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重组{2}-35及其制备方法和应用
本申请涉及生物医药技术领域,特别涉及一种重组{2}‑35及其制备方法和应用。该重组{2}‑35具有{2}‑35生物活性,为第一融合多肽和第二融合多肽的异二聚体;自N端至C端,所述第一融合多肽包括SEQ ...
王建刚 张凯跃 胡祥维 韩倩 乔磊 郑彬彬 吴明远
重组{2}-35及其制备方法和应用
本申请涉及生物医药技术领域,特别涉及一种重组{2}‑35及其制备方法和应用。该重组{2}‑35具有{2}‑35生物活性,为第一融合多肽和第二融合多肽的异二聚体;自N端至C端,所述第一融合多肽包括SEQ ...
王建刚 张凯跃 胡祥维 韩倩 乔磊 郑彬彬 吴明远
重组{2}-1受体拮抗剂卡那霉素抗性菌种的构建、表达、纯化及质量鉴定
2024年
目的构建卡那霉素抗性的重组{2}-1受体拮抗剂(recombinant human interleukin-1 receptor antagonist,rhIL-1Ra)菌种,并进行rhIL-1Ra蛋的表达、纯化及质量鉴定,以降低β-内酰胺抗生素带来的风险。方法分别以氨苄抗性的质粒rhIL-1Ra(A-rhIL-1Ra)、pET-28a为模板,进行PCR扩增,获得线性化载体和卡那霉素基因片段,经同源重组构建卡那霉素抗性的质粒rhIL-1Ra(K-rhIL-1Ra),测序正确后转化E.coli BL21(DE3),构建重组工程菌,经IPTG诱导表达后,进行CM Bestarose Fast Flow、DEAE Bestarose Fast Flow两步柱层析纯化。收集纯化产物,15%SDSPAGE、分子排阻高效液相色谱法(size-exclusion high-performance liquid chromatography,SEC-HPLC)、反相高效液相色谱法(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)检测纯度,串联质谱法检测质谱相对分子质量,Western blot法鉴定特异性,报告基因法检测生物学活性,液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)法分析比对产品相关杂质。结果经菌落PCR及测序鉴定证明质粒K-rhIL-1Ra构建正确。表达的K-rhIL-1Ra蛋相对分子质量约17000,主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋的30%以上;两步纯化的K-rhIL-1Ra蛋纯度分别为97%和99%,单体含量分别为99.33%和100%,色谱纯度分别为91.86%和96.96%,质谱相对分子质量与标准品(A-rhIL-1Ra蛋)一致,可与小鼠抗IL-1Ra单抗发生特异性反应;纯化的K-rhIL-1Ra蛋生物学活性为1.29×10^(5)U/mg,相关蛋化学修饰类型与标准品(A-rhIL-1Ra蛋)一致。结论成功构建了K-rhIL-1Ra菌种,表达并纯化后的蛋符合rhIL-1Ra的特征和质量标准,为rhIL-1Ra菌种变更及可比性研究奠定了基础。
殷婷婷朱秋媚张宇王江林王明军曲玲玲朱翯顾笑宇刘景会富锐丽刘玉林
关键词:同源重组抗性基因
重组{2}-1受体拮抗剂制剂和沉淀中相关蛋化学修饰类型的鉴定
2024年
目的 鉴定重组{2}-1受体拮抗剂(recombinant human interleukin-1 receptor antagonist,rhIL-1Ra)制剂和室温加速获得的制剂沉淀中相关蛋的化学修饰类型。方法 利用反相高效液相色谱(reverse phase-high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)对rhIL-1Ra制剂和室温加速获得的制剂沉淀进行相关蛋检测,并按面积归一化法确定相关蛋的百分比;再用液质联用质谱法对rhIL-1Ra制剂和室温加速获得的制剂沉淀进行相关蛋的鉴定。结果 RP-HPLC结果显示,rhIL-1Ra制剂中有6个相关蛋色谱峰,所占百分比依次为0.414%、0.870%、0.871%、0.304%、0.104%、1.182%,rhIL-1Ra室温加速获得的沉淀中有5个相关蛋色谱峰,所占百分比依次为0.350%、3.603%、1.118%、0.629%、0.866%。液质联用结果显示,rhIL-1Ra制剂6个相关蛋色谱峰化学修饰类型分别为甲硫氨酸氧化、天冬氨酸脱水环化+甲硫氨酸氧化、甲硫氨酸氧化、甲硫氨酸氧化、天冬氨酸脱水环化、天冬氨酸脱水环化;rhIL-1Ra室温加速获得的沉淀中5个相关蛋色谱峰化学修饰类型分别为甲硫氨酸氧化、天冬氨酸脱水环化+甲硫氨酸氧化、以甲硫氨酸氧化为主、以天冬氨酸脱水环化+甲硫氨酸氧化为主、以天冬氨酸脱水环化为主。结论 rhIL-1Ra制剂和室温加速获得的制剂沉淀的相关蛋修饰类型相同,主要存在3种:甲硫氨酸氧化修饰、天冬氨酸脱水环化、天冬氨酸脱水环化+甲硫氨酸氧化,本研究为提高rhIL-1Ra制剂的质量提供了参考。
殷婷婷朱秋媚刘冰莹张宇刘莹刘景会刘玉林
关键词:氧化修饰
长效化重组{2}2融合蛋及其制备方法和应用
本发明公开了白细胞介素2血清{2}蛋{2}的融合蛋{2},通过将带有白细胞介素2血清{2}蛋{2}融合基因的质粒电转至CHO细胞中,获得稳定、高效表达重组蛋{2}的CHO单克隆细胞株。本发明的单克隆细胞株可分泌表达白细胞介素2血...
李自强田新生成健伟马荣姜彦静孙艺萍张小锐赵婷婷张筠
重组{2}-11对恶性实体瘤患者化疗所致血小板减少症一级预防的有效性和安全性
2023年
目的探讨重组{2}-11(rhIL-11)对恶性实体瘤患者化疗所致血小板减少症(CIT)一级预防的有效性和安全性。方法采用随机数字表法将88例恶性实体瘤化疗患者分为观察组和对照组,每组44例,观察组患者应用rhIL-11一级预防CIT,对照组患者应用安慰剂。比较两组患者CIT发生率、血小板(PLT)变化情况、化疗相关不良事件发生情况、PLT输注情况、rhIL-11相关不良反应发生情况。结果一级预防后,两组患者CIT总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者Ⅲ~Ⅳ级CIT发生率为2.27%,低于对照组患者的18.18%,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗第14、20天,观察组患者PLT水平均高于对照组(P<0.05)。至化疗第20天,观察组患者化疗相关不良事件总发生率为11.36%,低于对照组患者的29.55%,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者PLT输注率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。应用rhIL-11后,观察组5例患者出现了轻微的不良反应,对症治疗后症状消失,未停用rhIL-11。结论应用rhIL-11对恶性实体瘤CIT高出血风险和有危险因素的中出血风险群进行一级预防,可减轻CIT严重程度,减少化疗相关不良事件,rhIL-11相关不良反应轻且易纠正,建议应用于临床。
常丽孙素芹任宏张良边楠楠甄春英庞有铨关雪晴刘雪梅
关键词:重组人白细胞介素-11实体瘤
注射用重组{2}-11致急性心力衰竭1例及文献复习
2022年
1病历摘要患者男,65岁,因“发现贫血两年余,血三系下降半月余”于2020年8月3日入院。入院前半月,外院查血常规:WBC 2.82×10^(9)/L,中性粒细胞计数1.32×10^(9)/L,Hb 49g/L,平均红细胞体积101.8 fL,PLT 55×10^(9)/L,予输红细胞等处理后,Hb有所上升,但WBC和PLT仍在持续下降。
徐郭涵余红芳谢先泽
关键词:急性心力衰竭骨髓增生异常综合征
重组{2}-11对免疫性血小板减少症的治疗及疗效观察分析
2022年
分析重组{2}-11在免疫性血小板减少症治疗中的应用价值。方法:本次从我院当中选取免疫性血小板减少症70例,入组本院当中的住院患者,为其实施单双号法分组,研究组采取重组{2}-11结合对症治疗,参照组采取常规治疗,对比两组疗效指标、不良反应发生率、血小板计数水平。结果:研究组疗效指标相比于参照组,研究组治疗有效率明显更高(P<0.05);治疗前,研究组血小板计数对比参照组,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,研究组血小板计数相比于参照组更高,两组对比具备统计学意义(P<0.05);研究组血小板恢复时间、输注量优于参照组(P<0.05);研究组不良反应数少于参照组,存在对比意义(P<0.05)。结论:重组{2}-11治疗免疫性血小板减少症效果显著,安全性较高。
谢杨
关键词:免疫性血小板减少症血小板计数重组人白细胞介素-11
重组{2}2+保妇康栓治疗HPV感染性宫颈炎的作用评估
2022年
目的:研讨重组{2}2+保妇康栓治疗HPV感染性宫颈炎的作用。方法:随机抽取本院92例(2018年1月至2019年1月)HPV感染性宫颈炎患者开展研究,按照电脑随机法分为两组,A组(46例)采用保妇康栓进行治疗,B组(46例)在A组的基础上联合使用重组{2}2进行治疗。然后对比两组患者的临床指标[时间指标:异常分泌物持续时间、阴道出血时间、创面愈合时间;炎症指标:{2}-6(IL-6)、超敏C-反应蛋(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和治疗效果以及不良反应的发生情况。结果:治疗后,B组患者的临床指标优于A组,B组患者治疗效果高于A组,B组患者不良反应的发生情况低于A组,P<0.05。结论:对HPV感染性宫颈炎的患者,应用重组{2}2联合保妇康栓治疗,可有效改善患者的临床指标,治疗效果显著。
顾苒苒
关键词:重组人白细胞介素2保妇康栓
重组{2}35(rhIL-35)通过抑制NF-κB通路减轻川崎病的冠状动脉内皮细胞损害被引量:1
2022年
目的探究重组{2}35(rhIL-35)对川崎病(KD)冠脉损害的保护作用及其作用机制。方法采用体外培养的冠状动脉内皮细胞(HCAEC)建立KD血管模型,利用肿瘤坏死因子α(TNF-α)及KD患者血清刺激HCAEC以模拟KD的局部炎性病变。将细胞分为对照组、TNF-α及KD血清刺激组、(25、50)ng/mL rhIL-35处理组,CCK-8法检测细胞增殖活性,实时定量PCR检测HCAEC的IL-1β、IL-6、IL-17A、闭锁小带蛋1(ZO-1)mRNA水平,ELISA检测KD患儿血浆IL-35水平及HCAEC上清液IL-1β、IL-6、IL-17A含量,Western blot法检测核因子κB p65(NF-κB p65)及ZO-1的表达。结果TNF-α及KD血清处理抑制HCAEC增殖,rhIL-35则明显逆转以上作用;rhIL-35预保护细胞后可明显下调IL-1β、IL-6及IL-17A的表达;与TNF-α及KD血清刺激组相比,rhIL-35预处理细胞后可明显增高ZO-1蛋的表达,抑制NF-κB p65的高表达。结论rhIL-35能够通过抑制NF-κB通路减轻KD的冠状动脉内皮细胞损害。
田正周忠杨艳娟李洁滢胡琳焦蓉

相关作者

郝静
作品数:29被引量:80H指数:5
供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所
研究主题:RHIL-11 急性放射病 造血因子 猕猴 急性辐射损伤
娄丹
作品数:5被引量:2H指数:1
供职机构:中国人民解放军沈阳军区后勤部军事医学研究所
研究主题:重组人白细胞介素2 重组白细胞介素2 复性 工程菌 LAK
曹军宁
作品数:44被引量:243H指数:9
供职机构:复旦大学上海医学院肿瘤学系
研究主题:非霍奇金淋巴瘤 弥漫大B细胞淋巴瘤 恶性淋巴瘤 药物疗法 弥漫性大B细胞淋巴瘤
杨祥菊
作品数:2被引量:0H指数:0
供职机构:河南省医学科学研究所
研究主题:重组人白细胞介素 抑瘤率 病理组织学 血常规 肝功能
夏薇
作品数:30被引量:192H指数:8
供职机构:河南省医学科学研究所
研究主题:小鼠 葛根总黄酮 药理 白细胞减少 硫普罗宁