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一种酪氨酸磷酸化多肽富集方法及其应用
本发明涉及一种酪氨酸磷酸化多肽富集方法及其应用,所述富集方法包括:将蛋白样本与DTT、IAM混合孵育;将烷基化处理后的蛋白样本与磁珠混合孵育,进行磁分离后与酶混合,收集多肽样本;将多肽样本与SH2‑琼脂糖珠混合孵育,离心...
肖云郑乃中李梦林胡祎瑶侯俊杰贾伟靳凤姣
一种酪氨酸磷酸化多肽富集方法及其应用
本发明涉及一种酪氨酸磷酸化多肽富集方法及其应用,所述富集方法包括:将蛋白样本与DTT、IAM混合孵育;将烷基化处理后的蛋白样本与磁珠混合孵育,进行磁分离后与酶混合,收集多肽样本;将多肽样本与SH2‑琼脂糖珠混合孵育,离心...
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一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用
本发明公开了一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用。所述方法包括:将含酪氨酸磷酸化肽段的样品与偶联有SH2超亲体的固相在容器中混合,所述容器的底部以聚醚砜膜作为支撑筛板;清洗所述固相,从所述固相上分离所述酪氨酸磷酸化肽段...
郑乃中李梦林侯俊杰贾伟刘怡刘子娟
一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用
本发明公开了一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用。所述方法包括:将含酪氨酸磷酸化肽段的样品与偶联有SH2超亲体的固相在容器中混合,所述容器的底部以聚醚砜膜作为支撑筛板;清洗所述固相,从所述固相上分离所述酪氨酸磷酸化肽段...
郑乃中李梦林侯俊杰贾伟刘怡刘子娟
核酸免疫识别的机制和功能及酪氨酸磷酸化修饰调控
2024年
核酸天然免疫识别是一种普遍存在且高度保守的免疫应答机制,负责监测和响应病原体入侵或组织损伤,进而在宿主防御、自身免疫反应、细胞命运决定以及肿瘤发生发展中发挥关键作用。酪氨酸磷酸化作为一类主要的蛋白质翻译后修饰机制,在核酸识别通路中发挥重要调控功能。其中,介导核酸免疫识别通路的核心成员环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)、干扰素基因刺激因子(STING)以及TANK结合激酶1(TBK1)等蛋白均受到酪氨酸磷酸化修饰引发的活性调控,进而影响生理或病理条件下宿主的抗病毒防御和抗肿瘤免疫能力。本文综述了酪氨酸激酶和酪氨酸磷酸化修饰在核酸免疫识别中的调控作用及研究现状,讨论了靶向酪氨酸磷酸化在抗肿瘤免疫中的功能和潜在应用,以期为理解并拓展全新的抗肿瘤手段提供思路。
刘盛铎徐平龙
关键词:天然免疫酪氨酸磷酸化酪氨酸激酶
应用于原代T细胞酪氨酸磷酸化蛋白质组的高灵敏度分析方法
2024年
酪氨酸磷酸化在T细胞的信号转导过程中发挥着重要的作用,然而其丰度较低,鉴定困难。生物组织样本中分离获得的原代T细胞数量较少,培养和扩增的难度较大,因而常使用永生化细胞系来研究T细胞的酪氨酸磷酸化介导的信号转导过程,这通常会导致获得与原代T细胞相差较大的结论。因此,本研究发展了一种解析原代T细胞酪氨酸磷酸化修饰信号的高灵敏度的蛋白质组学方法。首先,针对原代T细胞数量有限的问题,本研究优化了一套从小鼠脾脏中分离、活化和扩增T细胞的完整流程,第4天时T细胞数量扩增到7倍以上;其次,针对酪氨酸磷酸化修饰丰度较低、不易被质谱检测的难题,本研究利用SH2超亲体(SH2-superbinder)亲和富集和固定化钛离子亲和色谱(Ti^(4+)-IMAC)技术对抗CD3和抗CD28单克隆抗体共刺激条件下的原代T细胞多肽样品进行了酪氨酸磷酸化多肽富集,并结合纳升液相色谱-串联质谱(nanoLC-MS/MS)进行解析。最终成功从1 mg蛋白质中鉴定到282个酪氨酸磷酸化位点,其中包含T细胞受体膜蛋白CD3胞内区的免疫受体酪氨酸激活序列(ITAM)上的多个酪氨酸磷酸化位点,以及信号转导相关蛋白ZAP70、LAT、VAV1等的重要位点信息。综上,本研究发展了一套深度解析原代T细胞中的酪氨酸磷酸化修饰的高灵敏度蛋白质组学分析流程,有望应用于绘制更接近生理状态下的信号转导网络。
梁富超柯弥田瑞军
关键词:酪氨酸磷酸化共刺激信号转导
前列腺异性酸性磷酸酶或/和ATG14的酪氨酸磷酸化抑制剂在前列腺癌中的应用
本发明属于抗肿瘤技术领域,具体涉及一种前列腺异性酸性磷酸酶或/和ATG14的酪氨酸磷酸化抑制剂在前列腺癌中的应用。前列腺异性酸性磷酸酶或/和ATG14的酪氨酸磷酸化抑制剂在制备预防或治疗前列腺癌或去势抵抗前列腺癌药物中的...
杨博宇常铭谕吕竟成戴伊凝
一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用
本发明提供了一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用,所述方法包括:(1)采用胰蛋白酶酶切酪氨酸,获得酪氨酸磷酸化肽段;(2)依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行高温处理和蒸干后复溶;或依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行...
刘怡李梦林侯俊杰郑乃中贾伟刘文涛
一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用
本发明提供了一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用,所述方法包括:(1)采用胰蛋白酶酶切酪氨酸,获得酪氨酸磷酸化肽段;(2)依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行高温处理和蒸干后复溶;或依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行...
刘怡李梦林侯俊杰郑乃中贾伟刘文涛
染料分子在检测酪氨酸磷酸化肽和监测蛋白激酶活性中应用
本发明提供了一种荧光探针用于无标记、多功能、低成本和高通量的酪氨酸磷酸化实时监测。我们设计的荧光分子,其在水溶液中可以特异性结合铜离子导致荧光淬灭,在淬灭后的体系中加入酪氨酸残基被磷酸化的底物肽后会引起荧光的剧烈变化,并...
卿光焱常永新

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张光毅
作品数:187被引量:462H指数:10
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作品数:280被引量:127H指数:7
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作品数:218被引量:2,659H指数:25
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刘义
作品数:61被引量:420H指数:12
供职机构:华中科技大学同济医学院附属协和医院
研究主题:多囊卵巢综合征 多囊卵巢综合征患者 胰岛素抵抗 子宫内膜异位症 瘦素
侯筱宇
作品数:48被引量:88H指数:5
供职机构:徐州医学院
研究主题:PSD-95 脑缺血 真核表达 酪氨酸磷酸化 再灌注