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一种人-羊轮状病毒基因 重配 减毒株及应用 本发明公开了一种人‑羊轮状病毒基因 重配 减毒株及应用。该人‑羊轮状病毒基因 重配 减毒株包含:ⅰ)人G9型轮状病毒HN‑28株的结构蛋白VP7的编码基因 ;和ⅱ)羊轮状病毒LLR株的结构蛋白VP1、VP2、VP3、VP4、VP6... 寇桂英 李雄雄 王云瑾 程亚慧 火文 关文竹 唐悦 张国祥 陈汉泉 胡广宏 包红口服人-牛(WC_3株)5价轮状病毒基因 重配 活疫苗保护效果的Meta分析 被引量:6 2018年 目的评价口服人-牛(WC_3株)5价轮状病毒基因 重配 活疫苗(PRV)的保护效果。方法检索中国生物医学文献数据库等中文数据库和美国国家医学图书馆数据库等外文数据库,检索有关PRV保护效果的研究纳入分析。按照研究地区的社会经济发展水平、疫苗株和流行株的匹配情况,分别合并试验组和对照组针对不同型别轮状病毒感染引起的急性肠炎发病的相对危险度(RR)或比值比(OR),计算疫苗效力(VE)。结果共纳入5篇病例对照研究。高发展水平国家,在疫苗株和流行株完全匹配的情况下,VE=94%(95%CI:84%~98%);在疫苗株和流行株不完全匹配的情况下,VE=82%(95%CI:70%~89%);在单一抗原匹配的情况下,VE=82%(95%CI:70%~89%);在单一抗原不匹配的情况下,VE=75%(95%CI:47%~88%)。中等发展水平国家,在疫苗株和流行株不完全匹配的情况下,VE=37%(95%CI:10%~56%);在单一抗原匹配的情况下,VE=71%(95%CI:60%~78%);在单一抗原不匹配的情况下,VE=76%(95%CI:61%~85%)。结论接种PRV可降低轮状病毒感染引起的急性肠炎发病率,PRV的保护效果与疫苗株和流行株匹配情况以及地区因素有关。 胡昱 陈雅萍 梁辉 汪颖关键词:轮状病毒 一株与儿童腹泻相关的跨多种属的基因 重配 G3P[3]型轮状病毒 被引量:7 2016年 G3P[3]型别多见于猫/狗A组轮状病毒(Group A rotavirus,RVA)。本研究前期工作中从广西农村一名腹泻儿童粪便标本中检测到1例在人的感染中少见的G3P[3]型RVA(命名M2-102),但经初步基因 分析提示其VP7和VP4基因 均同猫/狗G3P[3]RVAs进化距离远。为了解M2-102的种属来源,本研究对其全基因 组11条基因 进行了RT-PCR扩增、测序和序列分析。使用RotaC分型工具对所获得的M2-102全基因 组基因 序列进行分型。结果显示RVA/Human-wt/CHN/M2-102/2014/G3P[3]具有G3-P[3]-I3-R3-C3-M3-A9-N3-T3-E3-H6基因 组型。序列分析进一步显示M2-102基因 组中有5条基因 (VP7、VP1、VP2、NSP2和NSP3)同云南蝙蝠MYAS33株亲缘关系近,处于相同的进化树支;另有5条基因 (VP4、VP3、NSP1、NSP4和NSP5)同猿猴RRV株进化距离近,位于相同的进化树支;仅有1条基因 VP6同人AU-1样RVAs处在相同进化树支,并具有较高核苷酸同源性。推测M2-102是一例由人AU-1样病毒同蝙蝠株MYAS33及猿猴株RRV类似病毒经基因 重配 而产生的多种属来源的重配 毒株。 董慧瑾 钱渊 农艺 张又 莫兆军 李荣成关键词:人轮状病毒 基因组 基因重配 生物反应器培养轮状病毒基因 重配 株Ls条件的优化 被引量:3 2015年 目的轮状病毒基因 重配 株Ls(G3型)在生物反应器微载体培养Vero细胞条件的优化。方法采用3 L生物反应器微载体培养Vero细胞,观察Ls株在不同病毒感染复数(0.001、0.002、0.010、0.040 MOI)、不同温度(34.5℃和35.5℃)、不同病毒收获时间(24和48 h)对病毒增殖的影响。根据病毒滴度和收获量筛选出最适MOI、培养温度及病毒的收获时间。结果以0.002 MOI接种Vero细胞,温度为34.5℃培养病毒,滴度最高达7.50 lg CCID50/m L;48 h可连续收获4次病毒液,且收获总量及病毒滴度均高于24 h。结论通过对Ls株在生物反应器微载体Vero细胞培养条件的优化,获得的病毒液滴度高及连续培养多次收获量增加的有效方法,为进一步规模化培养奠定了基础。 范秀娟 孙燕 孙振鹏 马超 孟子新 李欢 李薇关键词:生物反应器 VERO细胞 细胞工厂培养轮状病毒基因 重配 株Ls(G3型)条件的优化研究 被引量:8 2014年 目的:以细胞工厂代替转瓶培养轮状病毒基因 重配 株Ls的可行性研究。方法采用细胞工厂与相应的转瓶培养工艺作对比,比较两种容器内细胞生长状态与病毒收获液滴度,并对细胞工厂培养条件进行了优化。结果以相同浓度接种细胞时,细胞工厂4 d长成单层,转瓶却需要7 d,经细胞仪计数后单位面积内细胞密度相当;以相同MOI接种病毒后,转瓶内的病毒于第7天病毒滴度达到峰值,细胞已完全脱落;细胞工厂于第3天病毒滴度达到峰值,并实现了3次收获。细胞工厂每次收获的病毒液滴度都稳定在一定范围,与转瓶相当。另外,细胞工厂培养条件优化结果表明,Vero细胞最佳接种浓度为3.0×104细胞/cm2,接种病毒的最适MOI为0.02~0.04。结论使用细胞工厂培养Ls株病毒不仅提高了效率,而且减少了培养空间,可替代转瓶规模化生产轮状病毒疫苗。 安红 张海红 王名强 韩平 余黎 周旭关键词:轮状病毒 VERO细胞 细胞工厂 病毒滴度 牛轮状病毒基因 重配 二价减毒疫苗接种怀孕母牛的免疫原性评价 被引量:7 2013年 为评价牛轮状病毒(BRV)基因 重组二价减毒疫苗(LLR-85和R191株)对怀孕母牛的免疫反应,本研究将RVLLR-85(G10)和R191(G6)株等比例混合后进行乳化,肌肉途径接种怀孕7个~8个月的母牛。采用间接ELISA和病毒中和(V N)试验对接种牛血清抗BRV的IgG、IgA以及V N抗体进行检测。结果显示,接种2周后抗体水平达到峰值,可以使原有的抗体滴度升高4倍~32倍,高滴度抗体可持续约2个月,接种母牛均未发生流产等副反应。犊牛通过饲喂初乳,可以在出生后1 d内获得最高水平的血清和肠道粘膜抗体。结果表明,BRV基因 重组二价减毒疫苗对孕牛不但具有良好的安全性、而且其高滴度抗体可以通过初乳使新生犊牛获得有效的被动免疫。这些研究结果为该疫苗的临床应用提供了实验依据。 常继涛 于力关键词:牛轮状病毒 基因重配 怀孕母牛 轮状病毒基因 重配 毒株及其构建方法和应用 本发明公开了一株轮状病毒基因 重配 毒株及其构建方法和应用,属于轮状病毒的诊断和防制领域。本发明轮状病毒基因 重配 毒株以羊轮状病毒弱毒株的VP1、VP2、VP3、VP4、NSP1、VP6、NSP2、NSP3、NSP4和NSP5... 于力 常继涛文献传递 细胞工厂在轮状病毒基因 重配 株LD9培养中的应用初探 被引量:4 2011年 为了探索用细胞工厂代替转瓶培养轮状病毒基因 重配 株LD9及收获高滴度的LD9病毒原液和提高产量的可行性,分别在2层4、层细胞工厂和3L1、5L转瓶培养Vero细胞,比较两种容器内细胞的生长状态。结果显示,以相同活细胞数2.5×104/ml同时接种两种不同培养容器时,细胞工厂培养3d已长成单层,而转瓶培养需5d;对两种容器长满单层时的细胞经胰酶消化后通过细胞仪计数、分析,结果显示,两种容器培养细胞长成单层时的单位面积细胞密度相当;对长成致密单层细胞的两种容器以相同的MOI(MOI=0.1)接种LD9病毒,转瓶培养的病毒于第8d病毒滴度达到高峰,为6.0~6.5 lgCCID50/ml;细胞工厂第5d病毒滴度达高峰,为6.5 lgCCID50/ml,并于第9d病毒滴度再次达到峰值,为6.0~6.5 lgCCID50/ml,实现二次收获病毒。 寇桂英 包红 傅生芳 王名强 余黎 周旭关键词:细胞工厂 VERO细胞 轮状病毒 病毒滴度 1株含H9N2内部基因 的H5N1亚型基因 重配 禽流感病毒的全基因 测序及遗传进化分析 被引量:6 2010年 在对华东地区家养水禽中流感病毒的带毒状况的流行病学监测过程中,从表观健康家鸭体内分离到一株H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/009/2008(简称Dk/SD/009/08)。为了解该毒株的基因 组构成,对该分离株进行全基因 测序。测序结果显示:该毒株HA裂解位点处的氨基酸序列为PLRERRRK-R/GL,符合高致病性禽流感病毒的分子特征,且参照H5N1国际统一命名准则,Dk/SD/009/08的HA基因 属于2.3.4进化支。BLAST结果显示,HA、NA、NP及NS基因 均与H5N1亚型病毒的核苷酸一致性最高,而RNA聚合酶基因 (PB2、PB1、PA)及M基因 则与H9N2亚型病毒的亲缘关系最近,故推测该分离株可能是一株天然重组病毒;遗传进化分析进一步表明,流行于华南地区鹌鹑中的G1-like H9N2亚型病毒可能为该分离株提供部分的内部基因 。 顾敏 刘文博 曹军平 曹永忠 张小荣 彭大新 刘秀梵关键词:H5N1 H9N2 禽流感病毒 轮状病毒基因 重配 毒株及其构建方法和应用 本发明公开了一株轮状病毒基因 重配 毒株及其构建方法和应用,属于轮状病毒的诊断和防制领域。本发明轮状病毒基因 重配 毒株以羊轮状病毒弱毒株的VP1、VP2、VP3、VP4、NSP1、VP6、NSP2、NSP3、NSP4和NSP5... 于力 常继涛文献传递
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周旭 作品数:69 被引量:171 H指数:6 供职机构:上海生物制品研究所有限责任公司 研究主题:轮状病毒 基因重配 呼吸道合胞病毒 免疫效果 VERO细胞 王名强 作品数:11 被引量:36 H指数:4 供职机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 研究主题:轮状病毒 基因重配 VERO细胞 病毒滴度 细胞工厂 寇桂英 作品数:19 被引量:33 H指数:4 供职机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 研究主题:轮状病毒 基因重配 VERO细胞 呼吸道合胞病毒 人呼吸道合胞病毒 余黎 作品数:34 被引量:137 H指数:6 供职机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 研究主题:轮状病毒 呼吸道合胞病毒 基因重配 VERO细胞 人呼吸道合胞病毒 包红 作品数:23 被引量:46 H指数:4 供职机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 研究主题:轮状病毒 基因重配 VERO细胞 纯化 L1蛋白