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一种无内毒素大体积质粒DNA的自动化提取方法及试剂盒
本申请涉及质粒提取的技术领域,具体涉及一种无内毒素大体积质粒DNA的自动化提取方法及试剂盒。本申请提供的试剂盒采用独特分离作用的磁珠吸附技术和缓冲体系,采用特殊修饰的蛋白结合磁珠,可以吸附内毒素和蛋白杂质;采用内毒素去除...
关绚丽邹爱兰高玉洁刘玉方李晓晨孙克非
质粒DNA的提取
用于对细菌细胞进行碱性裂解、中和以及澄清,以提取质粒DNA的方法、系统和一次性混合袋的用途。所述方法包括提供细菌细胞的悬浮液并将碱性裂解溶液提供到一次性混合袋中,用于对所述细菌细胞进行碱性裂解,其中所述一次性混合袋包括集...
H·布罗姆M·皮特肯宁L·哈格曼A·莫里森
一种质粒DNA的分离纯化方法
本发明涉及一种质粒DNA的分离纯化方法。该分离纯化方法包括以下步骤:(1)含目的质粒的菌体裂解液经过滤得到含目的质粒的菌体裂解上清液;(2)将含目的质粒的菌体裂解上清液经膜浓缩后换液得到粗提溶液;(3)将粗提溶液依次通过...
许美玲杨薇柯尊阳肖瑶李晨刘梦洁任科云叶炜梁华胡坤坤左静彭木
质粒DNA纯化方法及试剂盒
本发明涉及核酸纯化技术领域,尤其是涉及质粒DNA纯化方法及试剂盒。使用本发明提供的质粒DNA纯化试剂盒及对应纯化方法得到的超螺旋质粒DNA纯度可高达90%以上,宿主细胞RNA<0.2%,宿主细胞DNA<1%,...
居维艳吴宗圣
一种大规模提取质粒DNA的方法
本发明涉及一种大规模提取质粒DNA的方法,包括以下步骤:1)在发酵后的含有质粒DNA的大肠杆菌菌液中加入缓冲液A,得到裂解后的大肠杆菌菌液,所述缓冲液A包括Tris溶液、EDTA‑2Na.2H<Sub>2</Sub>O溶...
潘安龙刘丹聂稳稳郭丽丽
一种质粒DNA定点突变的方法及其应用
本发明公开了一种质粒DNA定点突变的方法及其应用,具体步骤为:(1)设计一对引物,使得突变后的碱基位于正向引物的5’端;(2)使用T4Taq酶对引物进行磷酸化;(3)使用Q5高保真酶,以质粒DNA为模板,进行PCR扩增,...
马媛媛薛鹏赵新元周一帆郑东南
一种提取质粒DNA的试剂盒及方法
本发明一种提取质粒DNA的试剂盒及方法。包括:细菌悬浮液,所述细菌悬浮液包括三羟甲基氨基甲烷及EDTA;细胞裂解液,所述细胞裂解液包括强碱及十二烷基硫酸钠;蛋白沉淀液,所述蛋白沉淀液包括盐酸胍、醋酸钾及乙酸;漂洗液,所述...
刘俊张钦蔺佩佩杨宇静罗光宇
一种植物种子的质粒DNA递送方法
本发明公开了一种植物种子的质粒DNA递送方法,属于DNA递送技术领域。该递送方法包括以下步骤:将氧化石墨烯作为质粒DNA载体,将质粒DNA递送到植物种子中;其中,氧化石墨烯为梭形,并具有沿长轴的纵向裂缝,长径比为7‑10...
蒋城 李鑫雨
质粒DNA Fast NGS测序方法的开发和应用
2024年
质粒DNA是最常用的基因运载工具,在基因合成技术中扮演着至关重要的角色。如何实现合成质粒DNA的准确且快速检测,是确保基因组完整性和提高基因合成效率的关键。尽管基于一代DNA的测序方法,其准确性已成为行业标准,但在检测通量、检测速度和检测成本等方面仍然存在局限性,这促使科学家们不断寻求新的解决方案。基于生物酶库,开发了DNA建库酶TN5,建立了高通量质粒DNA检测方案——Fast NGS。利用不同长度、不同质量的质粒DNA样本评估了Fast NGS的可行性,并对质粒DNA样本进行了高通量测序,最后对比了Fast NGS与Sanger测序的效率。结果表明,DNA建库酶TN5蛋白的纯度和质量符合二代测序要求。Fast NGS适用于3~8 kb基因合成质粒的测序检测,其检测通量高达2500个·12 h-1,测序成功率超过95%,测序准确性与一代测序相当,并且无明显序列偏好性。Fast NGS实现了质粒DNA的高通量、快速且低成本检测,为基因合成技术的发展提供了新的方向。
宋辉曹文刚肖晓文杜军
关键词:质粒DNA高通量测序
用于提取细菌中质粒DNA的气泡发生装置
本发明公开了一种用于提取细菌中的质粒DNA的气泡发生装置,包括箱体,所述箱体的一端设有进料口,所述箱体的另一端设有液体收集口;所述箱体内设有至少一个气泡发生组件和固液相分离器,所述气泡发生组件用于充分混合混合液,并将其中...
吴宗圣杨鸿凯何悦张璐楠程鑫俞庆龄董爱华

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隋丽
作品数:108被引量:147H指数:7
供职机构:中国原子能科学研究院
研究主题:质粒DNA 重离子 DNA损伤 质子 辐照
倪嵋楠
作品数:48被引量:107H指数:6
供职机构:中国原子能科学研究院核物理研究所
研究主题:质粒DNA 原子力显微镜 重离子 DNA损伤 重离子辐照
赵葵
作品数:100被引量:173H指数:8
供职机构:中国原子能科学研究院
研究主题:重离子 质粒DNA DNA损伤 原子力显微镜 Γ射线
李妍
作品数:65被引量:69H指数:5
供职机构:上海市计量测试技术研究院
研究主题:标准物质 实时荧光PCR 实时荧光PCR检测 多核苷酸 试剂盒
许丽
作品数:84被引量:74H指数:6
供职机构:上海市计量测试技术研究院
研究主题:标准物质 试剂盒 实时荧光PCR 实时荧光PCR检测 多核苷酸