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鸡新城疫病毒内蒙古分离株HN蛋白基因序列比较研究: 本研究用NDV内蒙古不同地区4株分离株(NMHS、NMH2、NMH3、NMB),接种在9～10日龄鸡胚中增值,用HA方法测定增殖后病毒的血凝效价并提取总的RNA,参照GenBank中国内外已经发表的NDV HN蛋白的全基...; 白艳波; 关键词：新城疫病毒 RT-PCR HN基因; 文献传递

鸡新城疫病毒内蒙古毒株HN蛋白基因的序列分析与同源性比较被引量：1: 2010年; 白艳波张七斤; 关键词：鸡新城疫病毒 HN蛋白基因同源性比较神经氨酸酶毒株病毒性传染病

鸭源WF01D株新城疫病毒HN蛋白基因的测序与序列分析: 2009年; 用鸭源WF01D株新城疫病毒接种对9-10日龄SPF鸡胚尿囊腔,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF01D病毒的HN基因,获得了1条约1.8kb的特异性条带。PCR产物回收纯化后测序。测序结果表明,扩增片段大小为1844bp,含有1个1716bp的开放性阅读框,编码571个氨基酸。核苷酸同源性分析表明：WF01D与国内外其他NDV HN基因的同源性为81.2%-95.0%,其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为84.3%,说明WF01D与国内外的传统毒株有较大变异。与Taiwan95株和NL/96株的同源性为93.8%和95.0%,说明WF01D与Taiwan95株和NL/96株亲缘关系较近,具有较高的相似性。; 胡元庆路振香张训海金光明; 关键词：鸭源新城疫病毒 HN基因同源性分析

新城疫病毒TL1株F、HN蛋白基因共表达对细胞融合的影响被引量：3: 2009年; 目的分析新城疫病毒TL1株F、HN蛋白基因共表达对细胞融合的影响。方法在6孔细胞培养板上将4种重组表达质粒以pCI-M+pCI-NP+pCI-F和pCI-M+pCI-NP+pCI-F+pCI-HN两种组合分别共转染BHK-21细胞,转染后48h,光镜观察细胞融合现象。在25cm2细胞培养瓶中,将4种重组表达质粒以上述两种组合分别共转染BHK-21细胞,转染后48h,收集细胞上清,离心后,电镜观察有无病毒样颗粒。结果以pCI-M+pCI-NP+pCI-F+pCI-HN组合共转染BHK-21细胞,可以观察到明显的细胞融合现象,而以pCI-M+pCI-NP+pCI-F组合共转染的BHK-21细胞则未出现细胞融合现象。两种组合共转染均形成了新城疫病毒样颗粒,包含HN蛋白基因的4种重组质粒组合共转染形成的病毒样粒子更接近于真实的新城疫病毒粒子。结论HN蛋白基因具有促进细胞融合的功能,新城疫病毒样颗粒的成功表达为新城疫病毒致病机理和新型疫苗的研究奠定了基础。; 王学理任林柱李晓艳王兴龙; 关键词：新城疫病毒 HN蛋白共表达细胞融合

NA-1株鹅源副粘病毒M、F和HN蛋白基因的真核表达: 2008年; 目的获得鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株M、F和HN基因真核表达蛋白。方法将NA-1株GPMV经SPF鸡胚增殖、纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank登录的NA-1株GPMV基因组序列,设计3对特异性引物,利用RT-PCR法,分别扩增M、F和HN基因开放阅读框(ORF),将目的基因克隆至pMD18-T-Simple载体,并进行酶切和序列测定。将目的片段克隆至pCI-neo表达载体,酶切鉴定正确的重组质粒,分别命名为pCI-M、pCI-F和pCI-HN。将重组表达质粒分别转染Vero细胞,用间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白的表达。结果RT-PCR法分别扩增出M、F和HN基因,大小与预期一致。克隆载体及表达载体酶切及测序鉴定正确;重组真核表达质粒转染Vero细胞后,荧光显微镜下可见特异性荧光。结论利用pCI-neo真核表达载体在Vero细胞中成功表达了NA-1株GPMV M、F和HN基因,为下一步研究该病毒的出芽机制以及各结构蛋白的功能奠定了基础。; 马爱霞袁洁丁壮宣华宋子运徐明; 关键词：鹅源副粘病毒 M基因 HN基因真核表达

鹅副粘病毒WF_(00)G分离株HN蛋白基因的测序与序列分析被引量：1: 2008年; 用鹅副粘病毒凤阳分离株WF00G做9～10日龄SPF鸡胚的尿囊腔接种，成功增殖了该病毒，采用一步法RT-PCR技术扩增WF00G病毒的HN基因，获得了1条约1．8kb的特异性条带。PCR产物回收纯化后测序。测序结果表明，扩增片段大小为1844bp，含有1个1716bp的开放性阅渎框，编码571个氨基酸。核苷酸同源性分析表明：WF00G株与其他12株鹅副牯病毒的同源性为89．9％-99．2％，与国内外其他NDVHN基因的同源性为81．7％～95．7％，其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为84．7％，说明WF00G与国内外的传统毒株有较大变异。与Taiwan95株和NL／96株的同源性为94．3％和95．7％，说明WF00G与Taiwan95株和NL／96株亲缘关系较近，具有较高的相似性。; 胡元庆路振香张训海金光明陈会良; 关键词：鹅源副粘病毒 HN基因同源性分析

血清Ⅰ型鸭源副粘病毒HN蛋白基因的遗传变异及原核表达被引量：12: 2007年; 参考GenBank发表的鹅副粘病毒（GPMV）SF02株基因组核苷酸序列，设计并合成了1对特异性引物，采用RT—PCR技术扩增鸭源血清I型禽副粘病毒DP1／0z株的HN基因，并进行遗传变异及原核表达研究。结果显示，HN基因共1716bp，编码571个氨基酸，存在6个潜在的糖基化位点和13个完全保守的半胱氨酸（C）残基。与GenBank中收录的鹕源副粘病毒HN基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为81．3％～98．3％和87．2％～98．4％，系统进化树分析表明DP／02株与鹅源副粘病毒处于同一进化分支。经SDS—PAGE、Western—blot分析，原核表达的HN蛋白相对分子质量在63000左右，1mol／L（终浓度）IPTG时间梯度诱导，3h时HN蛋白表达量最高，占整个菌体蛋白含量的30％，且能与鼠抗鸭源血清I型禽副粘病毒阳性血清反应。; 刘艳华丁壮常爽毕玉海徐明; 关键词：HN基因原核表达

新城疫病毒TL1株全基因组序列特性分析及HN蛋白基因的促融合表达研究: 为探索新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的致病机理,尽而积极有效地防治该病的发生和流行,本研究首先对新城疫病毒TL1分离株进行了部分生物学特性鉴定,结果显示TL1为强毒株。在此基础上对T...; 王学理; 关键词：新城疫病毒 BHK-21细胞病毒样颗粒; 文献传递

10株新城疫病毒广西分离株HN蛋白基因的克隆与序列分析: 根据基因库(Gene Bank)新城疫病毒(NDV)的HN基因序列设计了2对特异性引物,应用RT-PCR技术对广西在2000-2003年暴发新城疫的鸡群中分离的10株NDV毒株的HN基因进行了扩增,扩增产物克隆并测序,拼...; 刘加波谢芝勋唐小飞庞耀珊邓显文; 关键词：新城疫病毒广西分离株 HN蛋白基因基因克隆; 文献传递

鹅源禽副粘病毒NA-1株HN蛋白基因的遗传变异研究被引量：1: 2006年; 鹅副粘病毒分离株NA-1株经11日龄鸡胚增殖后纯化。提取病毒的基因组RNA,采用RT-PCR扩增出与预期设计的1.7kb大小相符合的特异条带。将扩增产物提纯后克隆入pMD18-T载体,经纯化、筛选及酶切鉴定后,初步获得了含鹅副粘病毒HN基因的阳性克隆,并对阳性克隆进行了测序。测序后拼接得出HN基因的全序列长度为1740bp,该基因的ORF总长为1716bp,编码571个氨基酸。与GenBank下载的15株参考毒株比较HN基因编码区全核苷酸序列,发现所测NA-1株与国内标准强毒株F48E9核苷酸的同源性为84.5%,氨基酸的同源性为89.5%;与传统的疫苗株LaSota核苷酸的同源性为82.2%,氨基酸的同源性为88.5%;与鹅源禽副粘病毒SF02株核苷酸的同源性为97.1%,氨基酸的同源性为97.4%;与鹅源禽副粘病毒YG97株核苷酸的同源性为97.3%,氨基酸的同源性97.4%。说明NA-1株和SF02株、YG97株亲缘关系较近,它们三者可能有着共同的来源。根据基因树分析,NA-1株应属于基因VII型新城疫病毒。由此更进一步证实新城疫可以感染水禽,且对鹅具有高度的致死性。; 王学理武迎红陈丽艳高志刚丁壮; 关键词：HN基因

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