巫生文
所属机构: 中国医科大学公共卫生学院 所在地区: 辽宁省 沈阳市 研究方向: 医药卫生 发文基金: 国家自然科学基金
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蔡原 作品数:267 被引量:872 H指数:14 供职机构:甘肃农业大学动物科学技术学院 研究主题:镧 氯化镧 铅 海马 旁观者效应 靳翠红 作品数:95 被引量:269 H指数:9 供职机构:中国医科大学公共卫生学院 研究主题:旁观者效应 放线菌素D V79细胞 氯化镧 铅 刘秋芳 作品数:97 被引量:249 H指数:9 供职机构:中国医科大学 研究主题:镧 氯化镧 铅 V79细胞 放线菌素D 杨敬华 作品数:101 被引量:235 H指数:9 供职机构:中国医科大学公共卫生学院 研究主题:镧 汞 氯化镧 镉 海马 逯晓波 作品数:107 被引量:248 H指数:9 供职机构:中国医科大学公共卫生学院 研究主题:ERCC1 DEHP 细胞凋亡 放线菌素D 核苷酸切除修复
氯化镧对大鼠海马即刻早期基因表达的影响 被引量:4 2011年 目的 研究氯化镧(1anthanumchloride,LaCl3)对大鼠海马即刻早期原癌基因(c-jun)、早期生长反应基因1(early growth response gene1,Egrl)和活性调节细胞骨架基因(activity—regulatedcytoskeletalgene,Arc)表达的影响,探讨LaCl3损害学习记忆能力的机制。方法按完全随机化法将40只Wistar雌性成年大鼠分为对照组和低(0.25%)、中(0.50%)、高(1.00%)LaCl3染毒组,各组雌鼠10只,与5只雄鼠按2:1比例交配。对照组和低、中、高剂量染毒组产仔鼠数分别是80、83、78、75只。各LaCl3染毒组仔鼠断乳前吸吮母乳染镧,断乳后饮用0.25%、0.50%和1.0HD%LaCl3溶液1个月。分别采用跳台试验测试仔鼠学习记忆能力,电感耦合等离子体质谱仪测定海马镧含量,RT—PCR法检测海马c-jun、Egr1和ArcmRNA表达,采用Westernblotting法检测海马c-jun、Egr1和Arc蛋白表达。结果低、中、高剂量组仔鼠在跳台测试时错误次数分别是(1.75±0.71)、(2.38±0.92)、(3.00±0.76)次,中、高剂量组均高于对照组的(1.25±0.46)次(q值分别为4.386、6.793,P值均〈0.05);潜伏期分别为(174.13±33.72)、(139.25±45.83)、(75.50±18.56)S,均低于对照组的(206.754-20.47)S(q值分别为2.958、6.121、11.902,P值均〈0.05)。对照组和低、中、高剂量组仔鼠海马c-junmRNA表达量分别为(0.89±0.08)、(0.77±0.12)、(0.58±0.14)、(0.29±0.11),c-jun蛋白表达量分别为(0.72±0.13)、(0.64±0.11)、(0.43±0.11)、(0.31±0.14),Egr1mRNA表达量分别为(0.78±0.09)、(0.61±0.13)、(0.53±0.10)、(0.22±0.08),Egr1蛋白表达量分别为(0.65±0.18)、(0.40±0.15)、(0.32±0.13)、(0.14±0.09),均与染毒剂量具有剂量一反应关系,相关系数r值分别� 杨敬华 刘秋芳 巫生文 张立丰 蔡原关键词:稀土元素 镧 海马 转录 氯化镧对大鼠空间学习记忆、海马cAMP含量和PKA表达水平的影响 2013年 目的观察氯化镧(LaCl3)对仔鼠学习记忆、海马环磷酸腺苷(cAMP)含量及蛋白激酶A(PKA)表达的影响。方法将60只Wistar雌性大鼠,随机分为对照组(饮用蒸馏水)和低、中、高剂量染镧组,LaCl3染毒组从雌鼠受孕第0天起通过自由饮水染毒,至仔鼠断乳后1个月,然后对仔鼠进行水迷宫实验,并测定仔鼠海马cAMP含量、PKA mRNA和蛋白的表达水平。结果各染镧组仔鼠逃避潜伏期显著高于对照组(P<0.05),随着染毒剂量增加,大鼠游泳距离增加(P<0.05),穿过目标平台次数减少(P<0.05),海马cAMP含量显著降低(P<0.05),PKA mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论镧损害大鼠学习记忆能力,其机制可能与其所致的大鼠海马组织cAMP含量减少及PKA mRNA、蛋白表达水平下降有关。 赵永玲 杨敬华 刘秋芳 靳翠红 巫生文 王春秋 蔡原关键词:氯化镧 学习记忆 海马 蛋白激酶A ERCC2/XPD基因缺失对短波紫外线所致CHO细胞DNA损伤修复的影响 被引量:3 2014年 目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因2(excision repair cross complementation group 2/Xeroderma pigmentosum D,ERCC2/XPD)在短波紫外线(UVC)所致细胞DNA损伤与修复过程中的作用。方法采用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)野生型AA8及ERCC2蛋白表达缺失型UV5构建细胞对照模型。MTT法比较两种细胞经UVC处理后细胞抑制率的差别;彗星试验与Rad51免疫荧光试验检测经不同照射强度的UVC处理后修复1、3、6和24 h,不同细胞对UVC所致DNA损伤修复能力的差异。结果与野生型AA8相比,UV5对UVC所致DNA损伤更加敏感,细胞存活率降低(P<0.05)。彗星试验和Rad51免疫荧光试验结果显示,UV5细胞DNA损伤程度较AA8严重,并且修复UVC所致DNA损伤的能力降低(P<0.05)。结论 ERCC2/XPD基因缺失细胞DNA损伤修复能力下降,说明ERCC2/XPD修复酶在UVC所致DNA损伤的切除修复过程中发挥重要作用。 关阳阳 肖莎 李丹丹 薛萍 张国培 刘秋芳 靳翠红 杨敬华 巫生文 逯晓波关键词:ERCC2 镧对大鼠海马CA3区cAMP应答元件结合蛋白磷酸化和及刻早期基因表达的影响 被引量:5 2011年 目的研究镧(La)对大鼠海马CA3区钙调蛋白(CaM)活性、钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV(CaMKIV)和cAMP应答元件结合蛋白(CREB)磷酸化以及c-fos、c-jun和egr1基因表达的影响。方法 40只成年雌性大鼠随机分成对照组和低、中、高剂量LaCl3染毒组,LaCl3组仔鼠在出生至断乳前通过母乳染毒,断乳后通过自由饮水的方式染毒1个月。采用磷酸二酯酶法检测仔鼠海马CA3区CaM活性,Western blot法检测仔鼠海马CA3区p-CaMK IV和p-CREB蛋白表达水平,RT-PCR法检测仔鼠海马CA3区c-fos、c-jun和egr1mRNA表达水平。结果各LaCl3染毒组海马CA3区CaM活性和p-CaMK IV、p-CREB蛋白表达水平均显著低于对照组,且具有一定的剂量-反应关系。低、中剂量LaCl3染毒组c-fos和c-jun mRNA表达显著低于对照组,中剂量LaCl3染毒组egr1 mRNA表达显著低于对照和低剂量LaCl3染毒组,高剂量LaCl3染毒组c-fos、c-jun和egr1 mRNA表达显著低于对照和低、中剂量LaCl3染毒组。结论镧可通过降低海马CA3区CaM活性和CaMK IV、CREB磷酸化以及c-fos、c-jun和egr1基因转录水平,从而损害大鼠的学习记忆能力。 杨敬华 刘秋芳 巫生文 张立丰 齐鸣 鲁帅 蔡原关键词:镧 海马 氯化镧对大鼠星形胶质细胞内质网应激及凋亡的影响 2015年 目的观察氯化镧(LaCl3)对大鼠大脑皮质星形胶质细胞(Ast)中葡糖调节蛋白-94(GRP-94)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白153(GADD153)、半胱天冬蛋白酶-12(caspase-12)表达的影响。方法分别用0、0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3作用Ast细胞24 h,再以四甲基偶氮唑盐法检测Ast细胞活力,以流式细胞仪检测Ast细胞凋亡,以Western blotting法检测Ast细胞GRP-94、PERK、磷酸化PERK(pPERK)、GADD153和caspase-12的水平。结果 0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3染毒后,Ast细胞活力降低,Ast细胞凋亡升高,均呈剂量-效应关系,差异均有统计学意义(P<0.05)。0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3染毒组Ast细胞的GRP-94、pPERK、GADD153、caspase-12水平均高于对照组,其中1.0 mmol/L LaCl3染毒组上述指标分别为对照组的3.10、5.25、2.73、3.14倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 GRP-94、pPERK、GADD153和caspase-12表达上调使凋亡异常增多,其可能是LaCl3对Ast细胞产生毒作用的机制之一。 杨敬华 果威旭 吕丹 巫生文 逯晓波 靳翠红 蔡原关键词:氯化镧 PERK GADD153 镧对星形胶质细胞增殖能力和细胞内钙浓度的影响 被引量:2 2009年 目的观察氯化镧(LaCl3)对原代培养大鼠星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖能力和细胞内游离钙离子浓度的影响。方法AST经0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L LaCl3染毒24 h和48 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞染LaCl3后增殖能力的变化;采用Fura-2/AM为荧光指示剂,F-4500型荧光双波长分光光度计测定细胞内游离钙离子浓度。结果细胞染毒24 h和48 h后,0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L LaCl3剂量组的细胞存活率分别为86.24%和82.99%,82.26%和79.14%,52.32%和49.97%及38.04%和35.15%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);染毒24 h在倒置相差显微镜下观察,与对照组比较,1.0 mmol/L组细胞数量明显减少,胞体呈长梭形,胞突增粗,呈树枝状;2.0 mmol/L组上述改变加重,并可见大量脱壁细胞;在染毒24 h后,0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3剂量组细胞内Ca2+浓度分别为(134.41±0.83)、(163.31±3.97)、(224.84±5.51)nmol/L,显著高于对照组[(129.45±1.09)nmol/L](P<0.05)。结论LaCl3体外染毒可降低AST的增殖能力,其机制可能与其所致的细胞内Ca2+浓度超载有关。 鲁帅 刘秋芳 齐鸣 巫生文 靳翠红 逯晓波 蔡原关键词:镧 星形胶质细胞 细胞培养 生长发育期镧暴露对大鼠大脑皮质内质网应激相关蛋白表达的影响 目的 研究生长发育期镧(La)暴露对大鼠大脑皮质细胞凋亡和内质网应激相关蛋白表达的影响.方法 32只雌性成年Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量La染毒组,与雄性成年Wistar大鼠交配,受孕后分别饮用0%、0.... 杨敬华 刘秋芳 逯晓波 巫生文 靳翠红 蔡原关键词:镧 大脑皮质 内质网 基于体外转染细胞模型研究ERCC2/XPD Lys751Gln多态与短波紫外线所致DNA损伤修复的关联 目的随着全球工业化发展和臭氧层的破坏,紫外线对于环境及人类健康的影响受到广泛重视。紫外线(UV)在自然界由太阳辐射产生,按其波长分为长波紫外线UVA、中波紫外线UVB和短波紫外线UVC。尽管短波紫外线几乎全部被大气层吸收... 逯晓波 关阳阳 靳翠红 杨敬华 巫生文 蔡原放线菌素D对仓鼠成纤维细胞V79靶细胞和旁观者细胞活力和染色体畸变的影响 被引量:1 2012年 目的:观察放线菌素D(actinomycin D,ACTD)对中国仓鼠成纤维细胞V79靶细胞和旁观者细胞的细胞活力和染色体畸变的影响,以确定ACTD能否诱导旁观者效应的发生。方法:用不同剂量ACTD(0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L)处理V79靶细胞1 h,并选择其中4 mg/L ACTD作用1 h开始计时,分别在第4、8、12和24 h时取靶细胞去细胞培养液(conditionedmedium,CM),培养正常细胞24 h后,进行旁观者效应的观察。用MTT法测定靶细胞和旁观者细胞活力;并对靶细胞和旁观者细胞进行染色体畸变分析。结果:随着ACTD剂量的增加,靶细胞的活力下降,存在明显的剂量一效应关系(P<0.05)。4 mg/L ACTD作用1h时细胞活力接近50%且稳定。旁观者细胞活力在用4~12 h CM培养时逐渐增加(P<0.05),用24 h CM时又下降(P<0.05),4 h CM诱导旁观者细胞损伤的作用最强。靶细胞的染色体畸变率随ACTD剂量的增加而增高,具有剂量-效应关系(P<0.05)。旁观者细胞染色体畸变以4 h CM诱导的作用最强,随着加入CM时段的延后,损伤逐渐减轻(P<0.05),在24 h CM又趋严重(P<0.05);旁观者细胞与靶细胞染色体畸变类型相似,以断裂为主,伴有少量环形染色体、碎片和双着丝粒染色体。结论:ACTD可以诱导旁观者效应的发生,染色体畸变在靶细胞和旁观者细胞均以断裂为主。 靳翠红 巫生文 逯晓波 刘秋芳 蔡原 肖云关键词:放线菌素D 条件培养液 旁观者效应 染色体畸变 孕哺期及断乳后氯化镧暴露对大鼠大脑皮质神经细胞钙稳态及Bcl-2蛋白家族和caspase蛋白表达的影响 被引量:6 2016年 目的研究氯化镧对大鼠大脑皮质神经细胞钙稳态、Bcl-2和caspase蛋白表达的影响。方法 32只雌性成年Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量氯化镧组,与雄性成年Wistar大鼠按1∶1比例同笼交配。对照和低、中、高剂量氯化镧组雌性大鼠自受孕起分别饮用以蒸馏水配制的0、2.5、5和10 g/L氯化镧溶液,并哺育其子代大鼠。对照和低、中、高剂量氯化镧组子代大鼠断乳后分别饮用以蒸馏水配制的0、2.5、5和10 g/L氯化镧溶液1个月。采用Fura 2荧光探针法测定子代大鼠大脑皮质神经细胞内Ca^(2+)浓度,以流式细胞仪法测定子代大鼠大脑皮质细胞凋亡率,采用Western blotting法测定子代大鼠大脑皮质Bcl-2、Bax、caspase 3、caspase 8、caspase 9和caspase 12蛋白水平。结果各氯化镧组子代大鼠大脑皮质神经细胞内Ca^(2+)浓度和细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.05),且随氯化镧染毒剂量增加而升高。低、中剂量氯化镧组子代大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白水平低于对照组(P<0.05),而Bax、caspase 3、caspase 9和caspase 12蛋白水平高于对照组(P<0.05);高剂量氯化镧组子代大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白水平低于对照组和低、中剂量氯化镧组(P<0.05),Bax、caspase 3、caspase 9和caspase 12蛋白水平高于对照组和低、中剂量氯化镧组(P<0.05)。然而各氯化镧组caspase 8蛋白水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论氯化镧导致大鼠大脑皮质神经细胞过度凋亡可能与神经细胞钙稳态失衡、Bcl-2表达下降和Bax、caspase 3、caspase 9、caspase 12表达升高有关。 杨敬华 吕丹 孙文昌 巫生文 逯晓波 靳翠红 蔡原关键词:CASPASE