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Ligilactobacillus sp.BD7642关键胆盐水解酶的发掘: 2024年; 随着人们生活水平的逐步提高,肥胖症的发生率在迅速升高。乳杆菌作为优秀的益生菌库,其对肥胖症具有很好的预防治疗效果,其中胆盐水解酶可能发挥着关键作用。胆盐水解酶对胆盐的降解具有特异性,对不同来源的胆盐水解酶的发掘及解析研究显得至关重要。该研究发现的一株Ligilactobacillus sp.BD7642具有很高的胆盐水解酶活性,并对这一菌株来源的胆盐水解酶进行发掘。通过牛磺脱氧胆酸钠平板的方法筛选发现Ligilactobacillus sp.BD7642具有高胆盐水解酶活性;利用HPLC分析BD7642对6种胆盐的降解特异性,发现其对牛磺酸胆盐具有偏好性;对BD7642的基因组进行分析发现3个注释为胆盐水解酶相关基因g1210、g1294、g1443,将这3个基因在大肠杆菌中异源表达,发现表达的3个蛋白都具有胆盐水解酶活性,其中g1294的胆盐水解酶活性最强;分子对接发现,g1294对牛磺酸的连接位点更紧密,这对g1294的高酶活力做出了一定的解释,也为后续合成生物学、菌株的人工改造提供新的思路和素材。; 任全路; 关键词：胆盐水解酶异源表达 HPLC

高产胆盐水解酶乳杆菌的筛选及对新生大鼠黄疸的防治作用: 2024年; 为筛选高产胆盐水解酶的乳杆菌,探究其对新生儿黄疸的防治作用。采用添加了25 U/mL制霉菌素的LBS选择性培养基,从健康新生儿粪便和母乳中筛选乳杆菌并鉴定种类;以鼠李糖乳杆菌LGG为阳性对照,体外评估菌株的益生菌特性;利用盐酸苯肼诱导新生SD大鼠黄疸模型,通过分析血清胆红素水平和肝脏组织的损伤情况,以及肝脏炎症因子、核转录因子的相对表达水平,探究高产胆盐水解酶乳杆菌对新生大鼠黄疸的防治作用及机制。结果表明,来自婴儿粪便的格氏乳杆菌FWJL-5在体外具良好的益生特性,并且产胆盐水解酶能力优于LGG,能够显著缓解新生大鼠胆红素水平升高、肝脏组织肿胀和溶血症状,减少肝脏损伤中肝酶的释放,抑制促炎因子的分泌,促进UGt1A1和上游核转录因子孕烷X受体(pregnane X receptor,pXR)、法尼醇X受体(farnesol X receptor,FXR)的表达。综上所述,婴儿粪便来源的格氏乳杆菌FWJL-5可通过上调核受体FXR/pXR促进UGt1A1表达以调节肝脏胆红素代谢,从而减轻新生大鼠黄疸症状,本研究可为格氏乳杆菌防治新生儿黄疸提供新思路。; 张慧敏李彬彬潘晓花孙嘉; 关键词：胆盐水解酶新生儿黄疸胆红素代谢

一种产胆盐水解酶的动物双歧杆菌及其在新生儿黄疸中的应用: 本发明公开了一种产胆盐水解酶的动物双歧杆菌及其在新生儿黄疸中的应用，属于微生物技术领域。本发明筛选的动物双歧杆菌乳亚种WXM具有缓解新生儿黄疸的作用，能够显著改善生命早期黄疸个体的体重减轻，改善血清中胆红素水平的异常升高...; 孙嘉王丽丽潘礼龙

一种胆盐水解酶基因及其应用: 本发明提供了一种胆盐水解酶基因，该基因来源于寡糖乳杆菌，该基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1、SEQ ID No：3或SEQ ID No：5所示。本发明提供的寡糖乳杆菌CGMCC No.26137对胆盐有很高的水解...; 任全路刘振民游春苹孙蕴文吴正钧

胆盐水解酶酶学性质与基因结构研究进展: 2023年; 胆盐水解酶(Bile salt hydrolase,BSH)广泛存在于哺乳动物胃肠道中,是肠道菌群在生长、繁殖过程中产生的一种胞内酶,可以调节宿主的胆汁酸平衡,影响脂质代谢,有控制胆固醇、调节肠道疾病的作用,并且BSH这种调控作用可以实现益生菌部分益生功能,因此BSH一直是研究热点。BSH结构和底物特异性的详细知识是开发BSH相关产品的坚实基础。本文介绍了BSH的来源及活性检测方法,BSH基因结构、酶学性质及底物识别机制,最后讨论了BSH在畜禽业食品工业及医药等方面的应用,期望为胆盐水解酶的深入研究及其在食品、保健品及医药方面的开发利用提供参考。; 卢方云杨彪马晶晶杨静李鹏鹏李鹏鹏王道营徐为民; 关键词：胆盐水解酶肠道微生物酶学性质

胆盐水解酶筛选及酶法提制鸡胆汁酸的研究: 2023年; 试验旨在从常见双歧杆菌筛选获得高活性胆盐水解酶的菌株并用于鸡胆汁酸的提制。从5种常见双歧杆菌菌株(两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、乳双歧杆菌、长双歧杆菌)中,通过平板Ca2+沉淀法及茚三酮法对活性双歧杆菌进行酶活评价,将高活性菌株的粗酶用于鸡胆汁酸的提制,使用薄层色谱法和高效液相法对所制胆汁酸进行定性和定量检测。结果显示:4种双歧杆菌(两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌和乳双歧杆菌)对甘氨型和牛磺型鹅去氧胆酸均具有水解活性,婴儿双歧杆菌对甘氨鹅去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸比酶活均显著高于其他3种双歧杆菌(P<0.05),比酶活分别为0.48 U/mg和0.27 U/mg。酶法工艺提制鸡胆汁酸的得率为5.34%,提取物中鹅去氧胆酸(CDCA)含量为70.7%。结果表明:婴儿双歧杆菌具有高活性胆盐水解酶,酶法工艺提制鸡胆汁酸反应条件温和,提取物纯度较高,较为节能环保。; 卢方云邹烨李鹏鹏邹烨李鹏鹏徐为民杨彪王道营; 关键词：胆汁酸鹅去氧胆酸双歧杆菌胆盐水解酶

一种具有高胆盐水解酶活性的寡糖乳杆菌及其应用: 本发明涉及一种具有高胆盐水解酶活性的寡糖乳杆菌及其应用，寡糖乳杆菌的保藏编号为CGMCCNo.26137。本发明首次提出了寡糖乳杆菌BD7642具有高胆盐水解酶活性，该寡糖乳杆菌对胆盐有很高的水解活性，属于对胆盐高耐受，...; 任全路刘振民游春苹孙蕴文吴正钧

一种增强活性的胆盐水解酶以及制备与方法和应用: 本发明涉及酶工程技术领域，具体涉及一种增强活性的胆盐水解酶以及制备与方法和应用。增强活性的胆盐水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，增强活性的胆盐水解酶是野生型酶的第80位的甘氨酸突变成异亮氨酸。本方案通过基因...; 胡德祥唐宗兴何兆海吴齐龙

一种热稳定性增强的胆盐水解酶以及制备与方法和应用: 本发明涉及酶工程技术领域，具体涉及一种热稳定性增强的胆盐水解酶以及制备与方法和应用。热稳定性增强的胆盐水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，热稳定性增强的胆盐水解酶是野生型酶的第80位的甘氨酸突变成丙氨酸。本方...; 吴齐龙唐宗兴何兆海胡德祥

屎肠球菌132胆盐水解酶基因的克隆表达与酶学特性被引量：1: 2022年; 该研究旨在探究降胆固醇潜在菌株屎肠球菌132胆盐水解酶(bile salt hydrolase,BSH)的活性,通过PCR技术克隆目的基因并在大肠杆菌BL21中表达,同时探讨其酶学特性。利用茚三酮法对其菌体破碎液BSH活性进行测定,比酶活达0.55 U/mg。通过克隆其目的基因,连接pET-28a(+)的表达载体并进行异源表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验显示,该酶分子量约37 ku。当底物为甘氨胆酸钠(glycocholic acid,GCA)、pH 5.50时,BSH酶活达4.93 U/mg。酶学特性结果表明,GCA为底物、pH 5.50、温度为30℃时达最适条件,BSH水解能力最强,酶活达6.59 U/mg,温度在4-30℃时,pH为5-7有较好的热稳定和pH稳定性。不同离子对酶活的影响实验表明Na^(+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)均对酶活有激活作用;Mn^(2+)、Fe^(2+)对酶活影响不大,但Ni^(2+)、Al^(3+)、Li^(2+)、Co^(2+)、Zn^(2+)均对酶活有强抑制作用,比酶活降到10%以下,几乎丧失活性。通过酶反应动力学得出该酶的V_(max)为6.44μmol/(min·mg),K_(m)值为3.16 mmol/L。因此,通过bsh基因克隆并异源表达,提高了屎肠球菌132BSH活性,并且BSH水解各类胆盐能力较强,为降胆固醇功能食品的开发与应用奠定基础。; 杨玲双谢新强李滢张菊梅丁郁吴清平王涓; 关键词：胆盐水解酶基因克隆异源表达酶学特性

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