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搜索到196篇“ LACZ基因“的相关文章

一种基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统的构建及评价被引量：1: 2021年; 为构建一种具有广泛适用性的原核启动子报告系统,以质粒pFLX107为骨架,通过多克隆位点替换和序列改造,构建出基于lacZ基因和pUC复制子的pFGH系列报告载体,然后以lacZ基因缺失株MC4100为宿主菌筛选背景活性最低的质粒作为最终的报告系统,并利用诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM分别对其进行测试。结果显示,在所构建的pFGH系列质粒中,pFGH06的背景活性显著低于同系列其他质粒,在28℃培养条件下甚至显著低于低拷贝参考质粒pRCL的活性(P<0.01)。进一步的评估测试显示,质粒pFGH06可用于诱导型启动子或组成型启动子的克隆及活性测定,且在模拟应用于启动子筛选时,通过蓝白斑筛选即可实现对目标启动子的完全识别。与已报道的原核启动子报告系统相比,pFGH06具有体积小、克隆位点多、背景活性可调、对启动子筛选识别效率高等优点,具有广泛的应用前景。; 付立霞付立霞韩先干韩先干赖迎迢赖迎迢黄志斌; 关键词：报告基因 Β-半乳糖苷酶定点突变

一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法，包括检测细胞的培养；将检测细胞置于底层胶为LMA，顶层胶为X‑gal、LMA混合液的培养介质中进行培养，观察培养介质中胶色变化，选择胶色...; 杨柳许国洋余远迪牟豪; 文献传递

基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统及其构建方法和应用: 本发明公开基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统，该报告系统包括源自pFLX107的pUC复制子，Cat基因，rrnbT1T2，lambda t0转录终止子，源自质粒pRCL且内部ClaI、SacI和NdeI...; 付立霞徐敬潇杨辉黄志斌龚建森韩先干; 文献传递

基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统及其构建方法和应用: 本发明公开基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统，该报告系统包括源自pFLX107的pUC复制子，Cat基因，rrnbT1T2，lambda t0转录终止子，源自质粒pRCL且内部ClaI、SacI和NdeI...; 付立霞徐敬潇杨辉黄志斌龚建森韩先干; 文献传递

慢病毒介导稳定表达FRT-LacZ基因的MDCK细胞株构建被引量：3: 2016年; [目的]通过慢病毒载体系统获得稳定表达FRT-LacZ基因的MDCK细胞株。[方法]PCR扩增FRT-LacZ基因,亚克隆至慢病毒载体p LVX-PGK-Puro。经四质粒包装系统共转染293FT细胞包装重组慢病毒并检测病毒滴度,获得的慢病毒感染MDCK细胞,经嘌呤霉素筛选和β-半乳糖苷酶原位染色检测筛选鉴定转基因细胞株。[结果]测序证实,成功构建重组慢病毒质粒p LVX-FRT-LacZ-PGK-Puro。包装产生的慢病毒滴度为4.04×107TU/m L,重组慢病毒感染MDCK细胞后筛选获得稳定表达FRT-LacZ基因的MDCK细胞株。[结论]构建了稳定表达FRTLacZ基因的MDCK细胞株。; 谢宝明于国伟令世鑫马忠仁柏家林; 关键词：慢病毒载体 MDCK细胞位点特异性重组

马奶酒样乳杆菌乳糖酶LacZ基因的克隆,原核表达及活性分析: 2016年; 从开菲尔粒（Kefir）中分离出1株马奶酒样乳杆菌（Lactobacillus kefiranofaciens ZW3）,具有较高的乳糖酶活性,以此菌株为材料,从其基因组中克隆得到LacZ型乳糖酶基因,该基因全长2007 bp,编码669个氨基酸。随后将该基因插入原核表达载体pET-32a中转入大肠杆菌BL21（DE3）进行过量表达,获得了其重组蛋白,纯化后分析了该重组蛋白的乳糖水解活性特点。结果显示,此蛋白在50℃,pH 7.0时乳糖水解活力最高,并在30-55℃,pH 5.0-9.0的范围仍能保持50%以上的酶活力,具有良好的工业应用潜力。; 何熹耿伟涛韩宁王艳萍; 关键词：Β-半乳糖苷酶原核表达

筛选化学诱变原的RNR3调控重组LacZ基因酵母细胞的建立被引量：1: 2014年; 目的:建立可筛选化学诱变物的RNR3调控重组Lac Z基因酵母细胞。方法:利用降式PCR技术从酵母基因组中扩增RNR3启动子,将其插入到pMP206/ERE酵母报告载体,构建成RNR3调控的Lac Z酵母报告载体,将该载体转入W303-1A酵母细胞,构建成RNR3调控的重组Lac Z基因酵母细胞。用数种化学诱变原作用于该重组基因酵母细胞,观察其对RNR3的诱导表达。结果:放线菌素D、丝裂霉素C、阿非迪霉素和溴乙锭不能诱导RNR3的表达,而甲磺酸甲脂、瘤可宁、顺铂、4-硝基-N-氧化喹啉、博来霉素、福莱霉素、5-氟尿嘧啶、喜树碱和羟基脲诱变原与RNR3表达有明显的剂量效应关系。结论:该重组酵母可用于对多种化学诱变原的快速筛选。; 王瑞鲲葛宜枝陆益新吴倩倩李湘鸣; 关键词：酵母 Β-半乳糖苷酶 LAC

含LacZ基因重组腺病毒的制备及其在大鼠脊髓中的表达: 目的:神经损伤后的修复仍然是困扰着神经科学基础与临床的一道难关。但由于其自身结构及再生特点,仅依靠外科手术修复断裂神经,其远期结构和功能恢复,尤其是运动功能的恢复难以获得满意的效果。在治疗外周神经损伤的各种方法中,基因治...; 沈朝; 关键词：外周神经损伤腺病毒载体 LACZ基因基因治疗; 文献传递

四环素调控复制缺陷性疱疹病毒载体介导LacZ基因在原代培养神经元中的表达: 2011年; 目的利用四环素调控复制缺陷性单纯疱疹病毒I型重组载体(QR9TO-LacZ)感染体外原代培养的大鼠皮层神经元,探讨其介导半乳糖苷酶(LacZ)基因的表达情况及基因调控效能;并检测该载体对神经元活力的影响。方法用RUL9-8细胞系扩增QR9TO-LacZ病毒株,收集后采用噬斑法测定病毒滴度;体外原代培养大鼠皮层神经元。将培养的原代神经元分为强力霉素(DOX)组和对照组。两组细胞均用QR9TO-LacZ转染,强力霉素组加入四环素衍生物强力霉素(0.5μg/ml),对照组加入等剂量空白对照液。同时根据感染复数(MOI),即MOI=3、5、10、30 PFU/cell,将两组培养细胞进一步分为亚组。病毒转染48h后行X-gal染色;光镜下观察神经元形态,随机选取10个高倍镜视野(×400),计算每高倍镜视野中平均蓝染细胞率,比较不同MOI病毒感染神经元的效率。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测感染病毒48 h(MOI同上)后神经元的活性。结果在含有DOX的培养环境中,不同MOI亚组(3、5、10、30 PFU/cell)QR9TO-LacZ感染神经元出现蓝染细胞百分比分别为5.35%±0.84%、10.64%±1.92%、19.73%±2.87%、34.41%±2.58%;在无DOX的培养环境中,各亚组均未观察到蓝染细胞。上述MOI感染的神经元细胞存活率分别为:90.24%±8.16%、88.00%±5.69%、83.95%±3.82%、78.90%±5.49%。结论 QR9TO-LacZ载体能有效地将目的基因导入原代培养神经元中并表达;目的基因表达的开启受强力霉素调控;QR9TO-LacZ对体外原代培养神经元毒性较低。; 翟登月魏宁朱幼玲吴波娜姜永军朱双根徐格林刘新峰; 关键词：基因调控 LACZ基因神经元

腺病毒介导的LacZ基因在人肝癌细胞HepG2中的表达被引量：1: 2009年; 目的观察腺病毒介导的LacZ基因在人肝癌细胞HepG2中的转染表达效率。方法常规重组腺病毒Ad-LacZ扩增、滴度测定及转染HepG2细胞,并检测细胞表达LacZ的情况。结果当病毒感染繁殖数(MOI)为100时,24小时后接近100%的HepG2细胞被感染并表达LacZ。感染后HepG2细胞的增殖能力无明显异常。结论腺病毒介导的LacZ基因在HepG2细胞中能获得较高的转染效率和有效表达。; 曾云杨颖张建武曹弟勇周春阳; 关键词：肝癌基因转移腺病毒

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