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奶牛骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法及应用: 本发明公开了奶牛骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法及应用，涉及生物技术领域。本发明通过在体外诱导分化骨髓中髓系祖细胞来分化成单核巨噬细胞，选择针对单核巨噬细胞特异性抗原受体的单克隆抗体进行细胞鉴定。建立一种获取奶牛骨髓细胞，...; 刘博杨效林毛伟张双翼曹金山王钰郭莉莉龚鹏飞赵佳敏巩志国

达格列净对ApoE^(-/-)小鼠单核巨噬细胞系统及动脉粥样硬化的影响: 2024年; 目的:研究达格列净对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的影响,探讨其抗AS作用的可能机制。方法:16只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠高脂饮食喂养8周形成AS模型后,随机分为对照组和实验组,每组8只,实验组予达格列净干预,对照组予同等剂量的生理盐水,两组干预4周后取材。油红O染色检测主动脉及主动脉瓣AS斑块面积比例;流式细胞术分析循环中单核细胞亚群的比例(Ly6G-CD11b+Ly6C hi和Ly6G-CD11b+Ly6C lo);免疫荧光染色和共聚焦显微镜成像检测斑块内的巨噬细胞和增殖的巨噬细胞(F4/80和Ki67双阳性细胞);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平。结果:实验组与对照组比较有降低主动脉及主动脉瓣斑块负荷的作用,降低循环中Ly6C^(hi)单核细胞比例,降低斑块内增殖巨噬细胞比例,降低LDL-C水平,且具有升高HDL-C作用。结论:达格列净可减轻ApoE^(-/-)小鼠AS负荷的作用,可能与调节单核细胞亚群和血脂代谢相关。; 李宵王丹丹马巍李兵贾俊栋王泰然赵季红; 关键词：动脉粥样硬化血脂

一种阻断单核巨噬细胞功能的CD38抑制剂在治疗ITP中的应用: 本发明提供了一种阻断单核巨噬细胞功能的CD38抑制剂在治疗ITP中的应用。特别是，作为CD38抑制剂的抗CD38抗体与单核巨噬细胞膜表面的CD38分子特异性结合抑制单核巨噬细胞的增殖，降低单核巨噬细胞数量和比例，有效抑制...; 张磊徐艳梅陈云飞

一种靶向DPP4的嵌合抗原受体单核巨噬细胞亚型构建方法以及其缓解瘢痕的用途: 本发明涉及生物工程技术领域，涉及嵌合抗原受体细胞，具体涉及一种靶向DPP4的嵌合抗原受体单核巨噬细胞亚型构建方法以及其缓解瘢痕的用途。本方案的细胞的构建方法如下：在巨噬细胞中表达靶向DPP4的嵌合抗原受体，获得CAR‑M...; 曾文刘敏周鑫王羽

奶牛骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法建立鉴定及应用: 2024年; 为了建立奶牛骨髓源巨噬细胞的分离培养与鉴定方法,选用3种不同的培养基(RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12)分别添加20%胎牛血清(FBS)、2.4%青-链霉素、1.2%谷氨酰胺(Gln)、M-CSF(20μg/L)将奶牛骨髓中提取出的单核细胞诱导为巨噬细胞,再通过加入脂多糖(Lipolyaccharide,LPS)将诱导出的M0型巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞,光学显微镜在第1、4、7天观察巨噬细胞形态,比较3种培养基对分化巨噬细胞的差异。同时探究了前列腺素D_(2)(Prostaglandin D_(2),PGD_(2))-DP_(2)受体途径对大肠杆菌(Escherichia coli)诱导细胞因子(IL-6、TNF-α)分泌及巨噬细胞吞噬功能的影响。结果显示,RPMI-1640培养基中培养的细胞形态变化最为明显,且数量较多。并能够检测到大量的单核巨噬细胞特征性标志物(M0标志物:CD11b、CD14;M1标志物:CD11b、CD80)的表达,M0和M1型巨噬细胞纯度分别为79.9%和93.5%。与空白对照组相比,E.coli感染组COX-2和H-PGDS基因表达显著升高;PGD_(2)分泌量也显著上升(P<0.0001)。DP_(2)受体抑制剂(CAY10471、CAY10595)能够显著抑制E.coli诱导促炎性细胞因子(IL-6、TNF-α)的分泌和显著增强巨噬细胞对E.coli的杀伤作用。结果表明,诱导的细胞具有巨噬细胞特有的形态学特征和免疫表型;E.coli可诱导巨噬细胞PGD_(2)的产生,PGD_(2)-DP_(2)途径对E.coli感染的巨噬细胞细胞因子的分泌具有一定的调控作用。; 王钰杨效林郭莉莉龚鹏飞吴敬泽毛伟张双翼张双翼曹金山; 关键词：奶牛分离培养鉴定

蛋白冠对纳米颗粒与单核巨噬细胞相互作用的影响: 2024年; 纳米颗粒凭借其独特的物理和化学性质,在药物递送和疾病诊断领域展现出巨大潜力。然而,尽管纳米颗粒研究广泛,但目前仅有部分纳米疗法成功应用于临床,这主要归因于当前研究对纳米颗粒与生物流体环境复杂交互作用的忽视。在纳米颗粒进入生物体后,其与免疫系统的相互作用成为决定治疗效果的关键因素。单核巨噬细胞,作为免疫系统的先锋,对纳米颗粒的识别和响应直接影响治疗的效果和安全性。此外,纳米颗粒进入生物环境后其表面会形成由多种蛋白质构成的复杂蛋白冠,这不仅为纳米颗粒带来了独特的物理化学特性,还为其与生物体互作提供了全新界面。蛋白冠的形成对纳米颗粒在生物体内的行为产生深远影响,进而决定了纳米医学治疗的最终效果。因此,本文聚焦于纳米颗粒–蛋白冠复合体与单核巨噬细胞间的相互作用,深入探讨了蛋白冠的形成对纳米颗粒治疗效果的具体影响。这一研究不仅有助于优化纳米药物的设计,更对提高纳米医学的临床应用水平具有重要的理论和实践意义。; 冒淙秀翟启明何清清陈陶; 关键词：巨噬细胞

复方双黄连制剂对单核巨噬细胞(RAW264.7)Fc/C3b受体活性和分泌功能的影响: 2024年; 【目的】探究复方双黄连制剂对巨噬细胞吞噬能力和分泌功能的影响,为复方双黄连的深度开发及畜禽用药的合理选择提供科学依据。【方法】将金银花、黄芩、连翘、穿心莲干燥粉碎后分别制备浸膏,按照比例制备双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘=1∶1∶2)、复方双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘∶穿心莲=1∶1∶2∶2)及穿心莲口服液,调节pH为7.0,生药浓度为1 g/mL。3种药物作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,采用CCK-8法检测细胞活力,确定3种药物安全浓度,将药物最大安全浓度以二倍稀释法稀释为3个浓度;采用脂多糖(LPS)和氢化考的松琥珀酸钠(HCSS)作用于RAW264.7细胞模拟机体炎症和免疫抑制状态,3种药物作用于这2种状态的细胞和正常细胞,采用YC、EA玫瑰花环法及中性红吞噬法检测巨噬细胞Fc/C3b受体活性和吞噬能力,采用ELISA法检测巨噬细胞分泌能力。【结果】复方双黄连、双黄连、穿心莲的安全浓度分别为0.625~2.5、3.125~12.5和0.625~2.5 mg/mL。不同浓度复方双黄连、双黄连、穿心莲作用于巨噬细胞,细胞吞噬能力均显著高于空白对照组(P<0.05)。复方双黄连可降低LPS巨噬细胞RAW264.7活跃的吞噬能力,增强HCSS巨噬细胞RAW264.7吞噬能力;不同浓度复方双黄连可使活化的巨噬细胞Fc/C3b受体活性下降,低下的Fc/C3b受体活性增强;不同浓度复方双黄连具有促进巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及溶菌酶(LZM)的作用,抑制LPS巨噬细胞NO、TNF-α、IFN-γ及白细胞介素-6(IL-6)的分泌。【结论】复方双黄连可通过活化巨噬细胞Fc/C3b受体活性以增强机体免疫力和抗炎能力,同时对已活化的巨噬细胞分泌功能起到抑制作用,以减少由于免疫功能亢进造成的机体损伤。研究结果为中兽药复方双黄连的深度开发提供了参考依据。; 史晗戴浩然郭彬刘群; 关键词：分泌功能

去泛素化酶ABRO1对李斯特菌感染单核巨噬细胞IL-1β释放的影响及其机制: 2024年; 目的观察去泛素化酶Abraxas兄弟蛋白(ABRO1)对李斯特菌(LM)感染的小鼠单核巨噬细胞J774A.1白细胞介素(IL)-1β释放的影响,并探讨相关机制。方法培养J774A.1细胞,分别感染有李斯特菌溶血素O(LLO)的野生型LM菌株(野生型组)、敲除LLO的hly基因缺失(Δhly)LM菌株(基因缺失组)及Δhly株回补hly基因的LM菌株(回补株组),采用Western blotting法检测ABRO1蛋白,ELISA法检测细胞培养液上清中的IL-1β。将J774A.1细胞分为NI组(未感染LM菌株)、WT组(感染WT LM菌株)与Δhly组(感染Δhly LM菌株),各组分别转染NC si RNA、ABRO1 si RNA,采用ELISA法检测细胞培养液上清中的IL-1β,采用Western blotting法检测炎症小体相关分子Caspase-1、p20(Caspase-1活化形式)、IL-1β、p17。结果随着感染时间延长,野生型组、回补株组ABRO1表达、IL-1β水平逐渐增高,在感染120 min达到最高、均高于基因缺失组(P均<0.05);基因缺失组不同时点ABRO1表达、IL-1β水平无明显变化。WT组转染ABRO1 si RNA的细胞培养液上清中IL-1β水平及p20、p17表达低于转染NC si RNA的细胞(P均<0.05);WT组转染NC si RNA的细胞培养液上清中IL-1β水平及p20、p17表达高于NI组(P均<0.05);Δhly组转染NC si RNA的细胞培养液上清中IL-1β水平及p20、p17表达低于WT组(P均<0.05)。结论李斯特菌感染的J774A.1细胞中ABRO1表达增高,下调ABRO1表达后,J774A.1细胞中IL-1β释放减少;LLO可能通过激活炎症小体从而促进LM感染诱导的IL-1β释放。; 王琳穆红申艳娜; 关键词：李斯特菌白细胞介素1Β

急性脑梗死患者入院时Hcy、HMGB1、TLR4水平与单核巨噬细胞极化的相关性: 2024年; 目的探讨急性脑梗死(ACI)患者入院时同型半胱氨酸(Hcy)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)水平与单核巨噬细胞极化的相关性。方法选择2020年8月至2022年8月该院收治的107例ACI患者为病例组,另选取同期体检健康者50例为对照组,比较2组入院时血清Hcy、HMGB1、TLR4水平,比较2组单核巨噬细胞极化情况[M1型细胞比例、M2型细胞比例、M1/M2比值、M1型极化标志物(白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α)、M2型极化标志物(白细胞介素-10、转化生长因子-β)],分析ACI患者Hcy、HMGB1、TLR4水平与单核巨噬细胞极化的关系,分析ACI患者Hcy、HMGB1、TLR4水平与ACI患者预后的关系。根据ACI患者预后情况,将患者分为预后良好组和预后不良组,比较其血清Hcy、HMGB1、TLR4水平。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析Hcy、HMGB1、TLR4对ACI预后的预测效能。结果与对照组比较,病例组血清Hcy、HMGB1、TLR4水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,病例组M1型细胞比例、M1/M2比值、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α水平明显升高(P<0.05),白细胞介素-10、转化生长因子-β水平明显降低(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,ACI患者血清Hcy、HMGB1、TLR4水平与M1型细胞比例、M1/M2比值、白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α水平呈正相关(P<0.05),与白细胞介素-10、转化生长因子-β水平呈负相关(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清Hcy、HMGB1、TLR4水平明显升高(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,Hcy、HMGB1、TLR4联合预测ACI预后的效能较高,其曲线下面积、灵敏度、特异度依次为0.840、77.80%、80.00%。结论Hcy、HMGB1、TLR4在ACI患者外周血中呈高表达,其水平与单核巨噬细胞极化及预后关系密切,有望成为ACI临床诊治的生物标志物。; 王亮亮韩若东张亚飞吴国柱徐彦龙; 关键词：急性脑梗死高迁移率族蛋白B1

大气PM_(2.5)诱导小鼠单核巨噬细胞自噬及其作用机制: 2024年; 目的探讨大气PM_(2.5)诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)自噬及其机制。方法对生长状况良好的小鼠单核巨噬细胞给予不同浓度大气PM_(2.5)染毒(10、25、50、100和200μg/ml),染毒24 h后用倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞生长抑制率、细胞吞噬率和细胞吞噬指数,用MDC染色实验、透射电镜观察细胞结构,同时采用酶联免疫吸附法和实时定量荧光PCR法检测Beclin 1和MAP-LC3的蛋白表达量和mRNA相对表达水平的变化。结果大气PM_(2.5)染毒可明显改变RAW264.7细胞的生长状况和细胞形态,不同浓度大气PM_(2.5)对小鼠单核巨噬细胞活力有明显的抑制作用,存在剂量-反应关系,染毒后细胞吞噬率和吞噬指数降低。MDC染色实验显示,细胞核周有较多的亮点状颗粒物,透射电镜下可以观察到多个、结构典型自噬体。大气PM_(2.5)染毒后,RAW264.7细胞Beclin 1和MAP-LC3蛋白含量均高于对照组,100、200μg/ml组Beclin 1 mRNA相对表达量高于对照组,50、100和200μg/ml组MA P-LC3 mRNA相对表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),存在剂量-反应关系。结论大气PM_(2.5)染毒可影响RAW264.7细胞生长状况,导致细胞形态改变,降低细胞增殖能力和吞噬能力;其可能是通过促使Beclin 1和MA P-LC3基因表达上调而诱导RAW264.7细胞发生自噬。; 王甜嵇志刚刘蓉易建华史伟; 关键词：自噬

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