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牛病毒性腹泻病毒E^(rns)-ELISA抗体检测试剂盒的制备: 2024年; 为建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的血清学方法,本试验以BVDV NADL毒株结构蛋白E^(rns)作为包被抗原,优化反应条件并组装BVDV酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,通过重复性试验、灵敏性试验、符合率试验和保存期试验验证该试剂盒的准确性、灵敏性和稳定性。结果显示,抗原包被浓度为4μg/mL,1%酪蛋白溶液37℃封闭45 min,被检血清以1∶400稀释孵育30 min,兔抗牛HRP标记二抗以1∶20000稀释孵育30 min,TMB底物反应5 min时,ELISA的反应背景下降,区分度最好。优化后方法的批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均在10%以内,表明该试剂盒具有较好的稳定性;灵敏性试验结果显示,当阳性血清稀释度达到1∶6400时仍可以检测为阳性,说明该试剂盒灵敏度较高;该试剂盒与美国爱德士生物科技公司(IDEXX)BVDV总抗体检测试剂盒共同检测466份临床血清样品,两者总符合率为89.1%;保存期试验结果显示,第4个月时该试剂盒仍能检测到阳性血清,说明稳定性较好。综上表明,本试验利用E^(rns)蛋白建立的BVDV间接ELISA抗体检测试剂盒灵敏度高且重复性好,可为BVDV抗体检测和流行性调查提供新的方法。; 王静陈柯源王胜华丁成志杨光辉刘一尹金花王九峰; 关键词：牛病毒性腹泻病毒抗体间接ELISA

BVDV中E^(rns)、N^(pro)蛋白真核表达质粒的构建: 2024年; 目的:试验旨在构建牛病毒性腹泻病毒(BVDV)结构蛋白(糖基化囊膜蛋白E^(rns))和非结构蛋白(N^(pro))重组表达载体,利用哺乳动物真核表达系统对E^(rns)、N^(pro)进行表达.方法:参考GenBank中公布的BVDV参考株核苷酸序列分别设计引物N^(pro)-F/R和E^(rns)-F/R,用BVDV病毒的cDNA进行PCR扩增,将回收纯化的N^(pro)和E^(rns)目的基因和真核表达载体pCMV-Myc进行双酶切.利用琼脂糖凝胶电泳进行回收纯化,将回收纯化产物采用T4 DNA连接酶进行连接并转化至BL-21感受态细胞中,构建真核表达质粒,将重组质粒命名为pCMV-Myc-N^(pro)和pCMV-Myc-E^(rns).双酶切及测序鉴定正确后转染HEK-293细胞,采用PCR及Western blotting检测N^(pro)和E^(rns)在细胞内的表达.结果:pCMV-Myc-N^(pro)和pCMV-Myc-E^(rns)真核表达质粒构建成功,N^(pro)和E^(rns)在HEK293细胞中成功表达.结论:N^(pro)、E^(rns)蛋白的成功表达可为探究蛋白质生物学功能、研究病毒感染机制及研制亚单位疫苗提供理论参考.; 巩转娣裴梦源拜小强袁肇方李殿玉魏锁成; 关键词：牛病毒性腹泻病毒结构蛋白真核表达

猪瘟病毒2型Erns蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株及应用: 本发明属于兽用生物制品领域，本发明公开了一株猪瘟病毒2型Erns蛋白的杂交瘤细胞株9B1，其保藏编号为CCTCC NO：C 202247。该单抗可与CSFV2型Erns蛋白发生...; 方维焕王媛李肖梁许翰坤

开口端子(RNS8): 1.本外观设计产品的名称：开口端子(RNS8)。;2.本外观设计产品的用途：电性连接上接线用的端子。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状。;4.最能表明设计要点的图片或照片：设计1立体图。;5.指定设计1为基本设计。; 杨骏为

NIR-triggered on-site NO/ROS/RNS nanoreactor:Cascade-amplified photodynamic/photothermal therapy with local and systemic immune responses activation: 2024年; Photothermal and photodynamic therapies(PTT/PDT)hold promise for localized tumor treatment,yet their full potential is hampered by limitations such as the hypoxic tumor microenvironment and inadequate systemic immune activation.Addressing these challenges,we present a novel near-infrared(NIR)-triggered RNS nanoreactor(PBNO-Ce6)to amplify the photodynamic and photothermal therapy efficacy against triple-negative breast cancer(TNBC).The designed PBNOCe6 combines sodium nitroprusside-doped Prussian Blue nanoparticles with Chlorin e6 to enable on-site RNS production through NIR-induced concurrent NO release and ROS generation.This not only enhances tumor cell eradication but also potentiates local and systemic antitumor immune responses,protecting mice from tumor rechallenge.Our in vivo evaluations revealed that treatment with PBNO-Ce6 leads to a remarkable 2.7-fold increase in cytotoxic T lymphocytes and a 62%decrease in regulatory T cells in comparison to the control PB-Ce6(Prussian Blue nanoparticles loaded with Chlorin e6),marking a substantial improvement over traditional PTT/PDT.As such,the PBNO-Ce6 nanoreactor represents a transformative approach for improving outcomes in TNBC and potentially other malignancies affected by similar barriers.; Ziqing XuYakun KangJie ZhangJiajia TangHanyao SunYang LiDoudou HeXuan ShaYuxia TangZiyi FuFeiyun WuShouju Wang; 关键词：NANOREACTOR

牛病毒性腹泻病毒E^(rns)蛋白的中华仓鼠卵巢细胞表达及免疫原性分析被引量：2: 2023年; 本研究利用中华仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E^(rns)蛋白,并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL标准毒株基因序列为基础,构建BVDV E^(rns)蛋白重组真核表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E^(rns),转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达。SDS-PAGE分析E^(rns)蛋白的表达和纯化,并用抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清进行Western blotting鉴定纯化蛋白;进一步使用纯化的E^(rns)蛋白免疫新西兰大白兔,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IFA)实验检测血清抗体水平及其免疫反应活性,用病毒中和实验测定免疫兔血清的中和抗体滴度。BCA蛋白定量试剂盒检测纯化的E^(rns)蛋白浓度为0.886 mg/m L,Western blotting结果显示,抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清均能够与纯化的E^(rns)蛋白发生特异性免疫反应。间接ELISA和IFA实验结果显示,一免后第7天血清抗体呈阳性,并持续至免疫后第28天,血清抗体效价水平可达1:128000,且该血清抗体可以与MDBK细胞中感染的BVDV病毒发生特异性免疫反应。重组E^(rns)蛋白免疫兔可诱导动物机体产生病毒中和抗体,中和效价为log10=2.71。本研究利用CHO细胞表达系统成功制备了纯化的BVDV E^(rns)蛋白,并通过体内和体外实验证明,该重组蛋白具有良好的免疫原性,为牛病毒性腹泻(bovine viral diarrhea,BVD)诊断方法及新型亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 李亚军茹毅郝荣增秦晓东卢炳州杨洋刘华南张越龚真莉刘艳红余四九郑海学; 关键词：牛病毒性腹泻病毒真核表达免疫原性

CHO细胞表达牛病毒性腹泻病毒E2-E^(rns)融合蛋白及免疫原性分析被引量：1: 2023年; 本研究旨在利用CHO细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2-E^(rns)融合蛋白,并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL株基因序列为基础,构建融合表达BVDV E2和E^(rns)蛋白的真核重组表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E2-E^(rns),转染CHO细胞,进行上清分泌表达;离心收集细胞培养上清进行亲和层析纯化,通过SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定纯化蛋白的免疫反应性;使用纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔,通过细胞免疫荧光(IFA)试验和间接ELISA试验鉴定E2-E^(rns)融合蛋白免疫家兔血清的抗体反应性和抗体效价。结果,通过CHO细胞表达系统,成功制备了纯化的BVDV E2-E^(rns)融合蛋白,Western-blot鉴定结果显示,His标签单克隆抗体和BVDV阳性血清均能够与纯化的融合蛋白发生特异性免疫反应。间接ELISA和IFA试验结果显示,一免后第7天血清抗体呈阳性,并持续至免疫后第28天,血清抗体效价水平可达1∶512000,且该血清抗体可以与MDBK细胞中感染的BVDV发生特异性免疫反应。上述结果表明,本研究成功利用CHO细胞表达系统制备并纯化了BVDV E2-E^(rns)融合蛋白,并通过体内和体外试验证明该融合蛋白具有良好的免疫原性,为BVD的诊断方法及其新型亚单位疫苗研制奠定了基础。; 李亚军郝荣增茹毅龚真莉刘艳红郑海学; 关键词：免疫原性

同态计算平方根倒数和RNS基转换算法在RNS-CKKS方案下的改进及实现: 安全机器学习在最近备受关注,而求平方根倒数在机器学习中应用广泛,例如向量归一化、聚类等,因此如何安全计算平方根倒数成为一个重要的问题。Panda提出了一种用CKKS同态加密方案进行同态计算平方根倒数的迭代算法,其迭代初值...; 渠宏源; 关键词：有理函数

河南RNS银行营销策略优化研究: 随着金融体制的不断改革以及银行业之间的市场竞争日益加剧,使得农村商业银行面临的市场竞争环境也不断变化,农村商业银行必须深入了解金融消费者的需求,通过营销策略的优化,不断满足金融消费者的需求,才能提高营销能力,进一步提升银...; 张璐璐; 关键词：营销策略问卷调查法

后量子签名算法Falcon的剩余数系统FPGA实现研究: 2023年; 作为后量子签名算法Falcon的核心部件,剩余数系统对算法的密钥生成模块中求解NTRU方程有重大意义。本文介绍了RNS的FPGA实现方法,深入研究其剩余数生成、循环群求逆模块以及剩余数还原模块,提出高效的硬件设计思路与结构,采用并行结构设计算法主体框架,利用循环迭代进行优化,并在芯片上进行综合,给出算法整体改进方案,实现剩余数系统在六轮升降环中的全部的应用,并进一步提高数据量,完成模数生成模块十轮升降环应用的硬件实现,算法整体使用较少的逻辑资源,并在运算速度上有进一步的提升。; 薛莲高献伟田紫珊; 关键词：FPGA

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