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一种白眉蝮蛇降纤酶HPLC检测方法及应用
本发明涉及生化检测技术领域,具体公开了一种白眉蝮蛇降纤酶HPLC检测方法及应用。本发明的HPLC检测方法中,采用流动相A、流动相B和流动相C进行洗脱;所述流动相A为:20‑25mM的磷酸二氢钠的水溶液,所述磷酸二氢钠的水...
白淑敏栾美丽齐硕马胜楠梁丽娜
口服尖吻蝮蛇毒降纤酶对大鼠纤维蛋白原的影响
2024年
目的:探讨尖吻蝮蛇毒降纤酶(DF)灌胃给药后在SD大鼠胃肠道内的分布情况及对血浆纤维蛋白原浓度的变化情况。方法:SD大鼠灌胃尖吻蝮蛇毒DF后观察大鼠体征,检测DF对大鼠的急性毒性作用;采用免疫组织化学法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测尖吻蝮蛇毒DF在大鼠胃肠道组织中的分布情况及其与大鼠纤维蛋白原的量效关系和时效关系。结果:灌胃尖吻蝮蛇毒DF(1000 U/kg)后大鼠未出现明显的中毒反应,DF口服毒性很低;大鼠灌胃DF 3 h后,DF主要存在于十二指肠、胃和空肠组织内;在量效关系实验中,大鼠灌胃DF(200 U/kg)后纤维蛋白原水平显著低于对照组(P<0.05);在时效关系实验中,灌胃第5、第6、第7天的纤维蛋白原水平显著低于对照组(P<0.05),并呈时间和剂量依赖关系。结论:口服尖吻蝮蛇毒DF可以通过胃肠道黏膜吸收进入胃、十二指肠、空肠组织内;口服适量DF可以有效降低大鼠体内的纤维蛋白原水平,连续给药效果更为显著。
陶秀珍张学荣廖明李牡艳孔露平张昊罗小玲
关键词:尖吻蝮蛇毒降纤酶纤维蛋白原口服给药
明胶类酶活保护剂的制备方法及其在降纤酶制剂中的应用
本发明涉及一种明胶类酶活保护剂的制备方法及其在降纤酶制剂中的应用,所述制备方法包括如下步骤:对明胶溶液进行物理剪切,然后过滤、灭菌、冻干,得到所述明胶类酶活保护剂。本发明提供的明胶类酶活保护剂不仅能够对降纤酶的酶活力提供...
张庆宇
尖吻蝮蛇蛇毒降纤酶的分离纯化及其经直肠给药的实验研究
2024年
目的:通过层析法从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化降纤酶,探索降纤酶经直肠给药进入血液循环而降低体内纤维蛋白原水平的可行性。方法:从尖吻蝮蛇蛇毒粗毒中分离降纤酶,经小鼠直肠给药后动物成像观察降纤酶在小鼠脏器中的分布,病理学检测降纤酶对组织的影响,质谱测定小鼠血浆成分,ELISA检测血浆纤维蛋白原水平。结果:尖吻蝮蛇蛇毒粗毒分离纯化获得电泳纯的降纤酶,经直肠给药后其安全性高,无急性毒性反应,直肠组织无明显病理改变。免疫组化结果显示降纤酶分布于直肠组织中(P<0.01),Shotgun质谱测得给药1 h后小鼠血浆存在降纤酶片段,动物成像显示给药3 h后染料标记的降纤酶分子分布大量分布于盲肠组织中,并随时间的延长其含量逐步减少。降纤酶经直肠给药能降低体内纤维蛋白原水平(P<0.01)。结论:尖吻蝮蛇蛇毒粗毒经二步层析法分离获得电泳纯的降纤酶;降纤酶可经直肠给药后吸收进入血液循环并降低体内纤维蛋白原水平。
孔露平廖明张学荣周怡张昊胡少聪肖曼琪张子彦罗小玲
关键词:降纤酶尖吻蝮蛇蛇毒直肠给药分离纯化
一种降纤酶的制备方法
本发明属于提取物制备技术领域,具体是涉及一种降纤酶的制备方法,包括如下步骤:将含有蛇毒的原料进行阴离子交换层析,疏水层析和金属螯合亲和层析,每次层析后进行浓缩,处理,得到降纤酶,所述阴离子交换层析的次数为至少2次;本申请...
刘达马晓宁刘选李多娇杨世平蔡小涛李波向岳辉刘坤康璐刘雄杰张静刘娟
降纤酶关键质量属性研究
2023年
目的:通过对降纤酶鉴别、纯度、分子量、等电点、N端序列、比活性6个方面关键质量属性的表征,为后续标准提高提供依据。方法:采用SDS-PAGE电泳法分析不同来源的蛇毒原料;采用紫外-可见分光光度法、SDS-PAGE电泳法、体积排阻色谱和反相超高效液相色谱法、基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法、等电聚焦电泳法、“edman”N端测序法以及凝固法和生色底物法对不同企业提供的降纤酶进行测定和分析。结果:不同来源的尖吻蝮蛇蛇毒蛋白组成基本一致,尖吻蝮蛇蛇毒和白眉蝮蛇蛇毒蛋白质组成差异较大。降纤酶对苯甲酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐最大吸收波长为247 nm,对苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐最大吸收波长为254 nm,但对苯甲酰-DL-精氨酰对硝基苯胺无水解作用。降纤酶能完全水解纤维蛋白原α肽链,活性受到苯甲基磺酰氟、二硫苏糖醇和对氨基苯甲醚的抑制。尺寸排阻高效液相色谱法降纤酶纯度测定结果高于反向超高效液相色谱法,前者为99.9%,后者为95.4%。SDS-PAGE电泳法测降纤酶完整分子量受标准品线性范围的影响,采用10~250 kDa范围的标准品点拟合,降纤酶完整分子量为(42.1±1.6)kDa;采用10~100 kDa范围的标准品点拟合,降纤酶分子量为(38.4±1.3)kDa。MALDI-TOF-MS法测得降纤酶完整分子量为(33.3±0.5)kDa,脱糖基分子量为(28.8±0.02)kDa。降纤酶pI值在3.0~4.0之间,N端序列为VIGGVECDINEHRFL。凝固法和生色底物法测比活性相关性显著(P<0.01),但凝固法结果高于生色底物法。结论:不同企业提供的降纤酶的6个方面的关键质量属性基本一致。现行降纤酶药品国家标准中鉴别、纯度、分子量等项目有待进一步增修订。
邹剑李炯李炯杨金亮杨蕾马晶袁月
关键词:尖吻蝮蛇白眉蝮蛇蛇毒降纤酶SDS-PAGE电泳等电点
一种从蛇毒粉中提取降纤酶的方法
本发明涉及一种从蛇毒粉中提取降纤酶的方法,包括如下步骤:1)蛇毒粉用缓冲液溶解,去沉淀,得清液;2)离子交换层析:用Tris‑HCl缓冲液和含NaCl的Tris‑HCl缓冲液进行梯度洗脱,收集酶活性部分,超滤浓缩,得浓缩...
刘达刘杨刘选李多娇杨世平蔡小涛李波向岳辉刘坤康璐刘雄杰陈达张静刘娟
一种提取降纤酶用的恒温磁力搅拌装置
本实用新型公开了一种提取降纤酶用的恒温磁力搅拌装置,涉及到新型搅拌技术领域,包括搅拌器壳体,所述搅拌器壳体内壁的下表面固定连接有电磁铁,所述搅拌器壳体内壁的下方固定连接有隔板,所述搅拌器壳体上表面的中心处固定连接有安装壳...
赵爱军郜金财王建庚孙同仁张沛
一种从蛇毒中提取降纤酶的柱层析装置
本发明提供了一种从蛇毒中提取降纤酶的柱层析装置,涉及蛇毒加工技术领域,包括:底座、滑动部分、推动部分、提取部分、防护部分和辅助部分;所述底座放置在地面上。因连接座为环形结构,连接座外壁与后侧一个防护座的内壁前端面接触;伸...
赵爱军郜金财王建庚孙同仁张沛
降纤酶治疗对脑血栓形成急性期患者神经功能及预后的影响被引量:1
2023年
目的 探讨脑血栓形成急性期患者采用降纤酶治疗的临床效果。方法 收集南阳市中心医院2021年1月至2021年12月脑血栓形成急性期患者的临床资料,采用随机数字表法将90例研究对象分为两组,其中45例给予常规治疗的患者收入对照组,其余45例在常规治疗基础上联合降纤酶治疗的患者收入研究组,比较两组治疗效果。结果 两组治疗前神经功能评分和日常生活能力评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组神经功能评分低于治疗前,日常生活能力评分高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);研究组治疗后神经功能评分低于对照组,日常生活能力评分则高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前生活质量4个维度评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组评分高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);研究组治疗后评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组治疗有效率(88.89%)高出对照组(71.11%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FG)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组FG低于治疗前,PT高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);研究组治疗后FG低于对照组,PT高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 降纤酶治疗不仅可以有效调节脑血栓形成急性期患者的纤维蛋白原水平,增加凝血酶时间,还有助于改善神经功能,在提高患者日常生活能力和生活质量的同时对患者的预后转归有着积极影响。
刘瑞
关键词:脑血栓形成急性期降纤酶治疗神经功能纤维蛋白原

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作品数:274被引量:1,004H指数:17
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研究主题:脑缺血 慢性脑缺血 PU 星形胶质细胞 降纤酶