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抗γ-干扰素自身抗体免疫缺陷综合征研究进展
2024年
抗γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)自身抗体相关的成人发病型免疫缺陷综合征表现为患者常出现反复感染,尤其是非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)和马尔尼菲篮状菌等胞内菌感染,患者外周血血清中出现抗γ-干扰素自身抗体,发病以东南亚国家及中国广西、广东、香港地区常有报道,而在北方地区则少见^([1])。我们总结了抗γ-干扰素自身抗体的研究进展,以提高国内临床医生对该综合征的认识,并为治疗策略提供指导。
肖蓉何志义梁斯巧王宏伟
基于γ-干扰素释放试验的麻风分枝杆菌感染筛查诊断
2024年
目的:探讨γ-干扰素释放试验(IGRA)在麻风分枝杆菌感染诊断中的应用价值。方法:在麻风患者、健康人群的PBMCs中进行IGRA检测。麻风患者进一步按多菌型(MB)和少菌型(PB)展开研究,使用I-SPOT-TB试剂盒(酶联免疫斑点法)检测释放IFN-γ的效应T细胞频数。比较分析MB和PB患者IGRA检测的阳性率,结合qPCR结果对PB患者进行讨论分析。结果:以患者的病理诊断为确诊依据,纳入29例麻风患者,20名健康人群作为对照。用rESAT6-CFP10刺激后,MB和PB患者IFN-γ的激活程度和IGRA阳性率均无统计学差异。37.5%的PB患者qPCR阴性,IGRA阳性;12.5%的PB患者IGRA阴性,qPCR阳性;IGRA阳性或qPCR阳性的PB患者达75%。结论:IGRA阳性提示分枝杆菌感染的可能,IGRA联合qPCR可作为早期筛查麻风的辅助检测方法。
李艳艳王川王川潘晴孙乐乐周桂芝潘晴张福仁
关键词:Γ-干扰素释放试验
鸡γ-干扰素的原核表达及其单克隆抗体制备与鉴定
2024年
【目的】通过原核表达系统表达鸡γ-干扰素(chicken interferon-gamma,ChIFN-γ),并制备其单克隆抗体,为建立检测天然ChIFN-γ的免疫学方法提供试验材料。【方法】将密码子优化的ChIFN-γ基因克隆至原核表达载体pET-21a(+)中,构建重组质粒pET21a-ChIFN-γ;重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,利用IPTG诱导表达重组蛋白;用该纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫合格的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合;用建立的ELISA方法筛选分泌针对ChIFN-γ蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞,并制备腹水,Protein A/G纯化腹水获得特异性抗体;对单克隆抗体的类和亚类进行鉴定;Western blotting和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测单克隆抗体的反应性、亲和力和特异性交叉反应;用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体,用两两配对的方法进行抗体配对。【结果】成功制备可溶性重组ChIFN-γ蛋白;Western blotting结果显示,ChIFN-γ与相应抗体结合呈现特异性条带(16 ku);获得7株针对ChIFN-γ的特异性杂交瘤细胞株:3E8、5F8、2G12、5A10、3D8、3B5、3G2。Western blotting和IFA结果显示,7株单克隆抗体反应性良好,均能特异性识别真核表达的ChIFN-γ;单克隆抗体的类和亚类鉴定结果显示,3E8、5F8、3D8、3B5和2G12重链均为IgG1,5A10重链为IgG2a,3G2重链为IgM,7株单克隆抗体的轻链均为Kappa型;所获得的7株单克隆抗体解离常数(dissociation constant,Kd)在1.04~58.33 nmol/L之间,为高亲和力抗体,并获得5组配对抗体。【结论】本研究成功制备了ChIFN-γ蛋白及其单克隆抗体,为进一步开展ChIFN-γ在禽类免疫学、病毒学及疫苗效果评价等相关研究奠定基础。
崔锦蔷程晶江波周林宜刘文晓李永清宋勤叶
关键词:单克隆抗体
γ-干扰素释放试验在结核病筛查中的辅助诊断价值
2024年
目的分析比较γ-干扰素释放试验(interferon-gamma releaseassay,IGRA)对结核病诊断的辅助价值和意义。方法采用回顾性分析的方法收集2020年1月—2021年12月在天津市结核病控制中心门诊部进行IGRA检测的462例疑似结核病患者的检测结果,根据诊断结果分为结核病组229例(肺结核组203例和肺外结核组26例),非结核病组233例。分析IGRA对结核病的辅助诊断价值,并将其与结核分枝杆菌培养、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(geneXpert Mycobacterium tuberculosis/rifampin,Xpert MTB/RIF)2种方法进行比较。结果IGRA、结核分枝杆菌培养和Xpert MTB/RIF在结核病患者中的阳性率分别为76.42%、29.26%、40.62%,与非结核病组比较(38.20%、0.00%、0.00%),差异有统计学意义(P<0.001)。IGRA单独检测结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为76.42%、61.80%、69.29%、72.73%,结核分枝杆菌培养检测结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为29.26%、98.28%、94.37%、63.43%,Xpert MTB/RIF检测结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为40.60%、100%、100%、63.14%。IGRA在肺结核和肺外结核患者中阳性率分别为76.85%、73.08%,差异无统计学意义(P>0.05)。在菌阳患者组、非结核患者组中IGRA检测结核的阳性率分别为79.34%、38.20%,差异有统计学意义(χ^(2)=54.526,P<0.001);在菌阴患者组、非结核患者组中IGRA检测结核的阳性率分别为73.15%、38.20%,差异有统计学意义(χ^(2)=36.456,P<0.001)。结论IGRA在结核病患者的诊断中具有较高的灵敏度,在肺外结核和菌阴结核的筛查也有一定的优势,为临床上诊断结核病提供重要的参考依据。
江丽娜陈盛玉孟苏凯孙蕊吴振萍王秀月张玉华王春花
关键词:Γ-干扰素释放试验结核分枝杆菌培养结核病
白细胞介27、腺苷脱氨酶和γ-干扰素对结核性胸膜炎的诊断效能分析
2024年
目的探讨白细胞介27(IL-27)、腺苷脱氨酶(ADA)和γ-干扰素(IFN-γ)对结核性胸膜炎(TBP)的诊断效能。方法收集2022年5月至2023年5月于该院就诊的315例患者胸腔积液标本,其中165例确诊为TBP纳入TBP组,其他150例纳入对照组(以恶性胸腔积液为主)。检测两组胸腔积液中IL-27、ADA和IFN-γ水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并通过ROC曲线下面积(AUC)对各指标单独和联合诊断的灵敏度和特异度进行评估。结果TBP组IL-27、ADA和IFN-γ水平均高于对照组(P<0.05);单一指标诊断TBP的AUC值均超过0.85,其中ADA诊断TBP的AUC值最大(0.92),最佳截断值为22.48 U/L时,诊断灵敏度和特异度分别为80.61%和93.33%;联合诊断时IL-27和IFN-γ指标联合诊断效能最佳,AUC值为0.94,灵敏度和特异度分别为89.70%和93.33%。结论IL-27、ADA和IFN-γ单一指标对TBP均具有较高的诊断效能,但IL-27和IFN-γ联合诊断更具有优势。
周超杰乐军
关键词:结核性胸膜炎胸腔积液白细胞介素27腺苷脱氨酶Γ-干扰素
抗病毒治疗的基因1b型慢性丙型肝炎患者疗效及其血清γ-干扰素和白细胞介-10水平变化
2024年
目的分析接受索磷布韦/达拉他韦或标准治疗方案治疗的基因1b型慢性丙型肝炎(CHC)患者疗效及其血清γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介(IL)-10水平变化。方法2020年5月~2023年2月我院收治的基因1b型CHC患者58例,其中30例观察组接受索磷布韦/达拉他韦治疗,另28例接受聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林治疗,均持续治疗24 w。采用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-10水平。结果在治疗结束时,观察组白细胞、血小板计数和血红蛋白水平分别为(5.5±1.2)×10^(9)/L、(116.2±19.5)×10^(9)/L和(121.5±19.7)g/L,均显著高于对照组【分别为(4.6±1.1)×10^(9)/L、(94.0±18.5)×10^(9)/L和(104.7±16.8)g/L,P<0.05】;观察组血清丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶水平分别为(36.0±5.0)U/L和(38.2±5.5)U/L,显著低于对照组【分别为(47.5±5.8)U/L和(51.9±6.3)U/L,P<0.05】;观察组血清C-反应蛋白和IL-10水平分别为(13.4±1.8)ng/L和(36.5±14.6)pg/mL,均显著低于对照组【分别为(16.7±2.2)ng/L和(64.0±28.2)pg/mL,P<0.05】,而血清IFN-γ水平为(19.2±2.0)pg/mL,显著高于对照组【(10.4±2.2)pg/mL,P<0.05】;观察组快速病毒学应答、早期病毒学应答、治疗结束时病毒学应答和持续病毒学应答率分别为73.3%、90.0%、100.0%和96.7%),均显著高于对照组的42.8%、53.6%、71.4%和60.7%(P<0.05);在治疗4 w时,46例应答组血清IFN-γ水平为(23.5±4.7)pg/mL,显著高于12例未应答组【(8.5±1.7)pg/mL,P<0.05】,而血清IL-10水平为(29.0±13.2)pg/mL,显著低于未应答组【(84.5±30.1)pg/mL,P<0.05】。结论应用索磷布韦/达拉他韦治疗基因1b型CHC患者疗效好,病毒学应答率高,可能与成功诱发机体抗病毒免疫反应有关。
刘雅光胡连智董一侠刘洋
关键词:丙型肝炎聚乙二醇干扰素Α-2A
端粒酶、γ-干扰素、腺苷酸脱氨酶及结核感染T细胞斑点试验在诊断结核性和恶性胸腔积液中的作用分析
2024年
目的 评价端粒酶、γ-干扰素(IFN-γ)、腺苷酸脱氨酶(ADA)及T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测在诊断结核性和恶性胸腔积液中的价值。方法 纳入40例早期结核性胸膜炎患者(结核组)和40例恶性胸腔积液患者(肿瘤组),分别在治疗前抽取患者胸腔积液及空腹血液,应用酶联免疫吸附分析法检测端粒酶的含量和IFN-γ的浓度,应用比色分析法检测ADA的活性,采用Elispot斑点计数检测T-SPOT.TB阳性率。结果 结核组和肿瘤组的端粒酶含量分别为(1.46±0.73)×10~(-3) nmol/L和(3.34±1.72)×10~(-3) nmol/L,结核组端粒酶含量低于肿瘤组(P<0.01);结核组和肿瘤组的IFN-γ含量分别为(137.44±38.93) U/L和(27.94±8.46) U/L,ADA含量分别为(68.42±9.58) U/L和(15.39±4.43) U/L,2组患者IFN-γ含量和ADA含量比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结核组IFN-γ浓度、ADA活性及T-SPOT.TB阳性率均高于肿瘤组(P<0.01)。联合应用端粒酶、IFN-γ、ADA及T-SPOT.TB 4个诊断指标的诊断试验鉴别诊断结核性和恶性胸腔积液的敏感度为0.974,特异度为0.974。结论 联合应用端粒酶、IFN-γ、ADA及T-SPOT.TB 4个诊断指标的诊断试验在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液的鉴别诊断中具有重要意义。
由振华黄锦宏赵云根顾宇平程易凌春华
关键词:端粒酶Γ-干扰素腺苷酸脱氨酶结核性胸腔积液恶性胸腔积液
γ-干扰素诱导蛋白-10 mRNA检测试验对不同年龄人群结核病的辅助诊断价值
2024年
目的:探讨γ-干扰素诱导蛋白-10(interferon gamma-induced protein 10,IP-10) mRNA检测技术对不同年龄组结核病患者的辅助诊断价值。方法:前瞻性纳入2018年3月至2022年7月在首都医科大学附属北京胸科医院、河南省传染病医院和深圳市第三人民医院收治、且完成IP-10 mRNA检测的疑似结核病患者1590例。剔除诊断不明确200例,共1390例纳入分析。根据诊断结果分为确诊结核病组(475例)、临床诊断结核病组(518例)、非结核病组(397例)。按照年龄将入组患者分为中青年组(18~59岁)1062例和老年组(60~95岁)328例。在不同年龄组中,以临床诊断结果为标准,分析IP-10 mRNA检测对结核病的诊断效能。结果:中青年组IP-10 mRNA检测的敏感度和特异度分别为90.2%(721/799,95%CI:87.9%~92.1%)和68.8%(170/247, 95%CI:62.6%~74.4%),老年组IP-10 mRNA检测的敏感度和特异度分别为87.8%(159/181,95%CI:82.0%~92.0%)和54.7%(76/139,95%CI:46.0%~63.1%)。两个年龄组间IP-10 mRNA检测的敏感度比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.922,P=0.337),但中青年组IP-10 mRNA检测的特异度高于老年组,差异有统计学意义(χ^(2)=7.704,P=0.006)。随年龄增长,IP-10 mRNA检测的敏感度的变化差异无统计学意义(Z=-1.063,P=0.288),特异度随年龄增长明显降低(Z=-2.846,P=0.004)。结论:IP-10 mRNA检测对中青年结核病患者的辅助诊断更有价值;考虑IP-10 mRNA检测的敏感度受年龄影响较小,可能有助于在老年人群中应用该技术进行结核感染的主动筛查。
宋瑞雪董静姚明旭贾红彦李自慧孙琦朱传智杜博平邢爱英潘丽萍
关键词:结核干扰素类干扰素诱导剂
γ-干扰素释放试验中植物血凝反应的影响因
2024年
目的探讨用γ-干扰素释放试验(gamma interferon release assay,IGRA)检测结核分枝杆菌感染时植物血凝(phytohemagglutinin,PHA)反应的影响因。方法选取2019年1月—2021年12月于四川大学华西医院接受IGRA检测的360例住院患者进行回顾性病例对照研究,根据PHA反应强弱(以IFN-γ含量表示),将住院患者分为PHA反应阴性组(IFN-γ<2 pg/ml)、PHA反应弱阳性组(IFN-γ:2~100 pg/ml)和PHA反应正常组(IFN-γ>400 pg/ml)。结果在360例患者中,合并免疫性疾病与PHA反应阴性(OR=0.34,95%CI:0.17~0.72,P=0.004)和弱阳性(OR=0.29,95%CI:0.16~0.55,P<0.001)独立相关;合并非结核分枝杆菌的其他病原体感染与PHA反应阴性独立相关(OR=0.266,95%CI:0.09~0.83,P=0.023),而免疫功能低下与PHA反应弱阳性独立相关(OR=0.280,95%CI:0.12~0.63,P=0.002)。PHA反应水平与血清白蛋白、血红蛋白、中性粒细胞和淋巴细胞计数显著相关(P<0.001)。结论免疫性疾病和免疫功能低下均能影响PHA反应水平,因此临床医生在对IGRA检测结果解读中应着重关注PHA反应水平,防止出现误诊和漏诊。同时,PHA反应水平在一定程度上也能反映住院患者的感染状态。
陈静敖科萍陈欣盈叶飞李冬冬王中浩谢轶
关键词:植物血凝素Γ-干扰素释放试验
结核病γ-干扰素释放试验假阴性的影响因分析
2024年
目的探究γ-干扰素释放试验(IGRA)假阴性结果的影响因,为临床诊断结核感染提供参考。方法收集广州医科大学附属第一医院2022年1月1日至2023年11月30日期间符合入组要求的患者资料,分为IGRA假阴性组与阳性组,对多项指标包括年龄、性别、单核细胞计数、淋巴细胞计数、淋巴细胞比率、总蛋白含量、白蛋白含量、合并症、T淋巴细胞亚群及绝对计数进行统计学分析。结果IGRA假阴性组与阳性组在年龄、性别、单核细胞计数、总蛋白含量和合并症比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);在淋巴细胞计数、淋巴细胞比率、白蛋白含量比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。假阴性组的淋巴细胞计数、淋巴细胞比率、白蛋白含量低于阳性组,两组患者在合并糖尿病、高血压、病毒性肝炎上差异均无统计学意义(均P>0.05)。两组患者的T淋巴细胞绝对计数比较差异有统计学意义(P<0.05),T辅助淋巴细胞绝对计数和T抑制淋巴细胞绝对计数两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。χ^(2)检验显示各淋巴细胞计数分段与IGRA结果相关(P<0.05);多因Logistic回归分析显示,淋巴细胞计数、淋巴细胞比率、白蛋白含量是IGRA假阴性的独立影响因。结论淋巴细胞计数、淋巴细胞比率、白蛋白含量可能是IGRA假阴性结果的影响因,对于疑似结核病患者,若出现IGRA阴性结果,需结合临床进行综合判断。
徐韫健吴柳尹小毛
关键词:Γ-干扰素释放试验假阴性肺结核淋巴细胞计数