刘东亮
作品数： 18被引量：48H指数：4
  • 所属机构:新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室
  • 所在地区:新疆 乌鲁木齐市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金

相关作者

孙素荣
作品数：99被引量：209H指数：8
供职机构：新疆大学
研究主题：骆驼蓬 新疆出血热病毒 新疆出血热 糖蛋白 原核表达
李阳
作品数：23被引量：37H指数：4
供职机构：新疆大学
研究主题：新疆出血热病毒 骆驼蓬 糖蛋白 原核表达 苦豆子
张富春
作品数：512被引量：2,596H指数：24
供职机构：新疆大学生命科学与技术学院
研究主题：盐穗木 盐胁迫 卵透明带3 原核表达 新疆家蚕抗菌肽
李婷婷
作品数：10被引量：26H指数：2
供职机构：新疆大学
研究主题：苦豆子 凝集素基因 凝集素 抗肿瘤 细胞凋亡
吴婷
作品数：56被引量：102H指数：5
供职机构：新疆维吾尔自治区人民医院
研究主题：高血压 生物信息学 抗肿瘤 骆驼蓬 B16
作品列表
重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价被引量：5
2014年
目的选取新疆出血热病毒M基因（编码糖蛋白Gn,Gc）和S基因（编码核蛋白NP）部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果。方法将NP（aa1~482）、NP2（aa170~305）和糖蛋白Gn（aa529~820）、Gc（aa1050~1697）片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价。结果经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确。pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达（865.15±6.29）pg/mL及（1727.21±33.93）pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0.01）。pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为（19.11±1.20）pg/mL和（20.07±1.67）pg/mL,都显著高于对照组的（9.35±1.82）pg/mL（P〈0.05）。结论成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体。各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗。
李阳刘东亮汪梅芳武勇凯王咏星李轶杰彭倩马洁杨建华孙素荣
关键词：新疆出血热病毒基因免疫基因疫苗
吡唑啉酮配合物杀菌抗肿瘤活性及与DNA的作用
2013年
目的:合成5种吡唑啉酮金属配合物,测定其杀菌抗肿瘤活性及与DNA的作用。方法:牛津杯法和MTT法检测其杀菌抗肿瘤活性,紫外光谱法研究其与DNA的作用。结果:Cd-PMPP-SAL抗菌抗肿瘤活性较好,对金黄色葡萄球菌的最小抑制浓度为15μg/mL,对人食管癌细胞和人宫颈癌细胞作用72 h细胞存活率仅为9.67%和0.74%;该类配合物使DNA紫外吸收呈现减色效应。结论:Cd-PMPP-SAL有显著的杀菌抗肿瘤活性。
吴婷刘东亮石伟张富春刘浪孙素荣
关键词：抑菌活性抗肿瘤活性
苦豆子凝集素粗品对9种常见致病菌的抑制效果被引量：1
2012年
目的研究苦豆子种子凝集素粗品对几种常见细菌的抑制作用。方法获得不同硫酸铵饱和度下苦豆子种子凝集素粗品,用鸡血和鼠血红细胞分别检测其凝集活性,并以表皮葡萄球菌、粪肠球菌、臭鼻克雷伯菌等9种细菌作为供试菌,比较不同硫酸铵饱和度下凝集素粗品的抑菌活性。结果苦豆子种子凝集素粗品对鸡、鼠血红细胞有不同程度的凝集作用,对9种供试菌均有抑菌活性,其中对福氏志贺氏菌、肺炎克雷伯氏菌、类产碱假单胞菌和大肠埃希菌的抑制效果明显。结论结果表明苦豆子凝集素粗品具有抑制细菌生长的作用,其中对所选革兰氏阴性菌(G-)的抑菌效果好,本研究为苦豆子凝集素将来进一步开发成临床抗菌药物提供了实验依据。
刘东亮殷晓丽王燕孙素荣
关键词：苦豆子凝集活性抑菌活性
C端酰胺化提高新疆家蚕抗菌肽抗菌活性并未改变其杀菌模式
Objective: To gain insight into the effects of amidation on the biological activity and mode of action in Cecr...
刘东亮刘军张富春
关键词：ANTIMICROBIALCECROPINAMIDATION
骆驼蓬脂转移蛋白基因克隆、表达及体外抗癌活性分析
2014年
[目的]构建骆驼蓬脂转移蛋白(Ph LTP)原核表达载体,并研究表达产物的体外抗癌活性。[方法]采用RT-PCR法从骆驼蓬(Peganum harmala)叶中扩增Ph LTP基因,将其成熟肽片段克隆至p ET-30a载体上,构建表达载体p ET-30a-Ph LTP,将重组质粒转化E.coli BL21进行原核表达,通过镍柱纯化获得重组骆驼蓬脂转移蛋白(r Ph LTP),经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,用MTT法检测其体外抗癌活性。[结果]成功构建骆驼蓬脂转移蛋白c DNA表达载体p ET-30a-Ph LTP,其在E.coli中以可溶性融合蛋白形式表达,分子量约为18 k Da。经镍柱纯化后重组蛋白r Ph LTP能够显著抑制宫颈癌He La、黑色素瘤B16和食管癌Eca-109细胞的生长,IC50值分别为16.76±1.23、38.92±2.16和9.01±1.01μg/m L。[结论]克隆了骆驼蓬脂转移蛋白基因并在原核表达系统中成功表达,r Ph LTP所显示的显著抗癌活性预示其具有临床应用的潜能。
赵晶李轶杰罗晶晶彭永玉吕慧刘东亮孙素荣
关键词：纯化抗肿瘤作用
一种骆驼蓬脂转移蛋白基因及重组表达和应用
本发明涉及一种骆驼蓬脂转移蛋白基因(PhLTP)，以及制备获得重组骆驼蓬脂转移蛋白的方法及其在抑菌和抗肿瘤方面的应用。所述的骆驼蓬脂转移蛋白基因具有序列表SEQ ID NO.1中所示的碱基序列，其编码由序列表SEQ ID...
孙素荣张富春刘东亮吕慧李婷婷
文献传递
新疆出血热病毒基因组抗原表位及其实验室检测价值的评价
2023年
目的掌握克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)片段的精细抗原表位谱分布,明确优势抗原表位在克里米亚-刚果出血热(CCHF)实验室检测中的价值。方法2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良生物肽合成方法分段表达出由8个氨基酸组成的最小合成短肽,以CCHFV多克隆抗体或单克隆抗体14B7(IgM)或CCHFV阳性羊血清为抗体,用免疫印迹方法鉴定出NP和GP片段上具有抗原活性的最小抗原表位(BCE),并采用邻接法将获得的具有序列多态性的BCE与不同地区的CCHFV进行空间聚类,确定BCE组合方式与地理区域分布的相关性,探讨其在建立血清学诊断中的应用价值。采用原核表达质粒(pET-32a、pGEX-KG)和带有不完整谷胱甘肽(GST188)标签的原核表达质粒(pXXGST-ST-1)构建和表达NP片段上6个不同肽段长度的优势抗原表位,建立间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,以经免疫荧光法(IFA)鉴定的CCHF羊血清为对照,统计分析不同肽段长度的抗原表位重组蛋白与IFA检测结果的特异度、敏感度和总符合率。结果CCHFV NP和GP片段共有30个具有抗原活性的BCE,其中NP片段抗原表位集中的核心中间片段NP_(2)(aa 170~305)有6个BCE,两端的NP1(aa 1~200)和NP3(aa 286~482)有9个BCE;GP片段的Gc(aa 1~558)和Gn(aa 533~708)片段有14个BCE和1个包含15个氨基酸的长抗原肽(AP),NP片段BCE氨基酸序列的同源性为97.1%,GP片段对应的同源性为89.1%。在GP片段9个具有序列多态性的BCE中,由GnEc1、GnE2、GnE4、GcE3、GcE6和GcAP-4(Ap)6个组合BCE可将15株来自全球不同地区的CCHFV聚类成亚洲Ⅰ、亚洲Ⅱ、非洲Ⅰ、非洲Ⅱ和欧洲5个地理类群。构建表达的PET-32a-NP(全长)、PGEX-KG-NP_(2)(aa 170~305)、pGEX-KG-NP_(2-1)(aa 235~275)、PGEX-KG-NP_(2-1-1)(aa 237~256)、pXXGST-1-NP_(2-1-2)(aa 250~265)和PGEX-KG-NP_(2-1-3)(aa 260~276)6个重组蛋白CCHFV NP兔多克隆抗血清(pAb)免疫
张花花赵国玉李阳史深安冉袁江玲刘东亮窦景锐雒涛孙素荣张渝疆
关键词：表位酶联免疫吸附测定核蛋白
骆驼蓬种子中一种具抗肿瘤活性蛋白的分离纯化及鉴定被引量：12
2012年
骆驼蓬种子经浸提、硫酸铵沉淀、CM阳离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化得到一种具有抗肿瘤细胞增殖活性的蛋白(命名为PhLTP),经Tricine-SDS-PAGE检测为单一蛋白条带,高效液相色谱检测其表观分子量为14.8 kDa左右,表明PhLTP是由两条相同的亚基组成的蛋白。采用Edman降解法对该纯化蛋白的N-末端进行氨基酸测序,其N-末端序列与其他植物非特异性脂转移蛋白相似。对PhLTP抗肿瘤活性进行研究,结果表明其对HeLa、Eca-109、MGC-9和BEL-7404细胞都有增殖抑制活性,其中对HeLa细胞增殖的抑制作用较好,并具有浓度和时间依赖性,其IC50为45μg/mL。通过Hoechst33258染色观察细胞形态,发现PhLTP能诱导HeLa细胞发生凋亡。
马晓瑾吴婷罗晶晶王燕李阳刘东亮孙素荣
关键词：骆驼蓬分离纯化抗肿瘤诱导凋亡
苦豆子凝集素基因的重组表达及其抗体的制备
2013年
目的:构建苦豆子凝集素基因(SAL)原核和真核表达载体及制备高效价的抗血清。方法:将编码苦豆子凝集素基因(SAL)的ORF成熟肽片段分别克隆到原核表达载体pMAL-p2x和真核表达载体pcDNA3.1中;重组质粒pMAL-p2x-SAL转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达。对pcDNA3.1-SAL质粒进行酶切和测序鉴定;采用"DNA prime-protein boost"策略免疫小鼠制备多克隆抗体;用ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果:制备的多克隆抗体效价为1:102400;Western blot分析表明多克隆抗血清特异性较好。结论:苦豆子凝集素多克隆抗血清具有很好的特异性,为进一步研究苦豆子凝集素的生物学特性奠定了基础。
李阳刘东亮李婷婷孙素荣
关键词：联合免疫
苦豆子凝集素基因植物表达载体的构建及其对烟草的转化被引量：2
2013年
[目的]了解苦豆子凝集素基因(SAL)的功能,将该基因构建到植物表达载体并转化烟草,获得转基因植株。[方法]利用RT-PCR技术,提取苦豆子总RNA进行反转录得到cDNA,通过PCR扩增得到苦豆子凝集素基因SAL,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA1301上,产生重组质粒pCAMBIA1301-SAL。采用农杆菌介导法将重组质粒转化烟草,并进行分析鉴定。[结果]构建了植物表达载体pCAMBIA1301-SAL,转化烟草后经筛选获得76株转基因植株,经抗性筛选及PCR和RT-PCR鉴定,其中27株显示为阳性植株。[结论]苦豆子凝集素基因已经在烟草中成功表达,为进一步研究验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础。
王燕李婷婷李阳吴婷王梦竹刘东亮孙素荣
关键词：烟草
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