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EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白，体外合成的crRNA和同源重组片段（含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的<I>Et.Actin</I>基因）利用L...; 谷峰程培培

草地贪夜蛾β-Actin基因的原核表达及多克隆抗体制备: 2023年; 草地贪夜蛾是一种重要的农业害虫,其迁飞性强、寄主广、繁殖力高,给我国农业经济带来了严重损失。从分子水平探究草地贪夜蛾生长、发育、繁殖、抗药性形成的内在分子机理,能为虫害的防治、防控提供重要参考。β-Actin作为一种高度保守的看家蛋白常在分子生物学中用作内参去定量目标蛋白的表达水平,因而获得高质量的β-Actin抗体是从事相关分子研究的基本前提。因此,本研究克隆了草地贪夜蛾β-Actin基因部分编码序列,长度为579 bp。利用原核表达系统诱导获得了约37 kD的β-Actin重组蛋白,将纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备得到β-Actin多克隆抗体血清。经ELISA检测,获得的抗血清效价达1∶256000。利用制备的β-Actin抗血清进行Western blot试验,结果显示在42 kD处出现强且单一的蛋白条带,说明制备的β-Actin抗血清能有效识别草地贪夜蛾β-Actin蛋白。综上,本研究制备的β-Actin多克隆抗体效价高、特异性较强,能为草地贪夜蛾后续相关分子研究提供基本条件。; 罗海玲夏顺超卢琴李海银; 关键词：Β-ACTIN 原核表达多克隆抗体

人类源性ACTIN基因核酸电化学探针及其制备方法和用途: 本发明提供一种人类源性ACTIN基因核酸电化学探针及其制备方法和用途，所述探针包含依次串联的特异性结合区、连接区、以及电化学信号结合区，所述特异性结合区为核苷酸链，可与目标基因进行互补配对，所述电化学信号结合区为核苷酸链...; 关国良陈巧玲李琦

EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白，体外合成的crRNA和同源重组片段（含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的Et.Actin基因）利用Lonza 4D...; 谷峰程培培; 文献传递

基于黑尾叶蝉actin基因启动子的昆虫细胞外源蛋白表达载体: 本发明提供基于黑尾叶蝉actin基因启动子的昆虫细胞外源蛋白瞬时表达载体，所述启动子序列如SEQ ID NO.1所示。基于克隆扩增的启动子序列，通过改造pEGFP‑N1载体，成功构建了能够在叶蝉培养细胞系中瞬时表达外源蛋...; 张晓峰魏太云谢云杰王海涛王娟陈红燕; 文献传递

苹果Actin基因片段克隆及序列分析: 2020年; 以红富士苹果叶片为材料,提取总RNA,利用反转录PCR(reverse transcriptase PCR,RT-PCR)技术扩增得到长度约1000 bp的基因片段,对其进行回收、克隆后测序并进行序列分析。结果表明,该基因片段长度为1048 bp,编码348个氨基酸,其核苷酸序列与白梨Actin基因的同源性达99%,与桃、中国李、欧洲甜樱桃、枣4种果树Actin基因的同源性在90%以上,其编码的氨基酸序列与其他植物肌动蛋白的同源性达97%以上,说明克隆得到的片段为苹果Actin基因,具有较高的保守性和同源性。; 秦子禹张向昆王娜项殿芳; 关键词：苹果 ACTIN基因克隆 RT-PCR

基于白纹伊蚊Actin基因参照的登革Ⅱ型病毒一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立: 2020年; 本研究旨在建立一种以白纹伊蚊Actin基因表达量作为参照的登革Ⅱ型病毒一步法实时荧光定量PCR检测技术,为登革病毒在蚊虫中的定量检测提供更准确的检测方法。根据登革Ⅱ型病毒和白纹伊蚊Actin基因保守区序列设计引物和探针,在检测体系中同时加入病毒和Actin基因的特异性引物,计算每个样本中病毒含量与Actin表达量的比值,得到更为准确的定量结果。该方法重复性好、灵敏度高,可用于实验室白纹伊蚊感染登革Ⅱ型病毒的病毒载量检测。; 李超杰姜玉庭张强辉高剑刘源邢丹李春晓张恒端郭晓霞赵彤言; 关键词：白纹伊蚊 ACTIN

甘肃特产药材红芪actin基因片段的克隆及序列分析被引量：1: 2020年; 目的:研究红芪Hedysari Radix次生代谢产物与基因表达的相关性,克隆红芪的肌动蛋白基因(actin)并进行序列分析和定量研究。方法:通过查找GenBank中的其他豆科植物的编码序列(CDS)设计简并引物,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆红芪actin基因的核心片段,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析该基因在不同部位中的稳定性表达。结果:克隆出了长度946 bp的红芪actin基因,其中编码蛋白框855 bp,编码284个氨基酸,经Blast比对序列,红芪的actin基因与甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、花苜蓿Medicago ruthenica(L.)Trautv.、红车轴草Trifolium pratense L.的核苷酸序列同源性分别为95.44%、94.42%、94.20%,氨基酸序列的相似性也高达97%以上,红芪actin基因在根、茎、叶不同部位中的表达量基本稳定。结论:首次在国内成功克隆出了红芪的actin基因,并且证实了该基因可作为红芪其他优良基因表达调控的内参基因,为红芪质量研究提供参考。; 何军刚强正泽马冬妮冯晓莉李成义; 关键词：红芪肌动蛋白基因逆转录-聚合酶链式反应

龙脑樟Actin基因的克隆与序列分析被引量：1: 2019年; 利用同源克隆的方法设计特异性引物,从龙脑樟中获得一个333bp的基因片段,编码110个氨基酸。该片段的蛋白分子量为12.37ku,理论等电点为5.03,平均疏水性(GRAVY)为-0.312,α螺旋、β片层和无规则卷曲的比例分别为40.04%、10.09%和45.87%。同源比对和进化树分析结果都表明,龙脑樟Actin基因与香樟、山鸡椒的Actin基因具有较高的同源性。龙脑樟Actin基因片段的克隆,为深入研究该基因的表达调控及龙脑樟遗传与进化关系提供理论基础。; 张君诚许晓颖邹函卓杨琳; 关键词：龙脑樟 ACTIN基因克隆

山楂Actin基因片段克隆及序列分析被引量：3: 2019年; 依据GenBank中已知的蔷薇科梨属Actin基因的保守序列设计1对特异性引物,以山楂叶片总DNA和总RNA为模板,分别利用PCR和RT-PCR技术从山楂中克隆得到Actin基因的DNA片段和cDNA片段,测序得到山楂Actin基因DNA片段长度为1 578 bp,cDNA片段长度为1 005 bp,编码334个氨基酸。生物信息学软件分析表明,该核苷酸序列与苹果、梨、桃的Actin基因同源性较高,分别为98%,97%,95%,而编码的氨基酸序列与苹果、梨、桃则完全相同,属间具有很好的保守性。试验克隆得到的基因为山楂Actin基因,命名为CpActin。进化树分析结果进一步表明,该Actin序列与苹果、梨、桃和草莓等亲缘关系最近;半定量RT-PCR结果显示,CpActin在山楂的叶片、花柱和花粉中能够稳定表达,可作为山楂的内参基因。; 马聚泽吕换男王海静李晓颍刘建珍张立彬武军凯; 关键词：山楂肌动蛋白克隆

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