广西壮族自治区自然科学基金(2013GXNSFAA019163)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：谢玉波肖强王晓通杨杰廉超更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- E2F-1过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其机制
- 2014年
- 目的探讨E2F-1过表达对胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法采用携带E2F-1基因的重组慢病毒颗粒(LV-E2F-1-GFP)感染人胃癌SGC-7901细胞(LV-E2F-1-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染人胃癌SGC-7901细胞作为阴性对照(LV-GFP组);空白对照组常规培养胃癌SGC-7901细胞,不作任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测各组细胞周期的分布,RT-PCR和Western blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2、CylinD1和Survivin基因mRNA和蛋白的表达。结果与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-E2F-1-GFP组人胃癌SGC-7901细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Skp2、Bcl-2、CylinD1和Survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组和空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒介导E2F-1基因过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与E2F-1基因过表达使胃癌细胞Skp2、Survivin、Bcl-2、CylinD1基因表达下调和Bax基因表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：胃癌SGC-7901细胞E2F-1过表达
- E2F-1基因沉默可增强人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性被引量：4
- 2013年
- 目的探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNA-E2F-1组;以阴性对照慢病毒颗粒(Lv-shRNA-NC)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNANC组;空白对照组不做任何处理。以MTT法测定转染后各组细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50),并以AxnnexinV-PE/7-AAD双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用Western blot和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞中E2F-1、survivin、Bcl-2的mRNA及蛋白水平进行检测。结果与Lv-shRNA-NC组和空白对照组相比,Lv-shRNA-E2F-1组细胞对顺铂的IC50显著降低,细胞凋亡率显著提高,细胞周期阻滞于G0/G1期,差别均有统计学意义(P<0.05);Lv-shRNA-E2F-1组E2F-1mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降45.0%和41.3%,蛋白水平分别下降66.7%和70.5%(均P<0.01);LvshRNA-E2F-1组survivin mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降30.3%和28.7%,蛋白水平分别下降56.5%和53.6%(均P<0.01);Lv-shRNA-E2F-1组Bcl-2 mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降76.6%和76.8%,蛋白水平分别下降74.6%和79.9%(均P<0.01);Lv-shRNA-NC组与空白对照组比较,上述指标差别均无统计学意义(均P>0.05)。结论:沉默E2F-1基因可有效提高人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性,其机制可能与survivin及Bcl-2表达下调有关,提示E2F-1可能成为胃癌药物治疗的新靶点。
- 廉超杨杰王晓通谢玉波肖强
- 关键词：E2F-1胃癌CISPLATIN
- E2F-1基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC7901／顺铂多药耐药性的逆转被引量：3
- 2014年
- 目的探讨E2F一1基因沉默后对人胃癌顺铂（DDP）耐药细胞株SGC7901／DDP多药耐药性的影响及可能的作用机制。方法将人胃癌耐药细胞株SGC7901／DDP接种于6孔板，并分为以E2F-1基因沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA—E2F-1感染的SGC7901／DDP细胞（实验组）、以对照慢病毒颗粒Lv-shRNA，NC感染的SGC7901／DDP细胞（阴性对照组）以及常规培养的SGC7901／DDP细胞（空白对照组）。采用Westernblot技术检测各组细胞中E2F-1蛋白的表达，采用四甲基偶氮唑蓝法检测阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对各组细胞的半数抑制浓度（IC50），采用流式细胞术检测各组细胞中阿霉素的泵出率和细胞凋亡率，采用半定量RT—PCR和Westernblot技术检测各组细胞中多药耐药基因1（MDRl）、多药耐药相关蛋白（MRP）及凋亡相关基因cyclinD1、c-Myc、Skp2mRNA和蛋白的表达水平。结果实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量分别为0．794±0．033、1．487±0．082和1．5114-0．084，实验组SGC7901／DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量较阴性对照组和空白对照组分别下降46．6％和47．5％（P〈0．01）。阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对实验组SGC7901／DDP细胞的Ic50均较阴性对照组和空白对照组明显降低（均P〈0．01）。实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞中阿霉素的泵出率分别为（0．16±0．01）％、（0．37±0．01）％和（0．35±0．02）％，实验组SGC7901／DDP细胞中阿霉素的泵出率明显低于阴性对照组和窄白对照组（P〈0．01）。实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞的凋亡率分别为（33．82±1．26）％、（17．34±0．81）％和（13．164-1．06）％，实验组SGC7901／DDP细胞的凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组（P〈0．01）。与阴性对照组和空白对照组比较，实验组SGC7901／DDP细胞中MDRl、MRP、cycl
- 廉超杨杰王晓通谢玉波肖强
- 关键词：顺铂
- 慢病毒介导E2F-1基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制被引量：1
- 2014年
- 目的探索E2F-1基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制。方法用携带E2F-1基因的重组慢病毒颗粒(LV-E2F-1-GFP)感染人胃癌MGC-803细胞,作为实验组(LV-E2F-1-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LVGFP)感染人胃癌MGC-803细胞,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。用RT-PCR和Western blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2和survivin基因的表达。结果与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-E2F-1-GFP组人胃癌MGC-803细胞Skp2、Bcl-2和survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05)。结论慢病毒介导E2F-1基因过表达可能通过降低Skp2、survivin、Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达来抑制人胃癌MGC-803细胞增殖。
- 曹稳珑韦尉元罗文张笑石严林海谢玉波肖强
- 关键词：胃癌MGC-803细胞E2F-1过表达
