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一种促进WSSV感染的腺苷三磷酸酶H+转运辅助蛋白2的基因及其应用: 本发明涉及一种促进WSSV感染的腺苷三磷酸酶H+转运辅助蛋白2的基因及其应用，编码促进WSSV感染的腺苷三磷酸酶H+转运辅助蛋白2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，促进...; 刘海鹏孟凡娟刘灵珂葛迪

非洲猪瘟病毒D1133L蛋白腺苷三磷酸酶活性的测定被引量：1: 2022年; 为测定非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L蛋白的腺苷三磷酸酶活性,首先原核表达和纯化了D1133L蛋白。然后,利用Kinase-Glo Plus Luminescent Kinase Assay Platform试剂盒优化了反应条件,建立了D1133L蛋白腺苷三磷酸酶活性的测定方法,测定了D1133L蛋白腺苷三磷酸酶活性。结果显示,在25μL的反应体系中,当蛋白浓度为1.8μmol/L,Cu^(2+)浓度为10 mmol/L,37℃反应70 min时D1133L蛋白具有最佳腺苷三磷酸酶活性,可水解体系中40.04%的腺苷三磷酸。本结果为进一步明确D1133L功能,揭示其解旋机制和靶向D1133L解旋活性的高通量化学药物筛选奠定了基础。; 崔卉梅张婷杨博杨金柯赵登率袁兴国陈学辉郝雨闫文倩张克山张克山刘霞郑海学; 关键词：非洲猪瘟病毒腺苷三磷酸酶活性测定

一种用于检测烟草腺苷三磷酸酶的单克隆抗体及其应用: 一种烟草腺苷三磷酸酶的单克隆抗体，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.2所示的CDR1的氨基酸序列GYSITSGYY，SEQ ID NO.4所示的CDR2的氨基酸序列ISYDGSN和SEQ ID NO...; 陈穗云廖菊够陶柯良魏雪梅; 文献传递

腺苷三磷酸酶抑制剂(-)-Blebbistatin 对间充质干细胞与受损心肌细胞间膜纳米管的形成和功能的影响: 2019年; 目的:探讨腺苷三磷酸酶(ATPase)抑制剂(-)-Blebbistatin对间充质干细胞(MSCs)和缺氧/复氧受损的心肌细胞(CMs)间膜纳米管(TNTs)的形成和功能的影响,为干细胞移植治疗缺血性心脏病奠定基础。方法:乳小鼠CMs培养2天后,缺氧刺激2 h,细胞复氧同时加入等量的MSCs共培养16 h。缺氧/复氧刺激后的CMs分为对照组和Blebbistatin处理组,Blebbistatin组用(-)-Blebbistatin处理8 h后固定。利用细胞免疫荧光染色技术观察对照组和Blebbistatin组MSCs和受损CMs间膜纳米管形成数量和线粒体在膜纳米管中存在的变化;将缺氧/复氧刺激后的CMs分为干细胞共培养组、Transwell培养组和Blebbistatin组,利用高内涵定量Tunnel染色结果研究与干细胞共培养、Transwell培养以及(-)-Blebbistatin刺激对受损CMs凋亡的影响。结果:免疫荧光染色技术结果显示ATPase抑制剂(-)-Blebbistatin使细胞间膜纳米管形成的数量显著增多[(9±1)vs.(19±3),P<0.05],同时发现Blebbistatin组含有线粒体的膜纳米管的比例显著降低[(57.17±2.35)%vs.(35.17±3.21)%,P<0.001];高内涵定量Tunnel染色结果显示与MSCs共培养,受损CMs凋亡率显著降低[(3.39±0.40)%vs.(1.29±0.28)%,P<0.05],而Transwell培养或(-)-Blebbistatin刺激显著削弱干细胞这种抗凋亡作用[(1.29±0.28)%vs.(2.35±0.48)%vs.(2.98±0.71)%,P<0.05]。结论:ATP参与了MSCs与受损CMs间膜纳米管的形成和膜纳米管传输线粒体缓解受损CMs的凋亡。; 张江晖辛毅赵丽敏刘飒崔巍; 关键词：间充质干细胞

铝染毒对大鼠血清腺苷三磷酸酶活性的影响: 2018年; [目的]研究铝染毒对大鼠糖代谢相关指标及腺苷三磷酸酶活性的影响,探讨铝影响机体糖代谢的可能机制。[方法]60只SPF级Wistar雄性大鼠用随机数字表法按体重随机分成4组,即空白对照组和低、中、高剂量染毒组,每组15只。染毒组每组分别给予AlCl3溶液以2、4、8 mg/(kg·d)AlCl3溶液进行腹腔注射,对照组给予腹腔注射等体积生理盐水(2 mL/只)。每天注射1次,全程共30 d。于第10、20、30天每组取5只大鼠检测空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平,分光光度法检测血清Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性。[结果]随着时间延长,铝染毒大鼠食欲减退,进食量减少,精神萎靡,体重增长缓慢。FBG在各时点的中剂量组、高剂量组均高于对照组(P<0.05)。FINS于第10、20天的高剂量组高于对照组,在第30天反而低于对照组(P<0.05)。第10、20天,中、高剂量组胰岛素抵抗指数均高于对照组(P<0.05);第30天,低剂量组、中剂量组明显高于对照组(P<0.05)。第20和30天,中、高剂量组胰岛β细胞功能指数明显低于对照组(P<0.05)。Na+-K+-ATPase在各时点的中、高剂量组均低于对照组(P<0.05),Ca2+-Mg2+-ATPase在各时点的高剂量组均低于对照组(P<0.05)。[结论]铝染毒可能通过降低腺苷三磷酸酶活性,减弱机体血糖调节能力。; 韦喜韦华韦华李东杨现莉林尔兵吴标良; 关键词：铝腺苷三磷酸酶糖代谢

棉蚜腺苷三磷酸酶E亚基基因RNAi载体的构建及其抗蚜性分析被引量：8: 2018年; 【目的】棉蚜(Aphis gossypii)是棉花主要害虫之一,严重危害棉花的生产。利用靶标昆虫重要基因的双链RNA进行干涉从而防治农业害虫是当今发展的1种新技术。通过转基因的方法,在棉花中表达棉蚜靶标基因的双链RNA(Double stranded RNA,dsRNA),特异性地抑制棉蚜内源基因的表达,从而控制蚜虫对棉花的危害。【方法】本研究利用棉蚜腺苷三磷酸酶E亚基(Adenosine triphosphatase subunit E,ATPase E)基因,构建其RNA干扰载体,并通过农杆菌介导转化棉花。PCR技术初步筛查45个独立转化植株,对PCR阳性植株进行DNA印迹(Southern blot)分析,确认外源基因插入的拷贝数。同时利用RT-PCR (Reverse transcription polymerase chain reaction)方法检测dsRNA的表达情况。最后结合网棚和大田抗蚜性鉴定分析转基因株系的抗蚜效果。【结果】从45个转基因再生植株中获得22株阳性转基因株,其中12株为单拷贝插入。根据农艺性状和dsRNA表达量分析结果,筛选出4个转基因株系,分别为CZ1、CZ2、CZ3和CZ4。2年的网棚和大田的蚜虫抗性鉴定结果表明:转基因棉花CZ1、CZ2和CZ3具有较高的抗蚜性,2015年和2016年的蚜害减退率分别达70%和60%以上。【结论】利用RNAi技术将蚜虫腺苷三磷酸酶E亚基基因片段转化棉花,可以提高棉花的抗蚜性,为棉花抗蚜育种提供了新种质和新方法。; 罗晓丽张安红肖娟丽王志安陈晓英吴家和; 关键词：棉花棉蚜 RNAI 抗蚜性

大鲵蛙病毒编码96L蛋白(ADRV-96L)的腺苷三磷酸酶活性和促进细胞生长作用被引量：9: 2018年; 【背景】腺苷三磷酸酶(ATPase,ATP酶)是控制DNA复制起始及宿主对病原微生物的应答开关。近期关于水生动物虹彩病毒基因组学的研究表明,它们共享编码ATPase的基因。【目的】大鲵蛙病毒(Andrias davidianus ranavirus,ADRV)属于虹彩病毒科,是世界现存最大两栖动物——中国大鲵的致死性病毒病原体。为了鉴定病毒基因及其表达产物对病毒复制和宿主细胞的影响,对ADRV编码ATPase的基因ADRV-96L进行了克隆、表达及功能分析,阐明这个虹彩病毒核心基因的功能。【方法】采用Predic Protein软件分析序列,构建重组原核表达质粒p ET32a/His ADRV-96L,经IPTG(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导在大肠杆菌DE3中表达蛋白,用镍树脂纯化和咪唑液洗脱。钼蓝分光光度法检测产生的无机磷(Pi)以确定纯化ADRV-96L的ATPase活性。建立表达蛋白的稳定转染细胞系并进行鉴定,再分别通过绘制病毒的一步生长曲线和评估转染细胞的生长速率来测定该蛋白对病毒复制及细胞生长的影响。【结果】多重序列比对显示ADRV-96L存在含Walker A和Walker B基序的AAA-ATPase(ATPases associated with a variety of cellular activities,与各种细胞活性相关的ATPase)结构域(20-159位氨基酸)及两个高度保守的精氨酸。重组原核质粒表达了含ADRV-96L的52 k D融合蛋白,该蛋白质具有ATPase活性(酶的比活性平均为4.68 U/mg)。结果未检出ADRV-96L对病毒的复制影响,但显示该蛋白可促细胞生长。【结论】大鲵蛙病毒96L基因(ADRV-96L)编码一个促细胞增殖和生长的ATPase。; 张锐张奇亚; 关键词：病毒基因腺苷三磷酸酶酶活性细胞生长

大鼠严重烧伤后心肌组织溶酶体液泡型腺苷三磷酸酶活性变化对心肌损害的影响及其机制被引量：5: 2017年; 目的探讨大鼠严重烧伤后心肌组织溶酶体液泡型ATP（V－ATP）酶活性变化对心肌损害的影响及其机制。方法取12只SD大鼠心脏，采用超高速梯度密度离心法提取心肌组织溶酶体，蛋白质印迹法和透射电镜观察鉴定。将120只SD大鼠按随机数字表法分为单纯烧伤组、ATP组、正常对照组、巴佛洛霉素组，每组30只。单纯烧伤组和ATP组大鼠造成背部约40%TBSA Ⅲ度烫伤，单纯烧伤组大鼠伤后即刻腹腔注射乳酸林格液4 mL·%TBSA^－1·kg^－1，ATP组大鼠分别于伤前12 h、伤后即刻、伤后12 h腹腔注射ATP 0.4 mg/kg。正常对照组大鼠不行任何处理，巴佛洛霉素组与ATP组大鼠同时相点腹腔注射巴佛洛霉素A1 0.3 mg/kg。于伤后24 h，提取各组大鼠心肌组织溶酶体，采用酶偶联分析法检测V－ATP酶活性，蛋白质印迹法检测心肌自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）和P62的表达。取左心室动脉血检测心肌酶谱5项和心肌肌钙蛋白T（cTnT）的含量。对数据行单因素方差分析、t检验。结果（1）经鉴定，样品溶酶体相关膜蛋白1表达水平最高，溶酶体纯度高、结构完整。（2）伤后24 h，单纯烧伤组、ATP组、正常对照组、巴佛洛霉素组大鼠心肌组织溶酶体V－ATP酶活性分别为（2.03±0.67）、（3.01±0.58）、（4.29±0.26）、（1.83±0.52）μmol·mg－1·h－1。其中单纯烧伤组大鼠心肌组织溶酶体V－ATP酶活性明显低于ATP组和正常对照组（t值分别为3.14和8.87，P值均小于0.01），正常对照组大鼠心肌组织溶酶体V－ATP酶活性明显高于巴佛洛霉素组（t＝11.87，P〈0.01）。伤后24 h，单纯烧伤组大鼠心肌LC3和P62的表达显著高于ATP组和正常对照组（t值为3.73～5.88，P值均小于0.01），正常对照组大鼠心肌LC3和P62的表达明显低于巴佛洛霉素组（t值分别为2.64和3.07，P〈0.05或P〈0.01）。伤后24 h，单纯烧伤组大鼠心肌酶谱5�; 闫雪萍张东霞闫甜甜张琼贾杰只黄跃生

宫颈非典型增生和宫颈癌中的Na+、K+腺苷三磷酸酶表达: 本公开内容提供通过检测Na+、K+-腺苷三磷酸酶表达来诊断宫颈非典型增生或宫颈癌的方法。例如，本文说明了：相对于正常宫颈组织，宫颈非典型增生或宫颈癌中的Na+</Su...; 西罗阿基·尼他托马斯·M·格鲁根菲利普·米勒; 文献传递

两个推测的染色质重塑腺苷三磷酸酶基因功能冗余地调控拟南芥种子和胚胎发育被引量：2: 2012年; 种子及胚胎发育是被子植物个体发育的重要起始阶段,相关调控基因的阐明将有助于认识种子及胚胎发育的分子机制。预测同源基因CHR12和CHR23编码拟南芥依赖于ATP的染色质重塑核心组分——腺苷三磷酸酶。T-DNA插入缺失突变体鉴定、遗传杂交及转基因实验表明,两个基因同时缺失阻滞种子的正常发育;胚胎发育进程显微观察表明,与野生型及各自单缺失突变体相比,双重缺失突变体的胚胎发育停滞到了心形胚后期或鱼雷胚早期。这表明CHR12和CHR23在拟南芥种子及胚胎发育过程中功能冗余地发挥着重要调控作用。; 李从从赵军锋高英杰崔素娟; 关键词：拟南芥

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