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重组蛇毒精氨酸酯酶His-Agkihpin体内外抗肝癌的初步实验研究
目的:  探索重组蛇毒精氨酸酯酶His-Agkihpin体外对肝癌细胞生物学行为的影响,研究相关基因改变;进一步探索His-Agkihpin体内抗肝癌效应。以期发现His-Agkihpin的相关抗肝癌药理作用,为其抗肝癌...
谢慧琼
关键词:蛇毒抗肝癌作用
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin基因的克隆及原核表达被引量:1
2014年
目的构建蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin的原核表达载体,并诱导其表达重组Agkihpin,为将来量产Agkihpin提供方法和依据。方法 RT-PCR法扩增Agkihpin基因,构建重组表达质粒p ET30a(+)-Agkihpin和p EASY-E1-His6-Agkihpin,并转化到BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳观察重组蛋白Agkihpin的表达情况,Western blot检测其特异性。结果成功构建Agkihpin的原核表达载体p EASY-E1-His6-Agkihpin和p ET30a(+)-His6-Agkihpin,并利用p EASY-E1-His6-Agkihpin首次在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出分子量约为30k D的His6-Agkihpin重组融合蛋白。结论首次实现了His6-Agkihpin重组融合蛋白在原核系统中的高效表达,为Agkihpin将来量产提供了方法和实验依据。
朱书宇黄程新胡启平黄秒舒伟方玲
关键词:类凝血酶原核表达克隆
精氨酸酯酶的分离和纯化
2013年
蝮蛇蛇毒中活性的组合是激肽释放酶,类凝血酶及类活血纤维酶。其中类凝血酶的精氨酸酯酶的活力最高。分析表明含有较多的酸性氨基酸及辅氨酸。蝮蛇中的类凝血酶属胰蛋白酶家族,通过切除血纤维蛋白原的凝聚,起凝血作用,但在体内因它不会激活凝血因子XⅢ,所以由其水解产生的纤维蛋白凝块的侧链不能交联,易被纤维蛋白溶酯降解,导致体内纤维蛋白浓度下降而表现出抗凝效应。
李鹏
关键词:REPTILASE
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin抑制人肝癌SMMC-7721细胞株MRP1表达被引量:2
2012年
目的:探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌细胞株SMMC-7721中多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance associated protein 1,MRP1)表达的影响,并阐明Agkihpin抑制人肝癌SMMC-7721细胞活力的机制。方法:采用不同浓度的Agkihpin处理SMMC-7721细胞72 h后,应用免疫细胞化学、Western blot和RT-PCR等方法检测MRP1在SMMC-7721细胞中的转录和表达。结果:不同浓度Agkihpin作用SMMC-7721细胞72 h后MRP1表达均降低,显示Agkihpin可显著下调SMMC-7721细胞中MRP1转录和表达(P<0.05),并呈现出一定的浓度依赖效应。结论:Agkibpin能抑制人低分化肝癌细胞株SMMC-7721中MRP1的表达,并呈一定程度的浓度依赖效应,提示Agkihpin在一定程度上可用于提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性。
胡启平许淑茹黄程新马军方玲袁志刚
关键词:多药耐药相关蛋白1精氨酸酯酶肝癌细胞
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞活力、增殖和迁移的影响被引量:2
2012年
目的:探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞活力、增殖和迁移的影响。方法:用不同浓度的Agkih-pin处理肝癌细胞株后,应用MTT法检测细胞活力,应用细胞计数法检测Agkihpin对细胞增殖和迁移的影响。结果:0.207~4.130mg/L浓度的Agkihpin作用SMMC-7721细胞后,与对照组比较,各加药组细胞活力明显下降(P<0.01),细胞活力随Agkihpin浓度增加而减弱(r=-0.81,P<0.05),细胞活力抑制率可达12.2%~46.2%;2.065~4.130mg/L剂量的Agki-hpin对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),加药24,48h和72h后增殖抑制率分别为29.4%~88.2%、64.1%~84.6%和4.4%~30.5%,且剂量依赖作用明显(P<0.05);3.089mg/L和4.130mg/L剂量的Agkihpin对SMMC-7721细胞还有一定的杀伤作用,杀伤率分别为20.0%和79.6%;0.207~4.13 mg/L剂量的Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞的迁移有明显的抑制作用(P<0.01),细胞迁移抑制率可达7.8%~98.0%,且剂量越大抑制作用越明显(r=0.841,P<0.05)。结论:一定剂量的Agkihpin可抑制人肝癌SMMC-7721细胞株的细胞活力、增殖和迁移。
胡启平黄程新马军方玲袁志刚韦力嘉
关键词:肝癌细胞细胞活力细胞增殖
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin上调人肝癌细胞株SMMC-7721中表皮钙黏素的表达研究被引量:2
2012年
目的探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞株中表皮钙黏素(E-CD)表达的影响及Agkihpin抑制人肝癌SMMC-7721细胞的机制。方法采用不同浓度的Agkihpin处理肝癌细胞株72 h后,应用免疫细胞化学、Western Blotting和逆转录PCR(RT-PCR)法检测E-CD在SMMC-7721细胞中的表达。结果不同浓度Agkihpin作用SMMC-7721细胞72 h后E-CD表达均上升,差异有统计学意义(P<0.05),并呈现出一定的剂量依赖效应。Agkihpin可显著上调SMMC-7721细胞中E-CD表达。结论在人低分化肝癌SMMC-7721细胞株中,Agkihpin能促进E-CD的表达,因而可能抑制肝癌细胞的迁移和降低肝癌组织的恶性程度。
黄程新许淑茹胡启平马军方玲袁志刚李晓龙
关键词:精氨酸酯酶肝肿瘤蛇毒液类
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin抑制鼻咽癌细胞机制的研究
目的:研究蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对鼻咽癌细胞系(CNE-2)的多药耐药相关蛋白1(MRP1),环氧合酶-2(COX-2)和表皮钙粘素(E-CD)表达的影响,探讨Agkihpin抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的机制。 ...
许淑茹
关键词:鼻咽癌多药耐药相关蛋白1环氧合酶-2
文献传递
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人鼻咽癌CNE-2细胞系MRP1表达的影响被引量:3
2011年
目的探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人鼻咽癌CNE-2细胞系中多药耐药相关蛋白MRP1表达的影响,并试图阐明Agkihpin抑制CNE-2细胞的机制。方法用不同浓度的Agkihpin处理细胞72h后,应用免疫细胞化学、Western blot、RT-PCR法检测MRP1在CNE-2细胞中的表达。结果不同浓度Agkihpin作用CNE-2细胞72h后MRP1表达均降低,并呈现出一定的浓度依赖效应,显示Agkihpin可显著下调CNE-2细胞中MRP1表达。各加药组与不加Agkihpin组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在人低分化鼻咽癌CNE-2细胞系中,Agkihpin能抑制MRP1的表达,并且随浓度的增大抑制作用增加,这可能是Agkihpin能降低鼻咽癌细胞活力的原因之一;Agkihpin抑制MRP1的表达提示在一定程度上可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感度。
许淑茹马军袁志刚黄勇奇苏上贵胡启平
关键词:多药耐药相关蛋白1精氨酸酯酶鼻咽癌细胞
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人鼻咽癌CNE-2细胞系环氧合酶-2表达的影响研究被引量:4
2011年
目的探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人鼻咽癌CNE-2细胞系环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法用不同浓度的Agkihpin处理鼻咽癌CNE-2细胞系72 h后,应用免疫细胞化学、Western Blotting、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测COX-2在CNE-2细胞系中的表达。结果不同浓度Agkihpin处理CNE-2细胞系72h后,COX-2的平均吸光密度比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中A1组、B1组和C1组较D1组均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),A1组较B1组、C1组和D1组均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。WesternBlotting检测经不同浓度Agkihpin处理72 h后COX-2表达差异有统计学意义(P<0.05),随着Agkihpin浓度的降低,COX-2表达水平升高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。不同浓度Agkihpin处理72 h后COX-2 mRNA的相对转录水平比较差异有统计学意义(P<0.05),随着Agkihpin浓度的降低,COX-2 mRNA的相对转录水平升高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在人低分化鼻咽癌CNE-2细胞系中,Agkihpin能抑制COX-2的表达,并且随着浓度的增大更明显;Agkihpin对COX-2的抑制作用,可能成为鼻咽癌化疗的有效药物。
胡启平许淑茹马军袁志刚黄勇奇苏上贵
关键词:鼻咽肿瘤环氧化酶2精氨酸酯酶
蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人鼻咽癌CNE-2细胞系E-钙粘素表达的影响被引量:3
2011年
目的探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人鼻咽癌CNE-2细胞系中表皮钙粘素(E-CD)表达的影响,并试图阐明Agkihpin抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的机制。方法用不同浓度的Agkihpin处理鼻咽癌细胞株72 h后,应用免疫细胞化学、RT-PCR法检测E-CD在CNE-2细胞中的表达。结果不同浓度Agkihpin作用CNE-2细胞72 h后E-CD表达均降低,并呈现出一定的浓度依赖效应,显示Agkihpin可显著下调CNE-2细胞中E-CD表达。各加药组与不加Agkihpin组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在人低分化鼻咽癌CNE-2细胞系中,Agkihpin能抑制E-CD的表达,并且随浓度的增大有明显的抑制作用。
许淑茹马军袁志刚黄勇奇苏上贵胡启平
关键词:精氨酸酯酶鼻咽癌

相关作者

胡启平
作品数:58被引量:137H指数:7
供职机构:广西医科大学
研究主题:精氨酸酯酶 蛇毒 线粒体DNA 鼻咽癌 医学遗传学
韦传宝
作品数:107被引量:274H指数:8
供职机构:皖西学院
研究主题:抗血清制备 原核表达 CP基因 出血毒素 精氨酸酯酶
袁志刚
作品数:80被引量:244H指数:8
供职机构:广西医科大学
研究主题:线粒体DNA 家系 精氨酸酯酶 蛇毒 帕金森病
许淑茹
作品数:32被引量:31H指数:3
供职机构:漳州卫生职业学院
研究主题:精氨酸酯酶 蛇毒 鼻咽癌 TIE2 多药耐药相关蛋白1
马军
作品数:36被引量:127H指数:6
供职机构:广西医科大学第一附属医院
研究主题:精氨酸酯酶 蛇毒 线粒体DNA 家系 鼻咽癌