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作品数： 24被引量：20H指数：3

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王金良: 作品数：358被引量：855H指数：13; 供职机构：山东省滨州畜牧兽医研究院; 研究主题：猪瘟病毒原核表达猪流行性腹泻病毒 SYBR_GREEN 无乳链球菌

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山羊副流感病毒3型NP蛋白的截短表达及间接ELISA方法的建立被引量：1: 2020年; 为建立山羊副流感病毒3型ELSIA抗体检测方法,利用DNAStar生物信息学软件对山羊副流感病毒3型NP蛋白抗原区域进行预测,利用Primer 6.0软件设计合成1对引物,通过RT-PCR技术扩增到807 bp基因片段,将其连接到原核表达质粒pET28a(+)中,成功表达了相对分子质量约39000的目的蛋白,以纯化后的蛋白为包被抗原,建立检测山羊副流感病毒3型的ELISA抗体检测方法,并对方法的敏感性、特异性、稳定性进行了验证。结果显示,建立的方法具有敏感性高、特异性强、稳定性好等优点;对送检的745份临床羊血清进行检测,总阳性率为14.5%。本试验建立的间接ELISA检测方法为山羊副流感病毒3型抗体的快速检测及流行病学调查提供了技术支持。; 陈金龙黄兴军郝胜楠张德普王金良王金良; 关键词：NP蛋白截短表达间接ELISA

一种用于畜禽疫病现场检测的专用防尘检测台: 本实用新型涉及一种用于畜禽疫病现场检测的专用防尘检测台，包括桌罩和检测桌，桌罩包括操作面、左侧面、右侧面、后侧面和顶面，操作面与左侧面和右侧面滑动连接，右侧面上安装有移液枪固定架，顶面设有照明装置和通风装置；检测桌的桌面...; 王金良沈志强于新友董林陈金龙; 文献传递

牛型结核分枝杆菌分泌性蛋白MPB70.MPB83基因串联重组质粒的构建及鉴定: 2019年; 目的构建牛型结核分枝杆菌(MB)分泌性蛋白mpb70.mpb83基因串联重组表达质粒,为进--步利用工程菌表达、获得相应抗原蛋白奠定实验基础。方法参考NCBI上公布的MB全基因组序列(EU683972.1),在利用DNAstar7.0生物信息软件分析分泌性蛋白mpb70、mpb83抗原性基础上,选择mpb70、mpb83基因编码多肽主要抗原域,利用重叠延伸PCR技术构建pGEX-6p-mpb70+mpb83串联重组表达质粒。结果生物信息学预测MPB70、MPB83基因的抗原域分别在30-171位氨基酸和20-190位氨基酸。在mpb70、mpb83间加入16位柔性多肽序列,在线分析不影响mpb70和mpb83融合后的抗原性。pGEX-6p-1-mpb70+mpb83经双酶切获得966bp和4966bp两条片段,与预期一致;测序表明mpb70+mpb83融合基因无碱基突变和缺失,重组质粒构建正确。结论确定了MB早期标识性分泌性蛋白mpb70、mpb83基因的抗原域,获得了mpb70、mpb83串联基因,构建的重组原核表达载体柔性多肽的引人确保mpb70和mpb83的天然抗原构象且不影响融合蛋白的抗原性,为重组抗原的表达,单克隆抗体制备以及建立MB分泌性蛋白标识物的快速检测试剂盒奠定了基础。; 叶俊布日额布日额陈金龙锡林高娃王金良; 关键词：结核分枝杆菌

一种畜禽用现地解剖取样箱: 本实用新型公开了一种畜禽用现地解剖取样箱，包括取样箱，所述取样箱的上端通过合页铰接有箱盖，所述第一隔板的上端分别固定安装有医用胶带盒、酒精棉盒和刀具盒，所述取样箱的内壁设置有两组紫外线灯管，两组所述网兜的开口处设置有松紧...; 于新友孟卫芹王金良陈金龙沈志强

一种室温旋转混合器: 本实用新型公开了一种室温旋转混合器，包括混合器本体和插孔定位组件，所述混合器本体包括控制底座、立柱和离心机头，所述离心机头表面环形等距阵列有离心管定位孔，所述离心管定位组件包括定位柱、弹簧组件和夹板，所述弹簧组件固定连接...; 孟卫芹王金良陈金龙沈志强; 文献传递

产气荚膜梭菌α毒素抗体荧光微球免疫层析检测试剂盒及其制备方法: 本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种产气荚膜梭菌α毒素抗体荧光微球免疫层析检测试剂盒及其制备方法。试剂盒至少包括试纸条，试纸条由加样端开始依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；结合垫上喷涂有偶联产气荚膜梭菌α...; 王金良李通孟卫琴陈金龙沈志强马力孙翠平李振伟贾娟

一种B型猪肠道病毒及其应用: 本发明涉及微生物病毒领域，具体的说是一种B型猪肠道病毒及其应用，所述B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV‑B，保藏号为：CGMCC No.10405，命名为Ch‑SDbz‑W2Y以及B型猪肠道...; 王金良沈志强魏凤于新友陈金龙; 文献传递

基于双基因检测非洲猪瘟病毒的PCR引物组、试剂盒及应用: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及基于双基因检测非洲猪瘟病毒的PCR引物组、试剂盒及应用。本发明中的引物组及方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可有效地降低假阳性结果的出现，降低...; 王金良沈志强陈金龙于新友董林胡绍良; 文献传递

一种检测羊伪狂犬病毒抗体的ELISA试剂盒: 本发明涉及动物疫病诊断技术领域，更具体的讲是一种用于检测羊的伪狂犬病毒抗体ELISA试剂盒，本发明提供的ELISA试剂盒包括包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、酶标结合物、20×浓缩洗涤液、底物液、终止液、封口胶、自...; 王金良沈志强董艳凯董炳梅陈金龙魏凤; 文献传递

ETEC菌毛蛋白K88抗体PPA-ELISA检测方法的建立: 以纯化的大肠埃希菌K88菌毛蛋白为包被抗原，建立了检测大肠埃希菌K88 IgG抗体的间接ELISA方法。确定了间接ELISA的最适反应条件，即最佳抗原包被浓度为1μg／mL，兔抗体稀释倍数为1：10，猪抗体稀释倍数为1：...; 李书光李峰苗立中张娜肖跃强陈金龙孙翠平沈志强; 关键词：大肠埃希菌菌毛疫苗免疫抗体检测