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谢小梅
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- 所属机构:江西中医药大学
- 所在地区:江西省
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 苏明声
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- 罗闳丹
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- NODs信号通路在RAW264.7细胞抗烟曲霉菌刺激中的作用被引量：2
- 2012年
- 【目的】通过培养RAW264.7细胞,并运用siRNA沉默NOD2基因来研究NODs信号通路在体外抗烟曲霉中的作用。【方法】体外培养RAW264.7细胞,接种2×105个/孔细胞于六孔板中,分为正常对照组(N)和正常沉默组[NOD2(RNAi),正常+烟曲霉孢子刺激组(N+Af)和正常沉默+烟曲霉孢子刺激组[NOD2(RNAi)+Af],每组三复孔。通过RT-PCR法检测细胞中NOD1、NOD2、RIP2 mRNA表达;Western blot法检测细胞中分泌蛋白TNF-α表达。【结果】与N组比较,N+Af组NOD1、NOD2 mRNA和TNF-α蛋白表达显著上升。与阴性对照组(Nctrol)相比,NOD2(RNAi)组NOD2 mRNA表达明显受到抑制,沉默效果达到80%以上,说明RAW264.7细胞中NOD2基因被成功沉默。与NOD2(RNAi)组比较,NOD2(RNAi)+Af组NOD1、RIP2 mRNA和TNF-α蛋白表达小幅上升,但无显著性差异(P>0.05)。与NOD2基因沉默前比较发现:与N组比较,NOD2(RNAi)组,TNF-α蛋白表达显著性升高(P<0.05)。与N+Af组比较,NOD2(RNAi)+Af组,TNF-α蛋白显著性降低(P<0.05);NOD1、RIP2 mRNA在各组中表达均未见显著性差异。【结论】NODs信号通路在RAW264.7细胞抗烟曲霉中发挥作用,尤以NOD2的作用较突出。
- 罗闳丹张海红苏明声梁永红饶振华谢小梅
- 关键词：烟曲霉菌RAW264.7细胞SIRNA
- NF-κB和TNF-α在烟曲霉菌感染小鼠肺组织中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的探讨核因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在小鼠抗烟曲霉菌早期感染中的作用。方法将小鼠分4组:正常组、免疫抑制组、正常+烟曲霉菌接种组和IPA模型组。小鼠鼻吸入烟曲霉菌48 h处死,取肺组织用western blot法检测胞核NF-κB p65蛋白和细胞中TNF-α的表达。结果正常+烟曲霉菌接种组和IPA模型组小鼠肺组织细胞核NF-κB p65蛋白和细胞中TNF-α表达的量高于正常组和免疫抑制组;正常组小鼠中检出NF-κB p65蛋白和TNF-α表达的量高于免疫抑制组;免疫抑制组肺组织细胞核NF-κB p65蛋白量最低,并且未检出TNF-α的表达。结论烟曲霉菌早期感染可激活小鼠肺组织中NF-κB并上调TNF-α蛋白的表达。
- 陈志平刘金辉罗宏丹谢小梅
- 关键词：烟曲霉菌侵袭性肺曲霉病核因子-KB肿瘤坏死因子-Α小鼠
- 半夏曲炮制过程中微生物数量动态变化的初步分析被引量：3
- 2019年
- 目的:检测半夏曲炮制过程中细菌、酵母菌、霉菌的菌落数量并定量分析其中4种优势微生物数量的动态变化,为研究半夏曲炮制机制提供实验依据。方法:参照《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》(第十册)制备半夏曲,取半夏曲炮制过程中0,30,60,90,120 h共5个不同时间点样品,分别用选择性培养基进行细菌、霉菌、酵母菌的培养和分离纯化,并进行菌落计数;应用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,宛氏拟青霉Paecilomyces variotii,丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis,黑曲霉Aspergillus niger进行绝对定量,分别以枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉重组质粒为对照品,经倍比稀释后制作标准曲线,对半夏曲炮制至5个不同时间点(0,30,60,90,120 h)样品中的4种微生物进行定量分析。结果:半夏曲炮制过程中细菌数量少且变化平缓,而酵母菌和霉菌数量至发酵后期时迅速增加,至发酵结束时均>1×10^6CFU·m L^-1。枯草芽孢杆菌5个不同时间点样品中的拷贝数分别为3.53×10^5,7.56×10^4,1.58×10^5,1.90×10^6,1.85×10^6copies·g^-1;宛氏拟青霉的拷贝数为0,0,0,3.45×10^7,4.15×10^8copies·g^-1;丝衣霉菌的拷贝数为0,0,0,1.04×10^8,2.28×10^8copies·g^-1;黑曲霉的拷贝数为0,0,9.48×10^5,1.47×10^6,7.56×10^6copies·g^-1。结论:半夏曲炮制过程中微生物菌群变化趋势可以用4种优势微生物的动态变化来反映,霉菌在半夏曲炮制中可能起重要作用。荧光定量PCR技术具有快速灵敏、重复性好和特异性高的优点,适用于半夏曲的炮制机制研究。
- 龙凯王立元郭佳佳翁美芝谢卫华苏明声杨明谢小梅
- 关键词：半夏曲菌群变化优势菌种黑曲霉
- TLR4基因的沉默下调了NOD1信号通路在RAW264．7细胞中抗烟曲霉孢子刺激作用被引量：3
- 2012年
- 为研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时NOD1和TLR4信号通路在细胞处于正常状态和免疫抑制状态时发挥的作用,以及沉默TLR4基因后对NOD1信号通路的影响,通过建立细胞免疫抑制模型,利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,运用RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后NOD1,TLR4,RIP2,MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达变化.研究发现:(1)给予RAW264.7细胞含免疫抑制剂甲泼尼龙琥珀酸钠浓度为0.04mg/mL的RPMI1640培养液培养12h后,细胞抑制效果最佳,存活率约为90%.(2)正常RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,NOD1和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用,当细胞处于免疫抑制状态时,NOD1和TLR4信号通路不能激发其有效的免疫应答.(3)TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%.(4)TLR4基因的沉默,使NOD1信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,表明沉默TLR4基因下调了NOD1信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用.
- 饶振华谢卫华苏明声龙凯罗闳丹谢小梅
- 淡豆豉不同制法其成品性状及异黄酮类化学成分含量的比较被引量：5
- 2014年
- 目的:比较古法炮制与现今药典制法的淡豆豉其成品性状及异黄酮类化学成分的含量。方法:采用紫外-可见分光光度法对淡豆豉提取物中的总异黄酮进行含量测定;采用高效液相色谱法对淡豆豉提取物中异黄酮游离苷元(大豆素、染料木素)的含量进行测定。色谱柱为Prevail-C18(250 mm×10.0 mm,5μm),流动相为乙腈-水-乙酸(35∶64∶1,V/V/V),检测波长为260 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,进样量为15μl。结果:古法炮制的淡豆豉气香,质地柔软,断面为棕褐色,表皮皱缩,总异黄酮含量为4.140 mg/g,大豆素含量为1.263 0 mg/g,染料木素含量为1.254 mg/g;现今药典制法的淡豆豉气味微弱,质地稍硬,断面为棕黄色,表皮皱缩,总异黄酮含量为3.530 mg/g,大豆素含量为0.349 mg/g,染料木素含量为0.335 mg/g。结论:古法炮制淡豆豉与现今药典制法淡豆豉相比,前者成品性状好、大豆异黄酮类含量高,古法炮制有明显优势。
- 李刚梁永红杨安金苏明声朱海针谢小梅
- 关键词：淡豆豉总异黄酮染料木素
- 雷公藤甲素对体外培养大鼠胰腺组织的损伤作用
- 2014年
- 目的通过体外实验研究雷公藤甲素对大鼠胰腺组织的损伤作用。方法以空白组为对照,不同浓度的雷公藤甲素作用于体外培养的胰腺组织,12 h后,MTT法检测其吸光度(A490值),计算胰腺组织存活率;碘-淀粉比色法测定胰腺组织分泌的淀粉酶含量。结果随着雷公藤甲素浓度的升高,胰腺组织的存活率逐渐降低,其IC50值为0.002 mg/ml,同时胰腺淀粉酶含量升高(与对照组比较,P<0.05)。结论一定浓度的雷公藤甲素对胰腺组织有损伤作用。
- 程文超梁永红苏明声杨明谢小梅
- 关键词：雷公藤甲素胰腺组织体外
- 肉桂醛和柠檬醛对黄曲霉及烟曲霉细胞DNA与RNA的影响被引量：40
- 2005年
- 目的研究肉桂醛、柠檬醛对黄曲霉和烟曲霉细胞DNA、RNA水平的影响,以期探明其抗真菌的作用机制。方法黄曲霉、烟曲霉接种在含有不同浓度药物的蔡氏固体培养基中,同时设不加药物为空白对照,置26.5℃恒温培养3～6d,将对照组和用药组真菌细胞进行激光扫描共聚焦显微镜观察并作细胞扫描图像分析,以对DNA、RNA进行定量和定位观察。结果用药组DNA、RNA水平发生不同变化,出现多核分生孢子。结论肉桂醛、柠檬醛直接或间接影响了真菌细胞遗传物质的正常合成,以至不能完成正常细胞周期,影响分生孢子梗的正常分化,从而抑制真菌生长、繁殖。
- 谢小梅龙凯许杨方建茹
- 关键词：肉桂醛柠檬醛黄曲霉烟曲霉RNA
- 淡豆豉炮制中产γ-氨基丁酸微生物在不同pH值和不同温度下产酶能力比较研究被引量：5
- 2020年
- 目的阐明淡豆豉炮制中微生物调控γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid,GABA)的形成机制。方法采用Berthelot比色法、福林酚法测定枯草芽孢杆菌、鸟肠球菌、屎肠球菌、解淀粉芽孢杆菌、黑曲霉、黄曲霉、溜曲霉、桔青霉、极细支孢霉、白腐菌、米根霉、鲑色锁掷酵母菌12种微生物在不同pH值和不同温度条件下产谷氨酸脱羧酶(glutamicacid decarboxylase,GAD)、蛋白酶(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶)能力。结果 12种微生物在pH 5~7、28~37℃时产GAD和蛋白酶酶活较高。其中黄曲霉产GAD酶活最高,为41.97 U/h,最适pH 7、温度28℃;其次是鲑色锁掷酵母菌、黑曲霉、米根霉、枯草芽孢杆菌,酶活分别为29.04、25.78、22.42、19.43 U/h。枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶活最高,为24.80 U/mL,最适pH 7、温度37℃;其次是解淀粉芽孢杆菌、米根霉、鸟肠球菌,酶活分别为16.86、12.51、9.18 U/mL。解淀粉芽孢杆菌产碱性蛋白酶活最高,为13.29U/m L,最适pH7、温度34℃;其次是枯草芽孢杆菌、米根霉,酶活分别为8.86、6.20 U/mL。12种微生物产酸性蛋白酶能力普遍较差。结论所选的12种微生物产酶最适pH值、温度与淡豆豉自然炮制基本一致,其中真菌有较强的产GAD能力,细菌有较强的产中性蛋白酶能力,淡豆豉高富集GABA是多菌种共同作用所致。
- 周姝含黄越燕熊京京刘宇星苏明声王立元龙凯谢卫华谢小梅
- 关键词：淡豆豉Γ-氨基丁酸微生物溜曲霉桔青霉米根霉
- 毛蕊花苷和异毛蕊花苷对树突状细胞增殖的影响被引量：20
- 2008年
- 目的观察大粒车前子提取物苯乙醇苷类化合物毛蕊花苷(verbascoside)和异毛蕊花苷(isoverbascoside)对小鼠骨髓来源树突状细胞增殖的影响。方法采用噻唑盐(MTT)法,以细胞因子(rmGM-CSF+rmIL-4)作为阳性对照,观察不同浓度的毛蕊花苷和异毛蕊花苷对小鼠骨髓来源树突状细胞增殖的影响。结果毛蕊花苷和异毛蕊花苷均可促进小鼠树突状细胞的增殖,与阳性对照组比较,毛蕊花苷在1.60×10-7～1.60×10-4mol·L-1内,异毛蕊花苷在所有浓度范围内作用效果均非常显著(P<0.05)。毛蕊花苷和异毛蕊花苷在1.60×10-6和1.60×10-5mol·L-1的浓度与细胞因子联用时,可显著刺激小鼠树突状细胞的增殖(P<0.05)。结论毛蕊花苷和异毛蕊花苷不仅可以直接促进小鼠骨髓来源树突状细胞的增殖,而且与细胞因子有明显的协同作用。
- 唐永富黄丹菲谢明勇谢小梅万茵戴丹丹
- 关键词：毛蕊花苷树突状细胞增殖
- 高良姜、草果防霉作用的实验研究被引量：38
- 2002年
- 观察高良姜、草果的防霉作用。方法:测定高良姜、草果挥发油对６种霉菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。结果:高良姜、草果挥发油有明显的抗霉菌作用。结论:高良姜、草果是高效、安全、价廉的天然防霉药物,可广泛用于食物、中药材及其制品等的防霉。
- 谢小梅龙凯钟裔荣陈和利
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