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Omicron病毒S蛋白序列特征分析: 2024年; 采用生信方法,从理化性质、亲疏水性、跨膜区域、信号肽特征、磷酸化位点以及最佳抗原表位,分析Omicron变异株蛋白序列特征并预测其抗体结合位点。结果表明,该变异株S蛋白理论等电点为7.14,亲水性总平均值为-0.080,为低亲水性分泌蛋白,存在128个磷酸化位点,主要的二级结构类型为无规卷曲,抗原表位区域在614~629、770~776范围,获得该病毒S蛋白关键抗体结合位点。; 金会会孙业富郭俊荣; 关键词：S蛋白

靶向新型冠状病毒S蛋白的侵入抑制剂研究进展: 2024年; 由严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)引发的新型冠状病毒感染(COVID-19)给人类生命健康和社会经济发展造成了极为严重的影响。随着病毒的持续变异,现有疫苗和治疗药物效果下降,公共卫生风险仍然存在。因此,亟需开发针对新突变株的新靶点和新机制的药物。S蛋白是SARS-CoV-2重要的表面蛋白,其介导着病毒侵入宿主细胞这一关键步骤,是抗新型冠状病毒入侵的理想靶点。通过对近年来S蛋白抑制剂的研究实例进行分析,对该领域取得的进展进行总结,旨在为抗SARS-CoV-2药物的研发提供参考。; 高恒胡立德张继伟贾惠婻展鹏刘新泳; 关键词：抗病毒药物 S蛋白抑制剂耐药

一种冠状病毒S蛋白RBD糖蛋白的制备方法及其应用: 本发明公开了一种冠状病毒S蛋白RBD糖蛋白的制备方法及其应用。本发明提供了制备具有哺乳动物糖型结构N‑糖链修饰的冠状病毒S蛋白RBD的方法，包括：在经过糖基化修饰途径遗传改造的巴斯德毕赤酵母(甘露糖基化修饰途径缺陷、并重...; 刘波吴军孙鹏王甜甜巩新侯旭宸徐俊杰殷瑛张军罗士强

表达PEDV S蛋白重组PRV的构建与生物学特性评价: 2024年; 将猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)流行毒株的S胞外区基因克隆至含有gG基因上、下游同源臂以及抗性筛选基因的转移质粒pUC-ABK中,构建供体质粒pUC-ABK-S,获得线性同源重组片段AS-K-B。利用Red同源重组技术将线性同源重组片段电转化至含有pPRVBac-GFPTK-gE-gI-11k-28k-的感受态中获得重组pPRVBac-S,最后拯救获得重组病毒rPRV-S。PCR及IFA鉴定结果显示,S胞外区基因成功转录且表达,生物学特性评价结果表明重组病毒能够稳定遗传,为研制猪流行性腹泻病毒活载体疫苗提供了思路。; 侯晓璇穆永王同燕颜世君王孟月谭菲菲田克恭; 关键词：PEDV S蛋白 RED同源重组

抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体的筛选、表达和鉴定: 2024年; 目的筛选特异性抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体序列,表达纯化重组抗SARS-CoV-2纳米抗体,评估其特性及应用潜能。方法基于前期构建的天然噬菌体纳米抗体展示库,以生物素化SARS-CoV-2 S蛋白受体结合结构域抗原为靶点,利用生物素-链霉亲和素液相筛选法、噬菌体-ELISA和测序筛选抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体序列;构建重组抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体表达载体,IPTG诱导表达并纯化,采用SDS-PAGE、Western blot和ELISA分析其特征及应用潜能。结果成功获得2条抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体序列,并构建了相应原核表达菌;成功表达纯化重组抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体,其与SARS-CoV-2 S蛋白可特异性结合。结论筛选及表达的重组抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体为其应用于SARS-CoV-2检测和治疗及相关研究提供基础。; 蒋丹舒纬童李光琪蓝华滔黄倩莹徐广贤

糖尿病合并新型冠状病毒S蛋白感染小鼠病理生理特征: 2024年; 目的建立糖尿病(DM)合并新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染小鼠模型,研究DM合并SARS-CoV-2感染病程发展中的重要病理生理变化。方法将野生型(WT)小鼠和由细胞角蛋白18基因启动子驱动的人血管紧张素转化酶2受体(K18-hACE2,简称hACE2)的转基因小鼠分别随机分为溶剂对照组、DM组、SARS-CoV-2病毒刺突蛋白感染(S)组以及DM合并S蛋白感染(DM+S)组,每组10~12只。除溶剂对照组及S组外,其余组通过10周高脂饮食后连续3 d ip给予链脲佐菌素(STZ)40 mg·kg^(-1)诱导DM症状,溶剂对照组及S组给予等体积0.1 mol·L^(-1)柠檬酸钠缓冲液。在此基础上,S组及DM+S组小鼠经鼻腔滴入15μg SARS-CoV-2 S蛋白与1 g·L^(-1)聚肌胞苷酸(Poly[I:C])的混合溶液50μL,溶剂对照组滴鼻给予等体积无菌水。在高脂喂养第6周和ip给予STZ 1周后,以口服葡萄糖耐量实验评价小鼠糖耐量水平及胰岛β细胞功能。高脂喂养第6周至ip给予STZ 2周后,每周用血糖仪检测小鼠随机血糖及空腹血糖。DM小鼠S蛋白感染前及感染24,48和120 h后,每组取3只小鼠颌下静脉取血后处死并取肺组织,采用苏木精-伊红染色法观察合并S蛋白感染前后的肺组织病理改变。S组小鼠在感染S蛋白前及感染6,24,48,72和120 h后采血,Luminex液相芯片技术检测小鼠血浆细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平,ELISA检测血浆硫酸乙酰肝素(HS)水平;将细胞因子水平、HS水平与小鼠感染S蛋白后的肺部病理损伤程度进行Spearman相关性分析。结果STZ合并高脂饮食可诱导小鼠DM样表现,hACE2-DM组随机血糖(P<0.01)和1周后的空腹血糖(P<0.05)均显著高于WT-DM组,且hACE2-DM小鼠胰岛功能损伤程度显著高于WT-DM小鼠(P<0.05)。与DM组相比,DM+S组小鼠均表现出更严重的肺部病�; 苏小月李静璇林颖张永祥肖智勇周文霞; 关键词：糖尿病硫酸乙酰肝素

猪流行性腹泻病毒S蛋白原核表达及其单克隆抗体制备: 2024年; 本研究以猪流行性腹泻病毒(PEDV)全基因组为模板,利用RT-PCR方法扩增PEDV S基因的亲水区,将其克隆至pMAl-c2E原核表达载体,获得重组质粒pMAl-c2E-PEDV-S。经EcoRⅠ/SalⅠ双酶切测序鉴定后,转化BL21菌,经IPTG诱导,成功表达了约74 kDa的重组蛋白MBP-PEDV-S,亲和层析法纯化重组蛋白。将重组蛋白免疫3只健康的6~8周龄雌性BALB/c小鼠,将小鼠脾脏B淋巴细胞与SP2/0瘤细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,获得了4株能稳定分泌抗PEDV S蛋白抗体的杂交瘤细胞株1B11、1B10、1C8、3L3,其腹水效价都高于1∶100000。获得的4株单克隆抗体与PEDV经IFA和Western blot检测,结果显示均具有良好的反应性。而且3株单克隆抗体重链为IgG2a,1株重链为IgG2b;3株轻链为Kappa,1株轻链为Lambda。本研究表达了PEDV S蛋白并制备了单克隆抗体,为研究S蛋白的结构和功能提供了条件,为揭示PEDV致病机制奠定了基础。; 邱永辉周建卫王潇宇周琳怡侯磊戴贝凝冯旭飞刘爵; 关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白原核表达单克隆抗体

PEDV、TGEV与PDCoV S蛋白表位基因三联疫苗的构建及其鉴定: 2024年; [目的]构建一种同时预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的三联表位疫苗,以预防上述病原导致的猪的相关疾病。[方法]本研究运用免疫信息学在线软件对3种猪肠道冠状病毒(SeCoVs)的S蛋白B、T细胞表位进行预测分析,构建新的表位肽段,命名为PPT,通过ExPASy、VaxiJen、TMHMM、SOPMA、SOLpro和AlphaFlod2等在线软件对PPT进行生物信息学分析,并利用C-IMMSIM在线软件对其免疫反应进行模拟。通过T2A将PPT与PEDV的COE序列、TGEV的SAD序列及PDCoV的CTD序列连接并构建至真核表达载体pEGFP-N1,经PCR和双酶切鉴定正确后,将获得的重组质粒转染HEK293A细胞,经DAPI染色、CCK8、RT-PCR及Western blotting试验验证重组质粒在体外表达情况。[结果]构建的表位蛋白PPT由17条表位肽段组成,经生物信息学软件分析,该蛋白为非跨膜蛋白,结构稳定,具有抗原性和可溶性,亲水性高,无过敏性。C-IMMSIM结果显示,PPT能引起机体树突状细胞(DC)增加,B、T细胞免疫反应,刺激免疫球蛋白IgG、IgM和细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平升高。重组质粒经PCR和双酶切鉴定结果显示,分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp出现特异性目的条带,与预期相符;重组质粒转染HEK293A细胞后,可见绿色荧光;RT-PCR扩增分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp处获得与目的基因大小相符的条带;CCK-8检测结果表明,重组质粒对细胞均无明显毒性作用;Western blotting检测结果显示,分别在31.7、16.1、37.9和27.5 ku处出现与目的蛋白分子质量大小一致的条带,重组质粒成功在HEK293A细胞中表达。[结论]本研究基于计算机软件分析设计的PPT表位蛋白成功构建三联疫苗,且在体外表达,为评价PEDV-TGEV-PDCoV三联表位疫苗的免疫效果提供依据。; 刘青顾天越包利霞朱凡杰王鑫源刘婷婷朱晓琛鄢明华鄢明华王利丽董志民金天明; 关键词：S蛋白表位疫苗

基于适配体开发检测新冠病毒S蛋白的试纸条研究: 近年来,新冠病毒的大流行对公共卫生和人民生命财产安全造成了巨大的威胁和损失,疫情不仅直接影响了世界各地数亿人的身体健康,还在疾病治疗、教育和精神健康方面产生了连锁反应。COVID-19大流行显示出对快速、低成本和现场检测...; 李晓童; 关键词：纳米金适配体试纸条

一种结合沙贝冠状病毒S蛋白RBD结构域的环肽及其应用: 本发明公开了一种结合沙贝冠状病毒S蛋白RBD结构域的环肽及其应用。本发明提供了一种结合沙贝冠状病毒S蛋白RBD结构域的环肽，其结构式如式I所示。本发明对于开发广谱抗新冠病毒药物具有重要意义。<Image file="ZY...; 施一高福王敏杨金月彭齐杨金蕾

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