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尖孢镰刀菌古巴专化型FocGSNOR基因功能初步分析: 2024年; 在尖孢镰刀菌古巴专化型4号小种基因组中鉴定到一个编码S-亚硝基谷胱甘肽还原酶的基因FocGSNOR。为了探索FocGSNOR在尖孢镰刀菌生长和对寄主致病力中的作用,本研究首先构建了该蛋白编码基因的敲除突变体菌株,并进一步对其生长和致病等表型进行了分析。结果发现,FocGSNOR基因的敲除明显抑制了尖孢镰刀菌的营养生长、产孢及其对寄主香蕉植株的致病力。另外,与野生型菌株WT相比,敲除突变株ΔFocGSNOR对抑菌药物异菌脲、三唑酮和过氧化氢的抗性有明显差异。以上结果表明FocGSNOR是尖孢镰刀菌重要的致病因子。; 王有霜杨永报王倩男; 关键词：尖孢镰刀菌古巴专化型基因功能

一种尖孢镰刀菌古巴专化型孢子的检测装置及检测方法与应用: 本发明公开了一种尖孢镰刀菌古巴专化型孢子的检测装置及检测方法与应用。该检测装置包括玻璃底板、ITO玻璃电极和环状钨电极；电沉积时，玻璃底板、ITO玻璃电极和环状钨电极依次排布，在ITO玻璃电极的ITO层上设置有与环状钨电...; 张安强李睿林雅铃

一种调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力的基因、蛋白及其应用: 本发明公开了一种调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力的基因、蛋白及其应用，涉及生物技术领域。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过构建Foisc1基因...; 郭立佳杨腊英周游汪军梁昌聪杨洋刘磊黄俊生

尖孢镰刀菌亚麻专化型FolGLS2基因功能分析被引量：1: 2024年; 亚麻是我国主要的油料作物,且长期受亚麻枯萎病的侵害。β-1,3-葡聚糖合酶的催化亚基FKS/GLS为细胞壁合成所必需,本研究为鉴定尖孢镰刀菌亚麻专化型FolGLS2的功能,进行了FolGLS2基因的克隆、敲除以及敲除突变体表型和致病力的测定等试验。结果显示,FolGLS2基因全长5947 bp,cDNA开放阅读框为5847 bp,编码1948个氨基酸。表型观察发现,敲除突变体菌落小而紧实,生长速率明显降低;菌丝缩短、增粗且无法产生分生孢子;菌丝细胞壁对于常规原生质释放酶液具有抗性,无法释放原生质体;感染试验显示,突变体致病力明显减弱。上述结果表明,FolGLS2基因编码β-1,3-葡聚糖合成酶催化亚基,对菌丝营养生长、菌落形态、分生孢子发生、细胞壁组成及致病性具有调控作用。; 高伟娜侯占铭; 关键词：基因敲除

一种尖孢镰刀菌番茄专化型CRISPR一管法检测体系: 本发明公开了一种尖孢镰刀菌番茄专化型CRI SPR一管法检测体系，S1、构建含有尖孢镰刀菌番茄专化型Fo l_S IX1保守序列的质粒pUC57‑Fo l_S IX1；S2、将pUC57‑Fo l_S IX1质粒与模板D...; 袁小凤戴世杰吴阳升李哲明俞锐阳赵雨金

尖孢镰刀菌西瓜专化型RPA检测方法的建立与评价: 2024年; [目的]构建了西瓜枯萎病菌——尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)的重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)的快速检测体系,以期为田间西瓜枯萎病的快速检测提供技术支持。[方法]从NCBI网站下载包括西瓜枯萎病菌在内的11种病原真菌的基因组序列,利用SeqHunter 2软件进行生物信息学分析,经比对得到4个FON的特异性基因片段,并对其进行引物设计和筛选。利用聚合酶链式反应(PCR)验证引物的特异性和灵敏度,然后利用建立的RPA检测体系对引物的特异性和灵敏度进行验证,最后进行人工接种FON的西瓜植株的RPA检测与评价。[结果]建立了FON的RPA检测体系,并对DNA恒温快速扩增试剂盒的扩增体系进行最佳反应时间(40 min)和最适反应温度(30℃)的摸索,得到其最佳反应体系的检测下限为100 pg·μL^(-1)。利用DNA恒温快速扩增试剂盒(胶体金试纸条型)进行扩增时,只需在38℃反应12 min,取50μL稀释20倍的扩增产物用胶体金试纸条进行检测,5 min后即可进行结果的判断,检测下限为100 pg·μL^(-1)。[结论]成功构建FON的RPA检测体系,且建立的RPA检测体系能够从温室接种FON之后未显症的西瓜植物组织基因组DNA中检测到FON,可为田间西瓜枯萎病早期的快速检测提供技术支持。; 董文盼杨纪潇杨项明吕明慧朱彦泽蒋春号; 关键词：西瓜枯萎病

一种尖孢镰刀菌番茄专化型LAMP引物及检测试剂盒与应用: 本发明公开了一种尖孢镰刀菌番茄专化型LAMP引物及检测试剂盒与应用。LAMP引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑5所示，试剂盒包含如下试剂：Bst DNA聚合酶溶液、甜菜碱溶液、10×TE缓冲液、dNTPs溶液、镁...; 唐彤彤李子强胡晓蕾邓佳莹林安琪

不同培养条件对尖孢镰刀菌苜蓿专化型分生孢子形成及萌发的影响: 2024年; 为明确有利于尖孢镰刀菌苜蓿专化型(Fusarium oxysporum f.sp.medicaginis,Fom)分生孢子形成及萌发的培养条件,本研究通过十字交叉法测量Fom菌株在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、合成低营养琼脂(SNA)和羧甲基纤维素钠(CMC)固体培养基培养不同时间的菌落直径,并通过镜检法和血球板计数法观测以上不同固体及其液体培养基(不加琼脂)培养不同时间的分生孢子产量、比例,以及不同液体培养基中菌株分生孢子萌发率。结果发现,CMC培养基上菌株生长最快(P<0.05)。PDA培养基培养分生孢子产量最高(P<0.05),固、液体培养基分别为(1.05×10^(6))~(7.63×10^(6))和(5.01×10^(6))~(9.49×10^(6))个·mL^(−1),且小分生孢子比例总体相对较高;CMC培养基上大型分生孢子比例最高(P<0.05),固、液体培养基上分别为0.85%~4.40%、2.32%~5.63%。PDA、SNA液体培养基培养分生孢子萌发率较高,且时间越长萌发率越高,培养48 h时分别可达35.98%、47.32%。由此可见,CMC固体培养基有利于Fom生长,其液体培养基诱导菌株大型分生孢子形成效果较好;PDA液体培养基有利于诱导分生孢子形成,尤其是小分生孢子;SNA液体培养基更利于分生孢子萌发。本研究为防治苜蓿镰刀菌根腐病及有关机理研究提供了前期基础。; 许世洋方香玲; 关键词：苜蓿根部病害尖孢镰刀菌分生孢子孢子萌发率

尖孢镰刀菌苜蓿专化型厚垣孢子的诱导形成方法及萌发特性: 2024年; 厚垣孢子是尖孢镰刀菌在土壤中的主要存活结构,土壤中厚垣孢子的数量及萌发状况,直接影响着病害的发生及其严重度。首先通过研究合成低营养琼脂(SNA)和SNA加滤纸片(SNAF)培养基以及不同浓度葡萄糖和碳酸镁的双盐溶液(KH_(2)PO_(4)和MgSO_(4)·7H_(2)O)中厚垣孢子的形成,建立苜蓿专化型菌株厚垣孢子的诱导形成方法并进行验证,然后研究不同碳源和氮源对厚垣孢子萌发的影响。菌株T6和T9在2 mg·L^(-1)葡萄糖的双盐溶液中静置培养7 d时形成大量的厚垣孢子,分别为4.2×10^(5)和5.1×10^(5)个·mL^(-1);且静置培养时的厚垣孢子数量均高于振荡培养时的数量,分别为4.2和2.8倍。不同苜蓿专化型菌株经双盐溶液诱导后,都在培养7 d时形成大量厚垣孢子,且培养前7 d时数量都快速增加,7 d时的均值为3 d时的2.3倍;而培养14和21 d时数量增加较慢,21 d时的均值仅为7 d时的1.2倍。对厚垣孢子萌发及芽管生长促进作用较大的碳源和氮源分别为葡萄糖和氯化铵,促进作用较小的碳源和氮源分别为乳糖和尿素。结果表明尖孢镰刀菌苜蓿专化型菌株厚垣孢子的形成需要微量的碳源和低氧环境,且厚垣孢子的萌发及生长需要适宜的碳源和氮源,可从控制病原菌初侵染源角度为苜蓿土传病害的绿色防控提供新思路。; 方香玲许世洋南志标; 关键词：尖孢镰刀菌土传病原真菌初侵染源厚垣孢子

尖孢镰刀菌古巴专化型胱硫醚γ-合成酶的功能分析被引量：1: 2023年; 甲硫氨酸在真菌、细菌和植物的生物学过程中起着重要作用。禾谷镰刀菌Fusarium graminearum的FgMETB基因编码一个胱硫醚γ-合成酶,是甲硫氨酸合成所必需的。本研究利用同源重组的方法,在尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种Fusariumoxysporumf.sp.cubenserace4(Foc4)获得了FgMETB同源基因FoMETB的敲除突变体菌株;与野生型菌株相比,突变体菌株ΔFoMETB在以SO_(4)^(2-)为唯一硫源的基本培养基(minimal medium)上不能生长。1 mmol/L甲硫氨酸的添加恢复了突变体菌株ΔFoMETB的生长,但半胱氨酸的添加不能恢复该缺失突变体的生长,说明FoMETB的敲除阻遏了Foc4半胱氨酸转化甲硫氨酸的通路。此外,ΔFoMETB的气生菌丝和菌丝干重明显减少、分枝增多、产孢量显著降低、疏水性缺失和对巴西蕉组培苗的致病性显著减弱。由此表明,FoMETB参与调控尖孢镰刀菌古巴专化型的生理特性和致病性,甲硫氨酸合成途径的关键合酶FoMETB有望成为新的抗真菌药物靶标。; 刘礼广丁兆建李梦涵吴春花谢欣捷彭军张欣; 关键词：尖孢镰刀菌古巴专化型

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