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孙建宏
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- 所属机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
- 所在地区:黑龙江省 哈尔滨市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 闫丽辉
- 作品数：75被引量：408H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
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- 曹殿军
- 作品数：97被引量：594H指数：15
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- 研究主题：新城疫病毒 新城疫 F基因 F48E9 NDV
- 刘培欣
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- 研究主题：新城疫病毒 NDV F基因 新城疫 SOTA
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- 2009年
- 研制了禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原,检测了该抗原的效价和特异性,并用该抗原对人工感染鸡沉淀抗体的变化以及现地血清样本进行了检测。结果显示,该抗原不与其他主要禽类病原体阳性血清反应,可与1∶8稀释的禽腺病毒Ⅰ型阳性血清反应。对3月龄SPF鸡进行人工感染后,第7 d可检测到沉淀抗体,血清中的沉淀抗体可持续3个月以上。抗原在-20℃条件下可保存2年。经对现地38个鸡场进行检测,其中阳性场14个,阳性率为36.84%,表明我国的禽腺病毒感染率很高。结果证实,研制的禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原敏感、特异,可用于禽腺病毒感染的血清学检测。
- 智海东解生亮杨志王云峰张宇辉王牟平孙建宏陈洪岩
- 关键词：禽腺病毒感染率
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- 本发明涉及禽流感病毒H9亚型血凝抑制抗原标准物质及制备方法。本标准物质是由禽流感病毒H9亚型CKSH01株病毒经过病毒液的制备与检验；病毒液灭活、浓缩、半成品检验；冻干、成品检验、均一性检验及稳定性检验及标准物质的标定、...
- 孙建宏刘景利胡井雷杨帆王在时韩正博张从禄田国彬
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- 2000年
- 新城疫病毒虽然只有一种血清型，但不同毒株之间毒力和生物学特性差异悬殊，这必然导致它们在致病机理上的差异，在ＮＤ流行中起着重要作用。为了从根本上阐明新城疫的致病和免疫机理，本研究利用我们所建立的能区分ＮＤＶ强弱毒株的ＲＴ－ＰＣＲ方法，对弱毒疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡体内病毒动态分布规律进行了检测和研究。 实验共分为五组：第一组为空白对照组；第二，三组分别为以 ＮＤＶ弱毒株 Ｌａ Ｓｏｔａ、Ｖ４经滴鼻、点眼免疫雏鸡；第四、五组分别为在免疫后２１天，以强毒株Ｆ４８Ｅ９攻毒的实验鸡。在免疫后第１、３、５、８、１２、１６、２１及３０天；攻毒后第１、３、５、８、１２、１５天采集病料（肝脏、十二指肠、肺、食管、法氏囊、气管），检测病毒在各组织中的分布。结果表明，接种Ｌａ Ｓｏｔａ的实验组ＳＰＦ鸡从免疫后第５天开始，可以在肝脏组织中检测出病毒的存在，而Ｖ４组则从第３天开始即可在肝脏组织中检测出病毒的存在；气管组织中从第８天开始可检出病毒；其余几种组织病毒含量极低或不存在病毒分布。用Ｆ４８Ｅ９强毒攻毒后第一天开始就能在肝、肺中能检测出强弱两种病毒，攻毒后第７天开始在食道组织中检出病毒。由上述结果可以看出，自然途径感染（鼻、眼）似乎偏?
- 刘培欣曹殿军闫丽辉孙建宏陈杰曲鲁江
- 关键词：NDV强毒株活疫苗弱毒株弱毒疫苗
- 鸡免疫球蛋白检测技术的发展被引量：14
- 2000年
- 孙建宏曹殿军符芳刘宝全
- 关键词：免疫球蛋白ELISAIPMA
- 禽类IFN-γmRNA表达量检测方法的初步建立被引量：1
- 2004年
- 为了建立检测IFNγmRNA表达量的方法 ,设计 2对用于IFNγ和 1对用于 β actin基因扩增的引物 ,建立可用于IFNγmRNA表达量检测的技术。结果表明 :用RTPCR技术检测 5组免疫鸡和 1组对照鸡外周血单个核细胞发现 ,全病毒和含有全病毒的疫苗比单一肽段进行免疫IFNγmRNA表达量要大的多 。
- 李景荣孙建宏张海峰刘培欣闫丽辉曹殿军冯新畅
- 关键词：禽类表达量RT-PCR疫苗
- 检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法的建立被引量：23
- 2001年
- 本试验以新城疫病毒 (NDV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心 ,庶糖密度梯度离心提纯的NDV为包被抗原 ,以纯化的鸡IgG、IgM及IgA免疫兔 ,制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、IgM及IgA ,分别建立了检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法 ,抗原最适包被量为 1.34μg/孔。酶标兔抗鸡IgG、IgM、IgA的最佳稀释度分别为 1∶40 0 ,1∶40 0 ,1∶10 0 ;血清样品检测IgG时 ,最适工作浓度为 1∶40 0 ,检测IgM时为 1∶5 0。该方法具有特异性强、灵敏度度、快速简便等优点 ,适合于对各类新城疫特异性抗体的动态监测和大批检测 。
- 孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉孔宪刚刘宝全
- 关键词：IGMIGA间接ELISA
- 2004年黑龙江省新城疫病毒分子流行病学分析被引量：10
- 2005年
- 2004年从黑龙江省部分鸡场疑似新城疫(ND)病死鸡和鸽体内分离到9株NDV。对这9株NDV生物学特性进行测定,并对其F基因包括裂解位点在内的540bp片段进行了克隆、测序和同源性分析。结果表明,9株NDV鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)分别在47.8h～78.4h和1.51～2.00之间;8个分离株在F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQKRF117,1个分离株F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQRRF117,表明了它们全为ND中、强毒株。同源性分析显示,9株NDV分离株之间核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为79.7%～99.7%和79.8%～100%;系统发生树分析表明,6株分离株与台湾株(TW98、TW99和TW2000等)遗传距离较近,可能有共同的起源,为基因Ⅶe型NDV,2株为鸽源NDV基因Ⅵ型,1株与我国特有的F48E9遗传距离最近,为基因Ⅸ型NDV。
- 连宏军刘培欣闫丽辉曹殿军孙建宏梁宏志韩正博冉多良
- 关键词：流行病学分析裂解位点氨基酸同源性系统发生树病死鸡鸽源
- 新城疫V_4株免疫和攻毒鸡外分泌物中病毒抗原的检测被引量：1
- 1995年
- 利用间接夹心ELISA对新城疫V4(NDV_4)免疫鸡,免疫攻毒鸡和对照攻毒鸡口腔和泄殖腔内的病毒抗原进行了检测。结果,雏鸡免疫后第2d,口腔内病毒抗原的随机检出率为4/10,泄殖腔内随机检出率很低(0/10),持续18d以上。攻毒后第1d直到第6～8d雏鸡全部死亡时,对照鸡口腔和泄殖腔内均能查到病毒抗原。免疫鸡攻毒后全部保护,没有任何临床症状。攻毒后1d,口腔和泄殖腔内病毒抗原的随机检出率分别是8/10和6/10。第13d,泄殖腔内病毒抗原消失;而此时口腔内病毒抗原检出率仍较高(7/10),可能与鸡群内普遍存在的V4病毒有关。
- 吴保成孙建宏荆汝顶徐振东王曾凤
- 关键词：新城疫V4株抗原鸡病
- 犬脾细胞白介素-18(IL-18)基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2003年
- 为了研究白细胞介素_1 8(IL_1 8)的活性和功能 ,将犬脾细胞经ConA诱导 ,用TRIzol裂解 ,提取总RNA ,通过反转录聚合酶链反应 (RT_PCR)扩增出犬IL_1 8的cDNA ,然后连接到pMD1 8_T载体上 ,转化DH5α感受态细胞 ,获得阳性重组质粒。核苷酸序列结果表明 ,我们得到了长 686bp的基因 ,含有一个 5 82bp的开放阅读框架 ,编码 1 93个氨基酸。与已知犬序列同源性可高达 99.6% ,与已知猪序列的同源性为 89.8% ,所克隆基因为今后进一步研究IL_1 8基因的功能奠定了基础。
- 曹殿军于立辉闫丽辉刘培欣孙建宏杨玉英赵玉军杨国勇
- 关键词：克隆测序
- 间接夹心ELISA检测新城疫病毒抗原被引量：4
- 1994年
- 以ＳＰＦ鸡抗新城疫病毒（ＮＤＶ）ＩｇＧ为包被抗体（５ｕｇ／ｍｌ），兔抗ＮＤＶｖｅｒｏ细胞培养纯化毒ＩｇＧ为第二抗体（１∶２００～６００），酶标记羊抗兔ＩｇＧ（１：５０００）为指示抗体，建立了检测ＮＤＶ的间接夹心ＥＬＩＳＡ，并分别以兔抗ＮＤＶ鸡胚毒纯化ＨＮ糖蛋白，Ｆ糖蛋白ＩｇＧ为第二抗体进行了比较试验，并对攻毒鸡外分泌物样品进行了病原检测．
- 吴保成徐振东孙建宏韩英张宏宇
- 关键词：鸡病新城疫病毒ELISA
