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F10基因沉默及过表达对癌细胞JAR细胞周期的影响被引量:7
2016年
目的探讨F10基因功能与部分细胞周期蛋白表达的关。方法选择已建立并筛选的F10基因沉默、稳定过表达癌细胞JAR,以未处理JAR细胞为对照组,采用流式细胞仪检测细胞周期,Western blotting及免疫荧光细胞化学技术检测细胞周期蛋白(cyclin)和细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)的表达水平差异。结果流式细胞仪检测细胞周期显示,F10过表达组的JAR细胞细胞周期较沉默组及未处理组缩短。Western blotting检测结果显示,在F10沉默组、未处理组及F10过表达组的JAR细胞中cyclinA2、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK6、CDK7表达递增,过表达组及沉默组的蛋白表达水平与未处理组相比较差异有统计学意义(P<0.05),CDK4除外。免疫荧光细胞技术实验结果与Western-Blot检测结果基本一致。结论 F10基因通过上调细胞周期蛋白cyclinA2、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK6、CDK7的表达,加快细胞周期进程,促进细胞增殖,从而参与调节癌细胞的侵袭与转移。
杨金娣庞战军
关键词:绒癌细胞周期蛋白CDKS
新基因F10参与癌细胞JAR增殖和细胞周期调节的机制研究
(choriocarcinoma,CCA)是一种继发于正常或异常妊娠之后的滋养细胞肿瘤,恶性程度极高,发生转移早而广泛。F10基因(GenBank号:AB196290)是本研究团队从葡萄胎与正常早孕毛的差异cDNA...
杨金娣
关键词:绒癌增殖细胞周期JAR细胞
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葡萄胎病理相关新基因F10与癌细胞JAR成瘤性的关研究被引量:4
2016年
目的探讨葡萄胎病理相关新基因F10与癌细胞JAR裸鼠皮下成瘤的关。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的癌细胞JAR。将30只4~5周龄SPF级裸鼠随机均分为JAR F10过表达组、JAR F10沉默组、JAR未处理组(n=10),分别于颈背部皮下接种5×107个F10基因过表达的JAR细胞、F10基因沉默的JAR细胞及未处理的JAR细胞。接种后每3~4d称重并观察,记录肿瘤发生时间,观察皮下肿瘤的生长情况。绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。细胞接种5周后处死小鼠,取瘤组织称重,比较各组的瘤体重量。结果 3组的成瘤率均为100%(10/10)。JAR F10过表达组、JAR F10沉默组、JAR未处理组的成瘤时间分别为4.4±1.1、4.4±1.1、4.6±1.3d,组间比较差异无统计学意义(F=0.097,P=0.908)。与JAR未处理组相比,JAR F10过表达组肿瘤的在体生长速度明显增快,JAR F10沉默组则明显减慢,差异均有统计学意义(P〈0.05)。JAR F10过表达组、JAR F10沉默组、JAR未处理组肿瘤重量分别为607.49±216.19、270.73±81.53、423.87±74.75mg,组间比较差异有统计学意义(F=14.462,P=0.000)。结论 F10基因与癌细胞JAR的增殖调节有关,可增强JAR细胞在裸鼠体内的致瘤性。
苏晓华庞战军
关键词:JAR细胞
F10基因过表达及沉默对癌细胞JAR侵袭相关蛋白酶表达的影响被引量:7
2015年
目的 F10基因是本研究前期发现在葡萄胎中高表达的新基因,本文为明确F10过表达和沉默对癌细胞JAR侵袭性的影响,探讨F10基因与部分侵袭相关蛋白的关。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的癌细胞JAR。取SPF级裸鼠30只,随机均分为F10过表达组、未处理组、F10沉默组,每组10只,依次接种F10基因过表达的JAR细胞、未处理的JAR细胞和F10基因沉默的JAR细胞株,于接种5周后处死裸鼠收获皮下肿瘤,采用免疫组织化学及Western blot检测方法,比较不同组瘤体组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1),血浆纤溶酶原激活物抑制因子(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)等侵袭相关蛋白酶的表达差异。结果免疫组化法检测结果显示:F10、MMP-2、8、11、16、19在F10过表达组、未处理组、F10沉默组中间的表达依次递减,差异有统计学意义(P<0.05),TIMP-1、PAI-1在F10过表达组中分别为0.118±0.029、0.174±0.005,在未处理组中分别为0.214±0.028、0.289±0.009,在F10沉默组中分别为0.430±0.017、0.517±0.074,3组间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,F10、MMP-2、8、11、16、19蛋白在F10沉默组、未处理组、F10过表达组依次递增(P<0.001),而TIMP-1及PAI-1蛋白表达水平依次递减(P<0.001)。结论 F10通过上调MMP-2、8、11、16、19的表达,下调TIMP-1、PAI-1表达,参与调节癌细胞的增殖,从而可能参与调节的侵袭和转移。
苏晓华庞战军
关键词:绒癌JAR细胞
F10基因过表达及沉默对癌细胞JEG-3侵袭性的影响被引量:3
2015年
目的探讨F10基因过表达及沉默对癌细胞JEG-3侵袭相关蛋白酶表达的影响。方法采用细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的癌细胞JEG-3。将SPF级裸鼠(4~5周龄)30只随机分为F10过表达组、F10沉默组和未处理组各10只,分别接种F10基因过表达的JEG-3细胞、F10基因沉默的JEG-3细胞和未处理的JEG-3细胞。于接种5周后处死裸鼠取皮下肿瘤,采用免疫组织化学法和Western blot法检测各组瘤体组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase,TIMP-1),血浆纤溶酶原激活物抑制因子(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)等侵袭相关蛋白酶的表达,并进行比较。结果免疫组织化学结果显示,F10过表达组成瘤组织中MMP-2、MMP-8、MMP-11、MMP-16、MMP-19蛋白表达水平(0.332±0.037、0.473±0.089、0.441±0.031、0.470±0.040、0.548±0.062)高于未处理组(0.209±0.021、0.314±0.108、0.207±0.025、0.400±0.057、0.466±0.038)和F10沉默组(0.049±0.013、0.168±0.034、0.149±0.024、0.240±0.024、0.175±0.029)(P〈0.05),未处理组高于F10沉默组(P〈0.05);F10过表达组TIMP-1(0.191±0.027)和PAI-1蛋白(0.130±0.020)表达水平低于未处理组(0.249±0.036、0.284±0.020)和F10沉默组(0.310±0.018、0.463±0.115)(P〈0.05),未处理组低于F10沉默组(P〈0.05)。wesrern blot检测结果显示,上述侵袭相关蛋白酶在3组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 F10通过上调MMP-2、MMP-8、MMP-11、MMP-16、MMP-19表达,下调TIMP-1、PAI-1表达,促进癌细胞增殖、侵袭和转移。
苏晓华庞战军
关键词:绒癌JEG-3细胞
葡萄胎病理相关新基因F10与癌细胞JEG-3成瘤性的关被引量:2
2015年
目的:探讨葡萄胎病理相关新基因F10与癌细胞JEG-3裸鼠皮下成瘤的关。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的癌细胞JEG-3。取SPF级裸鼠(4~5周龄)30只,随机均分为JEG-3 F10过表达组、JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组(n=10),分别接种F10基因过表达的JEG-3细胞、F10基因沉默的JEG-3细胞和未处理的JEG-3细胞株5×107个于颈背部皮下。接种后每3~4 d称量裸鼠质量观察,记录肿瘤发生时间,观察皮下肿瘤的生长情况。绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。结果3组的成瘤率均为100%(10/10)。JEG-3 F10过表达组、JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组的成瘤时间分别为6.2±0.78、7±2.49、6.3±0.67 d,组间比较无统计学差异(F=0.781,P=0.468)。JEG-3 F10过表达组肿瘤的在体生长速度较JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组增快,差异有统计学意义(P〈0.05),JEG-3 F10未处理组肿瘤的在体生长速度较JEG-3 F10沉默组快(P〈0.05)。细胞接种5周后处死小鼠,取瘤组织称重,JEG-3 F10过表达组、JEG-3 F10沉默组、JEG-3未处理组肿瘤重量分别为571.1±221.10 mg、136.2±66.25 mg、354.5±116.23 mg,组间比较存在统计学差异(F=21.199,P=0.000)。结论 F10基因与癌细胞JEG-3的增殖调节有关,可增强JEG-3细胞在裸鼠体内的致瘤性。
苏晓华庞战军苏桂栋
关键词:绒癌JEG-3细胞
PPAR-γ配体对癌细胞JEG-3体外增殖、分泌和侵袭能力的影响被引量:1
2014年
目的观察PPAR-γ配体吡格列酮(PGZ)调节癌细胞JEG-3的增殖、分泌h CG和体外侵袭、转移能力。方法用MTT法和IEMA测定细胞的增殖和分泌h CG。Matrigel侵袭模型分析细胞的迁徙和侵袭能力。结果小剂量PGZ对JEG-3有增殖抑制作用,随PGZ浓度的增加,JEG-3透过Matrigel膜的细胞数明显减少(P<0.01)。结论PGZ明显抑制JEG-3肿瘤细胞的生长和侵袭能力,提示PPAR-γ途径可能是妊娠滋养细胞肿瘤治疗的新方向。
丁峰崔新红钮彬邢福祺
关键词:妊娠滋养细胞疾病过氧化物酶增殖体激活受体增殖绒毛膜促性腺激素
苯并(a)芘对癌细胞JEG-3细胞周期阻滞和分泌功能的影响
2012年
目的探讨苯并(a)芘[B(a)P]对体外培养癌细胞JEG-3的影响。方法不同浓度B(a)P(0.500、1.000、2.000、4.000、8.000μmol/L),染毒24h,分别应用流式细胞术和免疫化学发光法研究B(a)P对体外培养的JEG-3细胞周期和细胞因子人毛膜促性腺激素(hCG)分泌情况的影响。结果 JEG-3在4μmol/L和8μmol/L浓度组G2期细胞数量,与对照组相比分别上升了6.5%和21.0%(P<0.01)。随着B(a)P染毒浓度的升高,hCG分泌呈先上升后下降的趋势,2.000μmol/LB(a)P染毒组分泌达到峰值,随后降低,与对照组相比有统计学意义(P<0.05),呈现剂量-效应关。结论 B(a)P可以抑制细胞DNA合成,引起G2期细胞阻滞,使细胞有丝分裂延迟,并且通过影响hCG的分泌,从而调节细胞的功能。
单士刚包永芬
关键词:苯并(A)芘细胞周期人绒毛膜促性腺激素
6种常见耐药标志物在氟尿苷耐药癌细胞构建过程中的动态表达被引量:3
2011年
目的:通过检测对氟尿苷(FUDR)耐药的癌细胞构建过程中肺耐药相关蛋白(LRP)、二氢叶酸还原酶(DHFR)、survivin、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)6种常见耐药标志物的动态表达,探讨其耐药机制并进行耐药标志物的初步筛选。方法:用化学发光法和荧光定量PCR技术,分别检测不同浓度FUDR诱导的JEG-3细胞中β-人毛膜促性腺激素(β-HCG)的分泌量和上述6种常见耐药标志物在耐药细胞构建过程中的动态表达。结果:不同基因在药物诱导过程中的变化趋势不尽相同。只有LRP基因的表达随着诱导药物浓度和肿瘤细胞耐药性的增加而逐渐上调。结论:耐药的产生是分阶段的,不同阶段有不同的因素参与。就目前的研究结果而言,只有LRP的表达变化与FUDR诱导浓度和耐药性有明显正相关,提示其可以作为对FUDR耐药的候选预测指标。
韩冰向阳王铮王云张浩黄尚志
关键词:绒癌耐药氟尿苷
毛膜促性腺激素和胸苷合成酶在氟尿嘧啶核苷连续诱导耐药癌细胞构建过程中的动态表达
2011年
目的:通过检测氟尿嘧啶脱氧核苷(fluorodeoxyuridine,FUDR)连续诱导的耐药癌细胞构建过程中β-人毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-HCG)和胸苷合成酶(thymidylate synthase,TS)的动态表达,检验β-HCG分泌水平和TS基因的表达量是否适用于筛查癌细胞对该药耐药的指标。方法:采用连续诱导法,利用FUDR诱导人癌细胞JeG-3,建立耐药细胞株JeG-3/FUDRC2;用化学发光法检测培养液上清中激素分泌水平,用荧光定量PCR检测TS mRNA在诱导过程中的动态表达。结果:(1)历时12月成功建立了耐药细胞JeG-3/FUDRC2,其耐药指数为12.46±2.22;(2)随着药物浓度和肿瘤细胞耐药性的逐渐增加,癌细胞的β-HCG分泌最初表现为上调,诱导药物达到一定浓度时其分泌达到高峰,而后骤然下降,并有随药物浓度和耐药性的继续增加而逐渐下降的趋势;(3)低浓度药物诱导后,TS基因表达明显上调,但随着药物浓度和耐药性增加,其表达不升反降,甚至低于亲本细胞TS基因的表达量。结论:成功建立了连续诱导耐药的癌细胞株JeG-3/FUDRC2。癌细胞β-HCG分泌和TSmRNA表达与FUDR作用浓度以及耐药性无明显相关性。就目前的研究结果而言,β-HCG分泌和TS mRNA的表达水平不适宜用作癌细胞是否对FUDR耐药的指标。
韩冰向阳王铮王云张浩黄尚志
关键词:绒癌耐药绒毛膜促性腺激素

相关作者

庞战军
作品数:123被引量:355H指数:11
供职机构:南方医科大学南方医院
研究主题:F10 葡萄胎 滋养层细胞 胎盘 绒癌细胞系
邢福祺
作品数:334被引量:1,833H指数:19
供职机构:南方医科大学南方医院
研究主题:体外受精 子宫内膜 体外受精-胚胎移植 不孕症 胚胎移植
张浩
作品数:23被引量:159H指数:7
供职机构:北京协和医院
研究主题:绒癌 绒毛膜癌 耐药 HCG 人绒毛膜促性腺激素
王云
作品数:47被引量:471H指数:11
供职机构:北京协和医学院
研究主题:介入治疗 室间隔缺损 手术后并发症 心脏导管插入术 封堵术
黄尚志
作品数:198被引量:613H指数:12
供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
研究主题:苯丙酮尿症 产前诊断 家系 基因突变 突变