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成年大鼠心房肌细胞分离技术的优化及L型钙电流记录: 2024年; 目的本研究旨在探索并优化一种稳定有效的成年大鼠心房肌细胞分离方法,以便于进行膜片钳电生理实验。方法采用先结扎上腔静脉和肺静脉,随后通过主动脉逆行插管进行Langendorff灌流,使用胶原酶Ⅱ进行约27 min的反复灌流消化,继而从心房组织中剪取心肌组织,在室温下用KB液剪碎并轻轻吹打以分离细胞。随后通过逐步复钙法恢复细胞中的钙离子浓度,并在室温下静置1 h后,进行膜片钳实验。结果成功分离出约(7.5±1.4)×10^(6)(n=6)个原代心房肌细胞,其中绝大多数细胞呈现典型的长杆状形态,并且在外加钙离子浓度恢复至1 mmol/L后,约80%的细胞能够保持其形态稳定。成年大鼠心房肌细胞的动作电位表现为快速复极的尖锐三角形。结论本研究成功建立了一种稳定的成年大鼠心房肌细胞分离技术,为进一步深入研究心房肌细胞的电生理行为提供了可靠的实验材料。; 梁俊卿汤宝鹏沈俊曼则热姆·热杰普郭衍楷张玲; 关键词：心血管病学成年大鼠心房肌细胞膜片钳

炙甘草汤对大鼠心房肌细胞L型钙电流及其动力学特征的影响被引量：4: 2022年; 目的:研究炙甘草汤对大鼠心房肌细胞L型钙电流(I_(Ca-L))及其动力学特征的影响。方法:选取24只大鼠随机分为空白对照组和炙甘草汤低剂量组(1.125 g/mL)、中剂量组(2.25 g/mL)、高剂量组(4.5 g/mL),每组6只。3组药物组大鼠分别按各自浓度给予相同体积的炙甘草汤药液灌胃,对照组大鼠予以等体积生理盐水灌胃。给药1周后利用酶解法对4组大鼠心房肌细胞进行急性分离,用全细胞膜片钳技术记录4组心房肌细胞I_(Ca-L)并比较I-V曲线,选取中剂量组与对照组的心房肌细胞比较I_(Ca-L)通道的动力学特征。结果:与对照组比较,炙甘草汤低、中、高剂量组的大鼠心房肌细胞I_(Ca-L)均发生不同程度的抑制效果,I-V曲线均上移。观察比较中剂量药物组与对照组的I_(Ca-L)通道动力学特征,发现2组细胞的激活曲线和半数激活电压,差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量药物组细胞的稳态失活曲线发生向右偏移,半数失活电压V_(1/2)升高(P<0.05),失活后恢复曲线向下偏移,时间常数(τ)延长(P<0.01)。结论:炙甘草汤能够抑制大鼠心房肌细胞L型钙电流,减慢心房细胞钙通道失活速度,延长失活后恢复的时间,从而起到减慢心率的作用,这可能是炙甘草汤临床上治疗房性心律失常的作用机制。; 郭晟周承志杨波王腾陈玉婷; 关键词：炙甘草汤心房肌细胞 L型钙电流动力学特征膜片钳技术

Piezo1参与高静水压诱导的心房肌细胞L型钙电流下降的机制研究: 目的：探究机械敏感型离子通道Piezo1是否可以在心房肌细胞中发挥机械传导的作用，参与高血压诱导的心房颤动（Atrial fibrillation,AF）及其下游的分子机制。　　方法：（1）左心耳组织（Left atri...; 房媛; 关键词：心房颤动病理机制心房肌细胞

夹竹桃麻素对兔心房肌细胞氧化应激损伤L型钙电流及动作电位时程的影响: 2021年; 背景房颤的发生、发展机制复杂。大量研究表明,氧化应激与房颤关系密切。夹竹桃麻素(apocynin,APO)是氧化应激损伤过程中重要的氧化酶抑制剂,其能够对抗氧化应激的损伤作用。目的探讨夹竹桃麻素对体外兔左心房肌细胞L型钙电流(L-type calcium current,I_(Ca,L))及动作电位时程(action potential duration,APD)氧化应激损伤的保护作用。方法酶解法分离得到单个兔左心房肌细胞,并将其分为5组:对照组(n=13),H_(2)O_(2)(10μmol/L)组(n=13),H_(2)O_(2)(50μmol/L)组(n=13),H_(2)O_(2)(50μmol/L)+APO(100μmol/L)组(n=13),APO(100μmol/L)组(n=13),应用膜片钳全细胞技术,探讨夹竹桃麻素(100μmol/L)对兔左心房肌细胞I_(Ca,L)及APD氧化损伤的保护作用。Western blot检测各组兔左心房中CaV1.2蛋白的表达。RT-qPCR检测兔左心房中的CACNA1C mRNA表达。结果10μmol/L H_(2)O_(2)组:I_(Ca,L)峰值从(−18.5±0.1)pA/pF减至(−10.7±0.7)pA/pF(P<0.01);50μmol/L H_(2)O_(2)组:I_(Ca,L)峰值从(−18.5±0.1)pA/pF减至(−9.4±0.8)pA/pF(P<0.01);50μmol/L H_(2)O_(2)+100μmol/L APO组:I_(Ca,L)峰值为(−16.7±1.6)pA/pF,与50μmol/L H_(2)O_(2)组比较差异有统计学意义(P<0.01);100μmol/L APO组:I_(Ca,L)峰值为(−17.2±1.3)pA/pF,与对照组比较差异无统计学意义。门控机制研究表明,APO的作用主要是通过使稳态激活曲线向负方向移动、稳态失活曲线向正方向移动实现电流恢复,而与电流失活后恢复过程关系不大。进一步,APO使H_(2)O_(2)处理后缩短的APD50得以恢复。与对照组比较,H_(2)O_(2)组CACNA1C mRNA、CaV1.2蛋白表达下降(P<0.05),APO+H_(2)O_(2)组可以使表达恢复(P<0.05)。结论APO对兔左心房肌细胞I_(Ca,L)和APD具有保护作用。; 刘岩刘岩李泱刘昕刘昕单兆亮; 关键词：夹竹桃麻素氧化应激动作电位时程

TNFα对单个大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响: 2019年; 目的探讨TNFα对心肌细胞L型钙电流的影响。方法分离大鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳方法检测TNFα对单个心室肌细胞L型钙电流的影响。结果 TNFα使单个大鼠心室肌细胞L型钙电流持续增强,促进细胞外钙离子持续向细胞内流动。结论 TNFα与感染性休克心脏收缩性改变相关。; 王雪莲谷秋红刘冬妍; 关键词：TNFΑ 心室肌细胞 L型钙电流

血管内皮生长因子165对心肌细胞膜L型钙电流的作用及其对动作电位的影响: 研究背景和目的:　　细胞因子 VEGF(165)是治疗缺血性心脏病和心力衰竭的潜在靶点。研究已证实VEGF165不仅促进形成缺血区域新生血管，还发挥抑制心肌细胞凋亡、减少纤维组织生成以及提高干细胞移植成功率的作用。这些研...; 邢文露; 关键词：心肌细胞电活动血管内皮生长因子 L型钙电流动作电位

成年小鼠心室肌细胞分离及L型钙电流记录被引量：1: 2016年; 目的:寻找一种成年小鼠心肌细胞分离的简便、可行且稳定的方法,以获得耐钙心肌细胞并记录心室肌细胞L型钙电流(IL-Ca)。方法:采用Langerdorff逆行主动脉灌流、无钙台氏液+胶原酶Ⅱ消化法分离成年小鼠单个心室肌细胞;利用含钙细胞外液复钙法筛选耐钙心肌细胞;并采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞L型钙电流。结果:利用该方法分离心肌细胞可获得90%活细胞;复钙后细胞存活率60%-70%;并可记录到典型L型钙电流。结论:无钙台氏液+胶原酶Ⅱ消化法简单可行且稳定,可分离大量活性较佳且耐钙心肌细胞,可用于心肌细胞离子通道电流记录,从而为心脏电生理研究提供有力的技术支持。; 黄燕王鑫王腾唐艳红黄从新; 关键词：成年小鼠心肌细胞全细胞膜片钳 L型钙电流

基于L型钙电流研究益气药干预心衰电生理重构机制: 心力衰竭(心衰,heart failure, HF)是21世纪危害人类健康的重要心血管疾病,心衰患者5年生存率约为50%,其中D期心衰患者恶性心律失常的发生率明显增加,近50%患者死于恶性心律失常所导致的心源性猝死。电生...; 李思耐; 关键词：电生理重构 L型钙电流益气药; 文献传递

神经调节蛋白-1对小鼠心室肌细胞L型钙电流的影响被引量：3: 2015年; 目的观察神经调节蛋白-1(NRG-1)对大鼠心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的影响。方法 C57小鼠取其心脏,经主动脉逆行插管后行Langendorff灌流,以酶解法分离获得单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,记录NRG-1对L型钙电流(ICa-L)的影响。结果 0.05,0.1,0.2μmol/L NRG-1对ICa-L峰电流的抑制率分别为15.3%±2.2%,32.0%±4.7%,52.6%±6.1%(n=6,P<0.05),并使电流-电压曲线上移,激活延迟,失活后恢复时间延长。结论 NRG-1通过延迟钙通道的激活,延长失活后恢复时间,抑制心肌细胞ICa-L。; 张振王鑫王龙王晞熊琼党松来欣段慧楠; 关键词：电生理学神经调节蛋白-1 L型钙电流全细胞膜片钳技术

心肌梗死后抑郁大鼠心室肌细胞L型钙电流的动力学改变被引量：2: 2015年; 目的:观察心肌梗死后抑郁大鼠心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的动力学特性。方法:将60只SD大鼠随机分为4组:正常对照组(n=10),心梗组(n=20),抑郁组(n=10),心梗后抑郁组(n=20)。通过结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,予慢性不可预见性温和刺激建立抑郁模型,利用酶解法分离梗死周边区心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录L型钙电流的变化,研究抑郁对心肌梗死后大鼠心室肌细胞ICa-L的动力学影响。结果:与心梗组比较,心梗后抑郁组的I-V曲线上移,激活曲线右移,并延长失活后恢复时间。结论:抑郁可能通过改变心肌梗死后心室肌细胞L型钙通道的动力学来诱发室性心律失常。; 阮兵梁锦军石少波孙丽芳曲川王腾向晋涛黄鹤杨波; 关键词：心肌梗死抑郁心室肌细胞 L型钙电流膜片钳技术

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