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Cyclin D1在黄芪甲苷诱导BMSCs向神经元细胞分化中的表达
2024年
目的:研究黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化的特点和诱导过程中Cyclin D1的表达特点。方法:采用100 mg·L^(-1)黄芪甲苷诱导BMSCs分化,在1、12、24 h倒置显微镜观察细胞形态变化,免疫细胞化学方法观察巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、Cyclin D1的表达,RT-PCR检测Cyclin D1 mRNA的表达。结果:收集获得的骨髓细胞采用原代和传代培养,至第3代BMSCs细胞基本纯化。经100 mg·L^(-1)黄芪甲苷作用后,部分细胞自胞体长出突起,形态似神经元细胞且表达Nestin和NSE抗体,Nestin的表达时相早于NSE且表达强度高于NSE(P<0.05)。在药物作用1 h后,BMSCs细胞Cyclin D1不论在基因转录水平还是在蛋白表达水平均出现大幅度下调,此时BMSCs开始有Nestin的表达;药物作用12、24 h,BMSCs细胞Cyclin D1表达与药物作用前表达水平无显著性差异(P>0.05)。结论:黄芪甲苷可能首先通过调整细胞周期,延长了G1期向S期转变的时间,从而启动了BMSCs的分化程序,诱导BMSCs向神经干细胞分化。在黄芪甲苷的营养作用下,细胞的突起进一步生长并向神经元分化。
王晓寅王会芳罗强张辉张晓丽
关键词:黄芪甲苷BMSCS分化神经元样细胞
人多巴胺能神经元细胞分化的方法及分化的细胞和应用
本发明公开了一种人多巴胺能神经元细胞分化的方法及分化的细胞和应用。向人羊膜上皮干细胞中加入含抗坏血酸,成纤维细胞生长因子‑2和noggin的诱导组合物‑1和含有成纤维细胞生长因子‑8,音猬因子,脑源性神经营养因子,胶质...
余路阳蒋拓颖黄佳男李金英刘佳
一种杜仲水提物诱导PC12细胞向神经元细胞分化的方法
本发明属于细胞转分化技术领域,公开了一种杜仲水提物诱导PC12细胞向神经元细胞分化的方法。步骤如下:杜仲树皮水提物溶于基础培养基,超声震荡混匀,加5%~8%胎牛血清配制成杜仲诱导培养基,诱导培养PC12细胞3‑4天。显...
李辞霞朱晓岩潘佳蓉赵善廷薛玉环
杜仲水提物诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞向神经元细胞分化被引量:1
2023年
目的 探讨杜仲水提物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(Rat pheochromocytoma cells, PC12细胞)向神经元细胞分化的作用。方法 用0~10 mg·mL^(-1)杜仲水提物培养PC12细胞4 d,双抗噻唑蓝法(MTT法)检测吸光度(A值)并选取最佳浓度配置杜仲诱导培养基;诱导4 d后通过免疫荧光标记神经丝蛋白H(neurofilament-H,NF-H)检测诱导情况;通过免疫蛋白印迹检测细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)及磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal regulated kinases, p-ERK)表达情况。结果 不同浓度杜仲培养4 d的PC12细胞,与空白对照A值相比,1~3 mg·mL^(-1)剂量组有增高趋势;4~7 mg·mL^(-1)剂量组有降低趋势;8~10 mg·mL^(-1)剂量组显著降低(P<0.05)。4 mg·mL^(-1)含杜仲诱导培养基培养PC12细胞4 d, 90%以上分化为神经元细胞,细胞胞体变大,突起伸长,互相连接成网,约20%突起长度> 30μm,显著高于对照组。随着诱导时间的延长,NF-H表达逐渐增多增强,诱导4 d后,约90%以上的细胞NF-H强阳性表达,p-ERK蛋白表达水平较对照组明显降低。结论 杜仲水提物能够诱导PC12细胞分化为神经元细胞,表达神经元特异蛋白神经丝蛋白,其机制可能与ERK信号通路调节密切相关。
朱晓岩李辞霞周文泰潘佳蓉赵善廷
关键词:PC12细胞神经元样细胞诱导分化
细胞外微环境对牙髓细胞成神经元细胞分化及其促成骨作用的影响
目的:hDPC旁分泌作用可以修复脊髓神经,但对于骨缺损的修复影响尚不清楚。本文探究细胞外微环境硬度变化对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)分化的影响,并研究分化后hDPCs对成骨谱系...
张钊伟白明茹汪成林
一种杜仲水提物诱导PC12细胞向神经元细胞分化的方法
本发明属于细胞转分化技术领域,公开了一种杜仲水提物诱导PC12细胞向神经元细胞分化的方法。步骤如下:杜仲树皮水提物溶于基础培养基,超声震荡混匀,加5%~8%胎牛血清配制成杜仲诱导培养基,诱导培养PC12细胞3‑4天。显...
李辞霞朱晓岩潘佳蓉赵善廷薛玉环
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丁苯酞在成人脂肪基质细胞分化为神经元细胞过程中的分化促进及自噬激动作用观察被引量:1
2022年
目的观察丁苯酞在成人脂肪基质细胞(ADSC)分化为神经元细胞过程中的分化促进及自噬激动作用。方法取成人ADSC,应用1 mmol/L的β-巯基乙醇进行预诱导24 h后,分为β-巯基乙醇组、β-巯基乙醇+丁苯酞组、β-巯基乙醇+雷帕霉素组。其中β-巯基乙醇组加入含5 mmol/L的β-巯基乙醇,β-巯基乙醇+丁苯酞组加入5 mmol/L的β-巯基乙醇和10μmol/L的丁苯酞,β-巯基乙醇+雷帕霉素组加入5 mmol/L的β-巯基乙醇和200μg/L的雷帕霉素。在预诱导、诱导1 h、诱导3 h、诱导5 h、诱导8 h时,采用倒置相差显微镜观察各组细胞形态学变化,计算细胞分化率。在诱导1 h、诱导5 h时,在透射电镜下观察细胞的超微结构,计数自噬小体和自噬溶酶体数量。在诱导1 h、诱导3 h、诱导5 h、诱导8 h时,采用MTT法检测细胞存活率。在诱导5 h时,采用免疫细胞化学法检测各组细胞中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋-200(NF-200)。在诱导1 h、诱导3 h、诱导5 h、诱导8 h时,采用免疫细胞化学法检测各组细胞中LC3蛋白。结果诱导后的三组细胞形态学变化相似,分化的细胞呈典型的神经元细胞形态;细胞核体积大而圆,染色浅,其中常染色质多、异染色质较少,部分神经元细胞的细胞浆可见大量内质网扩张,线粒体出现肿胀、嵴断裂,细胞内出现具有双层膜结构的自噬小体。随着诱导时间的延长,各组细胞分化率、LC3阳性细胞率显著升高(P均<0.05),在诱导5 h时达到峰值;与β-巯基乙醇组相比,β-巯基乙醇+雷帕霉素组、β-巯基乙醇+丁苯酞组细胞分化率、LC3阳性细胞率均显著升高(P均<0.05);与β-巯基乙醇+雷帕霉素组相比,β-巯基乙醇+丁苯酞组在诱导1 h、3 h时细胞分化率、LC3阳性细胞率均显著升高(P均<0.05),在诱导8 h时显著降低(P<0.05)。诱导5 h时各组细胞自噬小体及自噬溶酶体数量均高于诱导1 h时(P均<0.05),β-巯基乙醇+丁苯酞
陆艳卉徐康赵紫烨李斌郭佳周桂娟
关键词:丁苯酞脂肪基质细胞神经元样细胞
远志皂苷对Aβ25-35致伤PC12神经元细胞突触可塑性的影响被引量:2
2022年
目的:通过神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导对数生长期的大鼠PC12细胞分化为神经元细胞。方法:以浓度为10μmol/L的β淀粉蛋白寡聚体Aβ25-35致伤PC12神经元细胞建立阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)的模型,观察远志皂苷(SEN)低剂量组和SEN高剂量组细胞存活率、突触可塑性相关蛋白PSD-95mRNA、ERK1/2mRNA、SynmRNA的表达及蛋白表达的变化。结果:SEN低剂量组、SEN高剂量组的PSD-95、Syn、P-ERK1/2等细胞突触可塑性相关蛋白及其mRNA表达明显高于模型组(P<0.01),且SEN高剂量组的表达较SEN低剂量组更为突出(P<0.01)。结论:远志皂苷对Aβ25-35寡聚体致伤PC12神经元细胞发挥保护作用并改善突触可塑性,可能与增加PSD-95、Syn、P-ERK1/2的mRNA及蛋白表达有关。
杨庆铎赵锦程朱晓峰
关键词:远志皂苷元AΒ25-35
靶向Pim-1表达修复受损神经元细胞的作用及机制
2021年
中枢神经元内在再生能力不足是其再生失败的主要因素。以病毒为载体调控关键靶基因表达,提升受损神经元内在再生能力为近年研究中枢神经损伤修复的焦点之一。莫洛尼小鼠白血病病毒前病毒插入位点(Pim-1)为丝/苏氨酸蛋白激酶,是许多细胞因子和生长因子在细胞增殖、存活及凋亡等过程中发挥作用的共同下游分子。小鼠Pim-1与Lnc-Pim1的基因同位于17号染色体,基因序列相似且有重叠,转录方向相反。由小鼠Neuro-2a细胞诱导而来的、具有中枢神经元属性的神经元细胞(N-2a-N细胞),被广泛应用于研究神经元的分化、突起再生以及信号转导。
李贺刘芳许家军
关键词:细胞诱导中枢神经元神经元样细胞细胞因子神经损伤修复
一种人颅骨间充质干细胞来源的神经元细胞的悬浮培养方法
本发明涉及一种人颅骨间充质干细胞来源的神经元细胞的悬浮培养方法,包括如下步骤:人体颅骨碎块或碎屑作为组织来源提取骨髓间充质干细胞,培养孵化后以10<Sup>4</Sup>~10<Sup>6</Sup>个/cm<Sup>...
卢刚麻育源
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相关作者

邓宇斌
作品数:155被引量:569H指数:11
供职机构:中山大学
研究主题:骨髓间质干细胞 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 神经元样细胞 神经营养因子
李光来
作品数:225被引量:948H指数:14
供职机构:东华理工大学
研究主题:癫痫持续状态 脑缺血再灌注 骨髓间充质干细胞 急性脑梗死 脑出血
秦书俭
作品数:196被引量:793H指数:12
供职机构:辽宁医学院
研究主题:骨髓基质细胞 骨髓间充质干细胞 骨基质明胶 骨缺损 人参皂苷RG1
姜晓丹
作品数:527被引量:1,885H指数:20
供职机构:青岛大学
研究主题:神经干细胞 骨髓基质细胞 骨髓源性神经干细胞 细胞分化 神经胶质瘤
刘晓刚
作品数:54被引量:187H指数:7
供职机构:北京市垂杨柳医院
研究主题:脊髓损伤 神经元样细胞 胶质细胞源性神经营养因子 神经营养因子 骨髓间质干细胞