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使用Taqman技术监测慢性粒细胞白血病患者微小残留病灶被引量:1
2014年
目的动态的监测bcr-abl融合基因mRNA表达水平以及评估经格列卫治疗后的慢性粒细胞白血病(CML)患者微小残留病灶。方法荧光定量RT-PCR法(Q-RT-PCR)检测bcr-abl融合基因mRNA表达水平,收集来自广州金域的34例CML患者(包括经格列卫治疗后缓解病人17例,未经治疗病人17例)。CML患者的检测结果与其他良性血液病患者进行比较,并且结合临床表现,得到CML和其它非白血病病人中bcr-abl L表达信息,以及在慢性粒细胞白血病的治疗中微小残留病灶的重要意义。结果在CML病人中bcr-abl融合基因表达阳性率为88.3%(30/34),在其他的良性血液病中无表达。我们也能观察到经格列卫治疗的病人有一定的治疗效果,经格列卫治疗的病人bcr-abl融合基因的表达水平较未经治疗者明显降低(P<0.05)。结论 Q-RT-PCR法是检测慢性粒细胞白血病微小残留病灶的重要方法,BCR-ABL融合基因可以做为CML的分子标志。
赵晶晶王颖张文伟余秀雪姜波梁辉李剑
关键词:慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因微小残留病灶荧光定量PCR
Taqman技术检测儿童HBV DNA载量的临床应用被引量:1
2013年
目的:研究儿童HBV DNA及血清学标志物与乙肝病毒复制的关系,探讨其应用于儿童乙型肝炎患者的临床价值。方法:对190例儿童乙型肝炎患者血清分别采用Taqman技术测定HBV DNA,ELISA法(酶免疫吸附法)检测血清标志物,速率法检测丙氨酸转氨酶(ALT),综合分析并评价其相互关系及临床联合检测的价值。结果:190例患儿HBsAg+、HBeAg+、抗HBc+阳性组125例,HBV DNA检出125例,检出率100%;ALT增高35例,占28%。HBsAg+、抗HBe+、抗HBc+阳性组55例,HBV DNA检出15例,检出率27.3%;ALT增高10例,占18%。HBsAg+、抗HBc+阳性组10例,HBV DNA检出1例,检出率10%。结论:抗HBe阳性组复制水平相对较低,与成人无显著差异,HBVDNA载量与ALT水平高低无相关性,乙肝病毒含量的高低与肝功能受损程度不呈正相关。
杨继清陈丽艳戴万案
关键词:儿童HBV乙肝标志物
利用TaqMan技术定量检测基因表达的引物探针设计被引量:1
2007年
目的建立优化的实时荧光定量PCR的引物探针设计参数。方法设计引物和探针时的原则包括:①上、下游引物的融解温度(Tm值)应尽量相同或相差越小越好,以利于PCR退火温度的优化;②扩增区域应当跨越不同的外显子(在基因组DNA上至少一个以上的内含子),以利于区分基因组DNA扩增产物和cDNA扩增产物;③引物和探针的位置最好位于外显子和内含子交界处,以避免引物和探针与基因组DNA的结合;④扩增区域最好靠近基因的3’端,以减少不完全逆转录的影响。本次研究设计了实时荧光定量RT-PCR检测人甲胎蛋白mRNA的引物和探针,并提取临床肝癌组织标本中的RNA,检测其中甲胎蛋白的表达。结果本次研究设计的实时荧光定量RT-PCR检测甲胎蛋白mRNA的引物和探针具有良好的特异性,可用于临床标本的检测。结论本次研究确定的原则对提高利用TaqMan技术定量检测目的基因结果的可靠性具有很好的指导意义。
张行叶景佳魏群陈萍王琦曹江
关键词:TAQMAN技术基因表达定量PCR
TaqMan技术检测儿童HBV DNA载量的临床应用
乙型肝炎是我国最为常见的感染性疾病之一,目前临床上主要是对成人乙型肝炎患者的HBV DNA与血清标志物研究较多,而专门对儿童乙肝患者进行乙肝病毒DNA与血清标志物的研究则相对较少。为了解儿童乙肝患者HBVDNA载量与乙肝...
杨继青李祚品廖明凤陈丽艳
关键词:TAQMAN技术血清标志物儿童
文献传递
荧光定量Taqman技术在检测乙肝病毒DNA中的应用
2007年
目的:探讨荧光定量Taqman技术检测乙肝病毒(HBV)感染者乙肝病毒脱氧核糖核苷酸(HBV-DNA)的临床意义,以及与乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)的相关性。方法:采用荧光定量Taqman技术对76例乙肝感染者HBV—DNA的检测。结果:在76例标本中,HBV—DNA的阳性率为42.1%,HBsAg的阳性率为75.0%,HBeAg的阳性率为17.1%。结论:HBsAg、HBeAg反映HBV的复制状态存在局限性,HBV-DNA定量检测是反映HBV复制和药物疗效的判断最直接可靠的指标。
陈文谢平陈国千
关键词:乙肝病毒
Taqman技术检测肿瘤细胞中端粒酶逆转录酶信使核糖核酸及表达的意义被引量:7
2004年
目的 用定量Taqman技术检测人端粒酶逆转录酶 (hTERT)信使核糖核酸 (mRNA)以及在肿瘤细胞中表达的意义。方法 在Trizol提取总RNA后 ,将mRNA逆转录成互补脱氧核糖核酸 ,用Taqman技术定量检测hTERTmRNA ,并与经典逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法比较。结果 急性髓细胞白血病患者hTERTmRNA表达水平为 (5 2 9~ 7 3)× 10 4拷贝 / μl,平均 3 5× 10 3 拷贝 / μl,其阳性率 (90 3% )高于健康体检者 (5 6 % ,χ2 =2 9 9,P <0 0 5 ) ,但与经典RT PCR检出阳性率比较 ,差异无显著意义 (χ2 =1 3,P >0 0 5 )。Taqman技术灵敏度为 1 5~ 3拷贝 / μl,特异性为10 0 % ;在 (5 0~ 5 )× 10 8拷贝 / μl之间有良好的线性关系 ,相关系数为 10 0 % ;5 0和 5 0 0 0拷贝 / μl的标本的内变异系数 (CV) 1 7%和 2 0 % ,日间CV则分别为 3 7%和 2 9%。结论 Taqman技术是一种快速有效、灵敏度高、特异性良好的定量检测hTERTmRNA的方法。
李一荣陈凤花王琳王利君胡丽华吴健民
关键词:TAQMAN技术肿瘤细胞端粒酶逆转录酶信使核糖核酸
TaqMan技术快速定量检测血清中人巨细胞病毒的感染
人类巨细胞病毒(HCMV)在人群中感染非常普遍,大多数呈临床不显性感染或潜伏感染.但在免疫力低下的特殊人群,如孕妇、婴幼儿、移植受体、肿瘤患者中,会引起严重后果.它是引起孕妇流产和新生儿先天畸形、发育迟缓的主要病原体.该...
邹俊煊
关键词:人巨细胞病毒TAQMAN
文献传递
Taqman技术检测NG、CT、Uu的临床研究被引量:1
2003年
目的 :评价Taqman技术检测临床标本中主要性病病原体的应用价值。方法 :应用Taqman技术、常规PCR技术及培养法检测 10 0份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本 ,比较三种方法检测淋病奈瑟菌 (NG) ,沙眼衣原体 (CT) ,解脲支原体 (Uu)的灵敏度。 5 0 0份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本同时经Taqman技术及常规PCR技术检测 ,结果不符者使用培养法验证 ,以比较Taqman技术及常规PCR技术的特异性。结果 :在 10 0份临床标本检测中 ,Taqman技术、常规PCR及培养法检出阳性率分别为 4 1% ,35 % ,2 1%。在 5 0 0份送检标本中 ,Taqman技术检出阳性标本 2 0 4份 ,常规PCR检出阳性标本 181份 ,其中结果不符的 4 1份标本经重复培养验证 ,37份与Taqmm技术检测结果相符。结论 :Taqman技术具有良好的敏感性和特异性 ,集PCR扩增、杂交及荧光自动化检测于一体 ,实验过程简便、快速、易于质控 ,是检测性病病原体的有效方法。
杨沛邓少丽陈伟
关键词:荧光光度测定法性传播疾病微生物检验
Taqman技术检测重庆地区2001年度NC、CT、UU的结果分析被引量:4
2003年
目的 :调查 2 0 0 1年度重庆地区淋球菌 (NG)、沙眼衣原体 (CT)、解脲支原体 (UU )感染情况。方法 :用Taqman技术检测 2 6 0 0例重庆地区性病科患者泌尿生殖道标本NG -DNA、CT -DNA、UU -DNA ,观察这三种主要性病病原体的感染率及年龄、性别分布。结果 :在 2 6 0 0份临床标本检测中 ,淋球菌感染率为 11.0 0 %、沙眼支原体感染率为 15 .11%、解脲支原体感染率为 8.2 3% ,CT、UU混合感染率为 1.73%。男性感染者 184 6例 ,女性感染者 75 4例 ,男女患病比例为 2 .5∶1。性传播疾病患者年龄分布从 15岁~ 6 0岁以上不等 ,平均 2 6 .4岁。结论 :重庆地区性传播疾病中以非淋球菌性泌尿生殖道炎为主 ,男性患者多于女性 ,且年龄有年轻化趋势。
张志成邓少丽袁涛
关键词:性传播疾病聚合酶链反应感染率
应用Taqman技术对中国汉族人群HLA-B27进行快速基因分型
目的建立一种快速、灵敏的实时荧光聚合酶链反应(PCR)对中国汉族人群的人白细胞抗原B27(HLA-B27)进行基因分型。方法采用Taqman技术对123例已定型的标本(31例阳性,92例阴性)的HLA-B27 DNA进行...
李一荣胡丽华温晓波曾小倩李归宁周志明
关键词:基因分型TAQMAN聚合酶链反应
文献传递

相关作者

张楚瑜
作品数:107被引量:431H指数:11
供职机构:武汉大学
研究主题:猪瘟病毒 伪狂犬病毒 病毒 猪瘟 猪瘟病毒石门株
胡丽华
作品数:344被引量:1,379H指数:16
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:基因多态性 输血 哮喘 汉族人群 变应性哮喘
游上游
作品数:35被引量:62H指数:5
供职机构:武汉市儿童医院
研究主题:儿童 基因型 人巨细胞病毒 产超广谱Β内酰胺酶 NK细胞
邹俊煊
作品数:6被引量:53H指数:3
供职机构:武汉大学生命科学学院
研究主题:人巨细胞病毒 巨细胞病毒 快速定量检测 TAQMAN技术 猪瘟兔化弱毒苗
李一荣
作品数:160被引量:1,193H指数:11
供职机构:武汉大学中南医院
研究主题:新型冠状病毒 基因多态性 变应性哮喘 HELA细胞 端粒酶