国家自然科学基金(38970758) 作品数:11 被引量:32 H指数:5 相关作者: 曹阳 魏厚仁 笪邦红 张缨 卢银平 更多>> 相关机构: 华中科技大学 华中科技大学同济医学院附属协和医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Effect of Transforming Growth Factor-β_2 on Phagocytosis in Cultured Bovine Trabecular Meshwork Cells 2001年 The effect of transforming growth factor β 2 (TGF β 2) on phagocytosis in bovine trabecular meshwork cells in vitro was investigated. After the cultured bovine trabecular meshwork cells were treated with 0 ng/ml, 0.32 ng/ml, 1 ng/ml, 3.2 ng/ml TGF β 2 for 24 h, latex beads were added into the incubation medium, and the numbers of the latex beads in 20 adjacent cells were counted under a microscope 24 h later, after treatment with Wright's stain. Our results showed that the average numbers of the latex beads in the trabecular meshwork cells treated with TGF β 2 of different concentrations were 53.1±1.7 beads/cell, 56.4±2.9 beads/cell and 77.9±6.5 beads/cell respectinvely, in comparison with 45.5±3.3 beads/cell of the control group. TGF β 2 significantly increased the number of the latex beads phagocytosed by cultured bovine trabecular meshwork cells in a dose dependent manner. TGF β 2 could promote the phagocytosis of bovine trabecular meshwork cells in vitro . It may be involved in the cellularity decrease of the trabecular meshwork in the patients of primary open angle glaucoma through promoting the phagocytosis of trabecular meshwork cells. 曹阳关键词:PHAGOCYTOSIS 体外培养人眼小梁细胞表达转化生长因子-β_2 被引量:5 2001年 目的 :了解体外培养人眼小梁细胞是否会表达转化生长因子 β2 (Transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 ) ,以确定TGF β2 的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关。方法 :一步法提取体外培养人眼的小梁细胞RNA ,利用RT PCR检测TGF β2 的mRNA ,用双链测序鉴定PCR产物 ,并用免疫组化SUPERVISION法检测TGF β2 蛋白的表达。结果 :RT PCR扩增得到的单一产物 ,其序列与己知序列完全一致。TGF β2 免疫组化染色呈阳性。结论 :小梁细胞自身产生的TGF β2 ,是小梁网局部微环境和房水中TGF β2 的来源之一 ;TGF β2 不仅通过旁分泌方式 ,也可通过自分泌方式作用于小梁细胞。小梁细胞产生TGF β2 的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关 ,值得进一步研究。 曹阳 魏厚仁 笪邦红关键词:小梁网 转化生长因子Β 开角型青光眼 逆转录聚合酶链反应 转化生长因子-β_2对牛眼小梁细胞吞噬功能的影响 被引量:9 2001年 观察转化生长因子 β2 (transforming growth factor- β2 ,TGF- β2 )对体外培养牛眼小梁细胞吞噬功能的影响。体外培养牛眼小梁细胞经 0、 0 .32、 1.0 0、 3.2 0 ng/ m l TGF- β2 处理 2 4h后 ,加入乳胶微粒 ,2 4h后作瑞氏染色 ,光镜下数取相邻 2 0个细胞中的微粒数。结果发现 :0 .32、 1.0 0、 3.2 0 ng/ ml TGF- β2 可促进牛眼小梁细胞吞噬乳胶微粒 ,与对照组比较有显著差异 ;同时呈现明显的量效关系。提示 TGF- β2 曹阳 魏厚仁 笪邦红关键词:转化生长因子 小梁细胞 TGF-Β2 POAG 原发性青光眼 转化生长因子β_2诱导人小梁细胞凋亡的体外研究 被引量:8 2004年 目的 观察转化生长因子 β2 (transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 )是否能诱导体外培养人眼小梁细胞 (humantrabecularmeshworkcells,HTMC)发生凋亡。方法 将体外培养的第 3~ 5代人眼小梁细胞分为对照组和实验组 ,实验各组分别经 0 .32、1.0 0、3.2μg·L-1TGF β2 作用 4 8h后 ,分别用透射电镜、TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡的诱导情况。结果 透射电镜观察发现凋亡细胞典型的形态学变化———核染色质凝集边集 ,凋亡小体形成等。TUNEL法检出发生DNA片段化的HTMC。经流式细胞术定量分析 ,不同浓度TGF β2 处理的HTMC凋亡细胞百分数分别为 ( 2 .79± 0 .4 4 ) %、( 4 .4 3±1.17) %、( 9.6 0± 2 .0 5 ) % ,其中 1、3.2 μg·L-1TGF β2 处理组与对照组 ( 1.4 1± 0 .34) %相比分别有显著差异和极显著差异。结论 TGF β2 能诱导体外培养HTMC发生凋亡 ,推测其可能参与了原发性开角型青光眼患者和正常人衰老过程中HTMC数目的减少。 笪邦红 曹阳 魏厚仁关键词:转化生长因子 小梁网 凋亡 Tranilast对人眼小梁细胞胶原合成的抑制 被引量:1 2003年 目的观察tranilast对体外培养人眼小梁细胞胶原合成的影响.方法体外培养第3~5代牛眼小梁细胞经0 μg/ml(对照组)、12.5、25和50 μg/ml tranilast处理后,采用3H-脯氨酸掺入及液体闪烁测量技术观察tranilast对体外培养人眼小梁细胞胶原合成的影响.结果 12.5、25和50 μg/ml tranilast处理组3H-脯氨酸掺入率分别为(187±21)%,(127±18)%,(66±12)%,与对照组的(317±48)%比较有极显著差异;同时,3H-脯氨酸掺入率随tranilast质量浓度增加而减少,呈剂量依赖性.结论 tranilast明显抑制小梁细胞胶原的合成.利用tranilast防治原发性开角型青光眼的可能性值得进一步研究. 曹阳 魏厚仁 笪邦红关键词:TRANILAST 小梁细胞 胶原 原发性开角型青光眼 曲尼司特对体外培养的人眼小梁细胞转化生长因子-β_2表达的抑制作用 被引量:5 2004年 目的 观察曲尼司特对体外培养的人眼小梁细胞转化生长因子 β2 (TGF β2 )表达的影响。方法 体外培养的第 3~ 5代人眼小梁细胞经 0 0 (对照组 )、12 5、2 5 0及 5 0 0mg/L曲尼司特处理 4 8h后 ,采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)观察曲尼司特对体外培养的人眼小梁细胞TGF β2 表达的影响 ,以人甘油醛 3 磷酸酯脱氢酶 (G3PDH)作为内参照。结果 12 5、2 5 0及 5 0 0mg/L曲尼司特处理组TGF β2 /G3PDH象素值比值分别为 1 85± 0 35 ,1 6 6± 0 4 2 ,1 16± 0 2 4 ,与对照组比值 3 82± 0 5 6比较 ,差异有非常显著意义 (q′ =10 77,11 80 ,14 5 4 ;P <0 0 1) ;同时 ,TGF β2 /G3PDH比值随曲尼司特浓度增加而变小 ,呈现明显的量效关系。结论 曲尼司特能明显抑制小梁细胞TGF β2 的表达。可从发病学途径探讨曲尼司特对原发性开角型青光眼的治疗机制。 曹阳 笪邦红 魏厚仁关键词:曲尼司特 体外培养 小梁细胞 转化生长因子-Β2 原发性开角型青光眼 Tranilast对TGF-β_2抑制人眼小梁细胞生长作用的影响 被引量:1 2002年 目的 :观察tranilast对转化生长因子 β2 (transform inggrowthfactor β2 ,TGF β2 )抑制体外培养人眼小梁细胞生长作用的影响。方法 :采用MTT法观察 0 μg/ml、12 .5 μg/ml、2 5μg/ml和 5 0 μg/mltranilast对 3.2ng/mlTGF β2 抑制体外培养人眼小梁细胞生长作用的影响。结果 :2 5 μg/ml和 5 0 μg/ml收稿日期 :2 0 0 2 -0 3 -2 7;修回日期 :2 0 0 2 -0 4-15基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (3 8970 75 8)。作者简介 :曹阳 (1972 -) ,男 ,湖北武汉人 ,医学博士 ,主治医师 ,研究方向 :青光眼。通信作者 :曹阳 (E -mail:ytsao @sohu .com)。tranilast处理组人眼小梁细胞的光密度A值分别为 (1.136±0 .135 )和 (1.2 4 6± 0 .15 2 ) ,与对照组的 (0 .896± 0 .190 )比较 ,差异分别有显著性 (q =3.2 3,P <0 .0 5 )和非常显著性 (q =4 .70 ,P <0 .0 1)。结论 :Tranilast可明显拮抗TGF β2 对体外培养人眼小梁细胞抑制生长的作用。利用Tranilast在发病学环节防治原发性开角型青光眼的可能性 。 曹阳 魏厚仁 笪邦红关键词:TRANILAST TGF-Β2 小梁细胞 原发性开角型青光眼 Tranilast抑制TGF-β_2对人眼小梁细胞胶原合成的促进作用 被引量:2 2003年 目的 :观察tranilast对转化生长因子 -β2 (Transforminggwowthfactor -β2 ,TGF -β2 )促进体外培养人眼小梁细胞胶原合成作用的影响。方法 :采用3 H -脯氨酸掺入及液体闪烁测量技术观察 0 μg·ml-1(对照组 )、 12 5 μg·ml-1、 2 5 μg·ml-1和 5 0 μg·ml-1tranilast对3 2ng·ml-1TGF -β2 促进体外培养人眼小梁细胞胶原合成作用的影响。结果 :12 5 μg·ml-1(q′ =4 2 6,P <0 0 5 )tranilast处理组3 H -脯氨酸掺入量为 62 0 3 3± 80 46,与对照组的 817 3 7± 12 4 2 1比较有显著差异 ;2 5 μg·ml-1(q′ =4 81,P <0 0 1)和 5 0 μg·ml-1(q′ =8 62 ,P <0 0 1)tranilast处理组3 H -脯氨酸掺入量为5 94 5 8± 88 13、 418 64± 67 90 ,与对照组比较有极显著差异 ;同时 ,3 H -脯氨酸掺入量随tranilast浓度增加而减少 ,呈现明显的量效关系。结论 :Tranilast明显抑制TGF -β2 对体外培养人眼小梁细胞胶原合成的促进作用。利用tranilast防治原发开角型青光眼的可能性值得作进一步研究。 曹阳 魏厚仁 笪邦红关键词:TRANILAST 小梁细胞 胶原 转化生长因子 转化生长因子-β_2对牛眼小梁细胞外基质合成的影响 被引量:9 2002年 目的 观察人眼房水中转化生长因子 β2 (transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 )对体外培养牛眼小梁细胞外基质合成的影响。方法 将体外培养的第 3~ 5代牛眼小梁细胞分为对照组和实验组 ,实验各组分别经 0 32× 10 3 ng/L、1 0 0× 10 3 ng/L、3 2 0× 10 3 ng/LTGF β2 作用 4 8h后 ,分别应用3 H 脯氨酸掺入及液体闪烁测量技术、酶联免疫吸附法和放射免疫技术检测小梁细胞胶原 (collagen ,CA)、纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)及透明质酸 (hyaluronicacid ,HA)的合成。结果 与对照组相比 ,不同浓度的TGF β2 均可促进牛眼小梁细胞CA的合成。 0 32× 10 3 ng/L、1 0 0× 10 3 ng/LTGF β2 组与对照组比较差异有显著意义 (q′=3 85、4 38,P <0 0 5 ) ,3 2 0× 10 3 ng/LTGF β2 组与对照组比较差异有非常显著意义 (q′ =11 4 0 ,P <0 0 1) ,3 H 脯氨酸掺入量呈浓度依赖性增高 ;1 0 0× 10 3 ng/L、3 2 0× 10 3ng/LTGF β2 组促进牛眼小梁细胞合成FN ,与对照组比较差异有显著意义 (q′=3 6 3,P <0 0 5 )和非常显著意义 (q′ =2 0 10 ,P <0 0 1) ;1 0 0× 10 3 ng/L、3 2 0× 10 3 ng/LTGF β2 组均抑制牛眼小梁细胞合成HA ,与对照组比较差异有非常显著意义 (q′=15 15、16 92 ,P <0 0 曹阳 魏厚仁 张缨 笪邦红 卢银平关键词:转化生长因子-Β2 小梁细胞 小梁网 原发性开角型青光眼 体外培养牛眼小梁细胞表达胰岛素样生长因子-Ⅰ的研究 被引量:7 2002年 目的 了解体外培养牛眼小梁细胞是否表达胰岛素样生长因子 Ⅰ (insulin likegrowthfactor Ⅰ ,IGF Ⅰ )。方法 体外培养新生牛眼小梁细胞并传 3代。采用Trizol试剂盒一步法提取细胞RNA ,应用高度特异性寡核苷酸引物对IGF Ⅰ的mRNA进行逆转录聚合酶链式反应 (reversetranscriptase polymerasechainreaction ,RT PCR)检测 ,并对扩增产物进行DNA双链测序鉴定。应用免疫组化Supervision染色法检测IGF Ⅰ蛋白的表达。结果 体外培养细胞符合牛眼小梁细胞的特点。RT PCR扩增得到单一的产物 ,其序列与已知序列完全一致。IGF Ⅰ免疫组化染色阳性。结论 小梁细胞自身产生IGF Ⅰ ,IGF Ⅰ的异常变化可能与原发性开角型青光眼的发病有关。 曹阳 董继华 魏厚仁关键词:小梁网 胰岛素样生长因子I 逆转录聚合酶链反应 IGF-I 原发性开角型青光眼