张浪辉陈志哲吕璐璐王爱萍韩忠朝刘拥军
- 关键词：间充质干细胞脐带
- 蛋白质相互作用的研究方法被引量：5
- 2005年
- 蛋白质相互作用的研究是现代分子生物学研究领域一个很重要的方面。该文介绍了经典的和最近新建立的研究蛋白质相互作用的方法,并比较了各种方法的优缺点和所适用的领域。
- 梁琳慧韩忠朝
- 关键词：蛋白质相互作用信号转导
- 血友病骨关节病101例X线表现及临床分析被引量：24
- 2006年
- 目的 通过单中心较大样本的X线检查及临床分析，了解我国血友病骨关节病的治疗现状。方法 回顾性分析101例血友病患者的临床资料和骨关节的放射学积分。结果 ①患者首次发生异常出血和首次就诊的中位年龄分别为1岁和15岁，诊断时间延迟。②骨关节病在重型、中型、轻型血友病的发生率分别为77．8％、53．6％、20．0％，中型、轻型患者也有较高的罹患率。易受累的关节依次为膝、肘、踝；③在0～9岁、10～19岁、20～29岁、30～39岁、40～49岁、≥50岁等各年龄段，骨关节病的发病率分别为37．5％、59．4％、78．3％、83．3％、76．9％、100％。④治疗组和非治疗组骨关节病的发病率分别为69．4％和62．1％。差异无显著性；⑤骨关节畸形的发生率在具有靶关节组和无靶关节组分别为71．2％和20．0％，差异有显著性。结论 我国血友病患者骨关节病发病率高，成为影响患者健康相关生活质量的主要因素之一。靶关节可以作为判断发生病变骨关节预后的较好指标。
- 孙淑娟张磊杨仁池孙洪砚韩忠朝
- 关键词：血友病
- 口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠的促造血重建作用
- 2005年
- 目的:探索口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠造血重建作用.方法:通过在大剂量化疗前/后喂服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌,检测化疗后小鼠的生存率,小鼠在不同时间外周血血常规、骨髓细胞数、骨髓中Sca-1和C-kit细胞含量、不同时间骨髓生成各系细胞的集落数等.结果:在大剂量化疗前、后均口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组小鼠生存率高于只在化疗前口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组;两组口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组小鼠存活率明显高于PBS对照组及携带空载体的减毒沙门氏菌组;口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌组小鼠在化疗后第9～12天的外周血血小板数、骨髓细胞中Sca-1和C-kit阳性细胞含量明显比对照组高,第5天、9天、12天的骨髓细胞总数、骨髓细胞形成Mix集落数明显增加.结论:口服减毒沙门氏菌SL3261为载体的PF4基因可以保护小鼠免受损伤,并促进化疗损伤小鼠的造血恢复.
- 闫凤英卢士红许子亮刘斌赵丽华梁琳慧宋忻杨发金韩忠朝
- 关键词：小鼠PF4减毒口服大剂量化疗基因
- 脐带血干细胞的基础与应用研究被引量：20
- 2006年
- 作为造血干/祖细胞(hematopoieticstemcells/hematopoieticprogenitorcells,HSCs/HPCs)的另一来源,脐带血已经应用于临床治疗多种恶性和非恶性疾病。脐带血中HSCs/HPCs的质与量是决定其临床应用效果的最重要因素。同时,脐带血中还存在多种非造血的干细胞和前体细胞,如间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)、内皮前体细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)和非限制性体干细胞(unrestrictedsomaticstemcells,USSCs)等,这些细胞可能会在未来的细胞治疗和再生医学中发挥重要作用。本综述还讨论了脐带血的临床应用及HSCs/HPCs的体外扩增、增加HSCs归巢和再植能力等提高其临床应用能力的相关研究。
- 顾东生刘斌韩忠朝
- 关键词：脐带血造血干细胞
- 中国儿童急性淋巴细胞白血病患者CyclinD1基因多态性的探讨被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨细胞周期蛋白CyclinD1外显子4(870A/G)多态性与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的相关性。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和PCR-RFLP方法,分析183例儿童ALL患者和190例健康对照者的CyclinD1基因型。结果:与健康对照组相比,携带AA基因型者患ALL的相对风险度增加3.2898(P=0.0207);携带AA型的T-ALL患者显著高于B-ALL患者(P=0.047);携带AA型的ALL高危患者显著高于标危患者(P=0.011)。结论:Cy-clinD1基因多态性与中国儿童ALL的发生、发展及预后密切相关。
- 王思力侯续伟宋嘉许子亮周毓玲李青山姚蓉韩明哲韩忠朝
- 关键词：CYCLIND1白血病多态性儿童
