[目的]建立检测重组乙肝疫苗(汉逊酵母)纯度的高效液相色谱法(HPLC)。[方法]采用TSK gel G5000PW色谱柱,优化流动相、流速、柱温及p H等参数,确定最佳试验条件;并与TSK gel G3000SW色谱柱检测乙肝纯度的方法进行比较。[结果]确定了最佳试验条件:流动相为0.01 mmol/L PB(磷酸缓冲液),流速为0.6 m L/min,柱温为室温(20℃),p H为7.0,检测波长280 nm;乙肝表面抗原(HBs Ag)在色谱柱TSK gel G5000PW和TSK gel G3000SW的保留时间分别为8.5 min、17.5 min;检测时间分别为20 min、40 min。[结论]建立的HPLC方法专属性、重复性良好,更省时、高效,可用于HBs Ag的纯度检测。
目的评价昌平区146名新生儿全程接种10μg重组乙肝疫苗(hepatitis B vaccine,HepB)5年后的免疫效果及其影响因素。方法应用队列研究的方法,选用10μg重组汉逊酵母HepB,按照"0-1-6"月龄免疫程序完成3剂次初免的新生儿,并在接种第3剂次后和5年后分别采集静脉血,用同样方法检测,计算抗体阳性率和几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)。通过logistic回归分析抗体阳性率的影响因素。结果随访儿童感染率为0,5年抗-HBs(hepatitis B surface antibody,抗-HBs)阳性率为79.45%,GMT为37.41 mIU/mL,5年抗-HBs水平与初免抗-HBs水平呈正相关(r=0.406,P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,调查对象5年抗-HBs抗体阳性率呈初免高应答儿童高于中低应答儿童(OR=2.24,95%CI:1.07~4.65)、出生6个月时能坐稳儿童高于不能坐稳者(OR=3.10,95%CI:1.19~8.09)。结论新生儿接种10μg重组HepB 5年后抗-HBs依然有较高水平。
